重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗免疫黄鸡抗体水平分析

H5或H7亚型高致病性禽流感是一种高度致死性传染病,它不仅给养禽业造成了巨大的危害和损失,还威胁着人类的生命健康安全。为了分析重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+H5N1 Re-12株和H7N9 H7-Re3株)免疫抗体水平,本研究对如皋市内14个养殖场近2万只黄鸡进行重组禽流感病毒三价灭活疫苗肌肉注射,免疫三周后,随机采集420份血液样品进行HI抗体效价检测。结果表明,免疫后的鸡群均无明显不良反应,可以诱导黄鸡产生良好的抗体,检测时具有较高的抗体效价,H5亚型Re-11株平均抗体效价为7.8log2,Re-12株平均抗体效价为8.2log2,H7亚型Re-3株的平均抗体效价为6.8log2,并且免疫抗体合格率均达到70%以上,对黄鸡具有良好的安全性和免疫保护效果,研究结果为有效地控制高致病性禽流感提供参考依据。

玉林市重组禽流感病毒三价灭活疫苗的免疫效果探究

高致病性禽流感属于一类动物疫病,也是人畜共患病,其病毒毒株为H5和H7血清亚型。高致病性禽流感自2021年在欧美及亚洲国家肆虐以来,对我国乃至世界养禽业都造成了巨大损失,其中危害最严重的是H5N8亚型禽流感[1]。为降低H5N8亚型禽流感对我国家禽的危害,农业农村部经过多重评估和临床试验,对禽流感H5+H7亚型三价灭活疫苗毒株进行了调整,并于2022年将新疫苗投入使用。

H5、H7亚型二价灭活疫苗悬浮培养工艺及免疫效果研究

为获得高质量禽流感灭活疫苗候选株,研究其遗传稳定性与免疫原性。将利用反向遗传技术构建的H5N2亚型(rD8株)和H7N9亚型(rGD76株)AIV分别在MDCK悬浮细胞上传代培养,检测各代病毒液的血凝效价,并制备二价油乳剂灭活疫苗免疫4周龄SPF鸡。免疫后21d检测两种亚型抗体的HI效价,分别用H5N1亚型和H7N9亚型效检毒株对免疫鸡群进行攻毒保护实验。两株病毒传代后其血凝效价rD8株可达8log2,rGD76株可达9log2,与亲本毒株基本一致。对传代后的第1、5、15代病毒液进行HA、NA基因测序分析,各代次序列同源性较高,关键位点氨基酸序列未发生变异,与亲本毒株保持一致。实验鸡免疫后21d,血清中H5亚型HI抗体几何平均值为8.0log2,H7亚型HI抗体几何平均值为 8.4log2,攻毒后5d各组试验鸡均未检测到有排毒现象。两株病毒经传代后逐渐适应了悬浮培养的MDCK细胞,血凝效价稳定,且均具有较好的免疫原性,可作为禽流感疫苗种毒。

禽流感(H5+H7)重组杆状病毒载体三价灭活疫苗对家禽的免疫效力研究

为评估禽流感(H5+H7)重组杆状病毒载体三价灭活疫苗(rBH5-11株+rBH5-12株+rBH7-2株)对家禽的免疫保护效果,本研究将制备的3批疫苗接种21日龄SPF鸡,并进行疫苗的效力检测及H5和H7亚型禽流感病毒(AIV)流行株的攻毒试验;同时将该疫苗接种商品蛋鸡和鸭,进行免疫抗体持续期研究。疫苗免疫效力试验结果显示,3批疫苗常规剂量(0.3 mL/只)分别接种SPF鸡后3周,免疫鸡血清中针对H5亚型Re-11株和Re-12株、H7亚型H7-Re2株AIV的平均HI抗体效价为7.9 log2~8.5 log2,对照组鸡血清中针对3种抗原的HI抗体均为阴性;用H5N6、H5N1和H7N9亚型AIV分别攻毒后10 d观察期内,对照鸡均全部发病死亡,所有免疫组鸡均不发病、不排毒、不死亡,获得100%的免疫保护。流行株的效力试验结果显示,免疫后3周,接种常规剂量(0.3mL/只)疫苗鸡血清中针对3种抗原的平均HI抗体效价均在7.9 log2以上,使用2株H5N6亚型AIV、2株H5N1亚型AIV及1株H7N9亚型AIV和1株H7N2亚型AIV流行株攻毒后,各免疫组鸡均获得100%的免疫保护。抗体持续期试验结果显示,80日龄商品蛋鸡在接种2次疫苗(0.5 mL/只)3周至16周,血清中针对3种抗原的平均HI抗体效价均在6.8 log2以上;2周龄鸭接种2次疫苗(0.5 mL/只),在首次免疫后3周至14周,血清中针对3种抗原的平均HI抗体效价均在6 log2以上。上述结果首次表明,禽流感杆状病毒载体三价灭活疫苗具有良好的免疫效力,能够预防H5亚型和H7亚型禽流感(AI),商品蛋鸡和鸭按照免疫程序接种2次疫苗后能够产生持久的HI抗体。本研究为禽流感疫苗的研制提供了新思路和科学依据。

重组禽流感病毒二价灭活疫苗对H5N1亚型7.2分支病毒的攻毒保护性研究

为有效防控2006年以来出现的H5亚型7.2分支禽流感病毒(AIV)引起的免疫鸡群高致病性禽流感(HPAI)的流行,我们构建了重组AIV Re-4疫苗株,研制出含有重组AIV Re-4株的H5亚型二价系列灭活疫苗,并在我国北方地区使用,有效地控制了其流行。2012年我国北方地区再次出现7.2分支病毒引起的HPAI疫情。为评估现有H5亚型二价系列灭活疫苗对该分支病毒的免疫保护效力,本研究首先通过SPF鸡进行免疫攻毒试验评估。结果表明,分别以每羽份(0.3 mL/只)的Re-5+Re-4株和Re-6+Re-4株重组AIV H5二价油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫3周后针对重组AIV Re-4株的HI抗体均达到8 log2以上;经鼻腔接种7.2分支AIV CK/NX/2/12株(100 LD50)攻毒后,免疫鸡均获得完全保护,即无任何临床症状和排毒现象,而对照组SPF鸡全部发病死亡。此外,以哈尔滨当地养殖场中免疫H5亚型AIV灭活疫苗的48只商品蛋鸡进行攻毒试验,结果显示,商品蛋鸡血清中针对重组AIV Re-4株HI抗体平均滴度为8.3 log2,采用相同方式攻毒后也获得完全保护。本研究结果表明,Re-5+Re-4株和Re-6+Re-4株重组AIV H5二价灭活疫苗均能够对H5亚型7.2分支病毒的攻击提供良好的免疫保护效果。

重组鸡白细胞介素6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用的观察

为评价重组鸡白细胞介素6(rChIL-6)在商品鸡体内对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用,将rChIL-6与重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)采用肌肉注射方式免疫57日龄麻鸡,分别在疫苗接种前和接种后第7、14、21、35、42天,检测H5N1亚型禽流感病毒(Re-6、Re-7)血凝抑制(HI)抗体水平。结果表明:与灭活疫苗同时注射rChIL-6组比单一注射疫苗组的H5N1 Re-6抗体滴度可提高1.6 log2,Re-7抗体滴度可提高1.8 log2。提示rChIL-6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)有显著的免疫增强作用。

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗的鹅免疫试验

为探究重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鹅的免疫特性,将100只27日龄四季鹅,随机分成3组:一免组40只,接种剂量0.5 mL/只;二免组40只,二次接种剂量分别为0.5 mL/只、1.5 mL/只;对照组20只,不免疫。结果显示:一免后21 d H5(Re-8株)免疫抗体平均滴度为5.85 log2,抗体合格率为85%,28 d为7 log2,抗体合格率为100%,但60 d后平均滴度降为5.95 log2;二免后7 d为7.15 log2,39 d为7.95 log2,抗体合格率均保持100%。一免后21 d H7N9免疫抗体平均滴度为5.2 log2,抗体合格率为85%,28 d为6.6 log2,抗体合格率达到100%,60 d后降为3.15 log2;二免后7 d为6.8 log2,39 d为7.05 log2,抗体合格率均保持在100%。结果表明:该疫苗能够有效刺激鹅产生免疫保护抗体,适用于鹅的禽流感免疫;为增强免疫保护效果,建议进行二次免疫。

重组禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗对商品蛋鸡免疫程序优化

为优化商品蛋鸡场禽流感的免疫程序,掌握商品蛋鸡场H5亚型禽流感母源抗体的消长规律和不同首免日龄免疫禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株+Re-8株)疫苗的抗体效价消长情况,本试验将商品蛋鸡分成5组,1~4组为试验组,分别于7、10、14和21日龄免疫禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗,第5组为空白对照组,于14日龄肌注生理盐水,然后进行禽流感抗体检测。结果表明:蛋鸡2日龄时母源抗体水平最高,平均效价都在6 log2以上,且群体抗体合格率都在99%以上。随后,逐渐下降,在10日龄时处在6 log2附近,这表明鸡群面临禽流感病毒感染风险较大;首免日龄在7日龄、10日龄时,接种疫苗到鸡只产生具有保护作用的抗体大概在14~17 d,此间母源抗体水平也较低,疫苗刺激机体产生的抗体不足以保护鸡只。如果首免日龄在14日龄以后则更不利于鸡群禽流感的防控。建议该蛋鸡场雏鸡H5亚型禽流感疫苗首免时间在7日龄最佳。

重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗对麻鸭和番鸭免疫效果观察

为评价重组禽流感病毒三价灭活疫苗(H5N1 Re-11+Re-12株、H7N9 Re-2株)对麻鸭和番鸭的免疫特性,优化商品麻鸭和番鸭养殖场禽流感免疫程序,开展了麻鸭、番鸭现场免疫试验。以推荐的免疫程序和剂量分组免疫21日龄麻鸭和番鸭,免疫后定期采血测定抗体效价。结果显示:一免组麻鸭在35、49、63日龄产生的H5N1(Re-11、Re-12株)和H7N9 Re-2株HI抗体效价均低于5.70log2,抗体合格率为73%~89%;二免组麻鸭针对三种抗原的抗体滴度均大于6.00log2,抗体合格率均大于86%。一免组番鸭在35日龄的H5N1(Re-11、Re-12株)和H7N9 Re-2株HI抗体效价和合格率分别为5.54log2和90%,5.61log2和90%,5.63log2和90%;49日龄分别上升至6.01log2和100%,6.07log2和100%,6.15log2和100%;63日龄分别为5.66log2和100%,5.79log2和100%,5.81log2和100%;二免组番鸭在35~63日龄时,各毒株抗体滴度都较高,抗体效价均高于6.40log2,抗体合格率均为100%。对照组麻鸭与番鸭在35、49、63日龄抗体合格率均较低。结果表明,二次免疫可增强免疫保护效果。本研究为广大养殖户制定水禽高致病性禽流感免疫程序提供了数据支撑。

重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗的樱桃谷肉鸭免疫优化试验

为探究重组禽流感病毒三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株+Re-12株,H7N9 H7-Re2株)对樱桃谷肉鸭的免疫特性,同时优化免疫方案以使其尽早产生免疫保护,将300只1日龄樱桃谷肉鸭随机分成3组,每组100只:一免组于7日龄免疫1次,剂量为0.5 mL/只;二免组于1日龄、7日龄各免疫1次,剂量分别为0.2、0.4 mL/只;对照组不免疫。采用血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)进行抗体检测。结果显示:一免组肉鸭在21日龄Re-11、Re-12和H7-Re2平均抗体水平和抗体合格率均较低,分别为2.8log2和33%,2.6log2和31%,2.5log2和30%;28日龄分别上升至4.5log2和87%,4.1log2和83%,4.0log2和80%;38日龄分别为4.4log2和90%,4.2log2和87%,4.1log2和83%。二免组肉鸭在21日龄各毒株平均抗体水平和抗体合格率分别达到4.5log2和80%,4.3log2和77%,4.1log2和73%;28日龄分别为6.0log2和97%,5.6log2和93%,5.2log2和93%;38日龄分别为6.1log2和100%,5.4log2和97%,5.0 log2和97%。对照组肉鸭在21日龄母源抗体已很低,各毒株平均抗体水平和抗体合格率分别为1.2log2和3%,1.3log2和3%,1.6log2和7%;28日龄、38日龄抗体水平均为0。结果表明:该疫苗能够有效刺激肉鸭产生免疫保护抗体,适用于禽流感免疫;在1日龄、7日龄各免疫1次的效果更佳,因此在发病日龄较早的高风险区域,建议采用该方案加以防控。

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鸡和鸭的免疫效果观察

H7N9流感变异毒株的出现给我国家禽养殖业造成了严重的疫情风险。为了解和评估新型重组禽流感H5+H7二价灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9H7-Re1株)的免疫效果和抗体消长规律,我们开展了鸡、鸭现场免疫试验。监测结果表明,该疫苗对蛋鸡和蛋鸭都具有良好的免疫效果,H5和H7亚型免疫抗体水平在免疫后2周均能达到100%的免疫合格率。对雏鸡也具有较好的免疫效果,免疫一次时H5和H7亚型抗体合格率分别在一免后3周和2周达到70%以上,并维持到一免后13周;进行二次免疫后,H5和H7亚型抗体合格率在二免后1周都达到100%。对雏鸭的免疫效果相对较差,一次免疫的H5亚型抗体水平不能达到70%的免疫合格标准,二免后1周H5和H7亚型抗体合格率均能达到80%以上,必须加强免疫一次才能达到满意的免疫效果。

三黄鸡免疫重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗抗体检测实验探讨

为进一步了解三黄鸡免疫重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活苗的免疫效果。随机选取了4个三黄鸡养殖培育场开展了三价灭活疫苗以及血清保护作用的抗体蛋白质检测实验。通过实验不仅能够进一步了解三黄鸡养殖培育场的H5及H7亚型禽流感的抗体水平,还能够根据检测结果,进一步认知抗体消长规律,从而指导养殖场制定合理的免疫程序,为有效地防控禽流感的发生以及流行提供参考。

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗在肉鹅中的应用效果评价

为评价重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 Re-1株)在商品肉鹅中的安全性和有效性,各取200只肉鹅进行单剂量和大剂量安全试验,另取500只进行免疫效力试验。结果显示:接种大剂量疫苗试验组的鹅,采食、饮水及精神状况正常,未见有不良临床反应,注射部位肌肉均未观察到炎症、疫苗残留现象,疫苗吸收良好,增重差异不明显。效力试验中,加强免疫后2周,抗体合格率达70%以上,病毒分离均为阴性。结果表明,该重组禽流感病毒二价灭活疫苗具有较好的安全性和有效性。建议对2周龄雏鹅进行首免,每只注射0.5 mL,5周龄时加强免疫1次,每只1.5 mL,这样可取得较好的免疫保护效果。

重组禽流感病毒(H5＋H7)二价灭活疫苗免疫高邮鸭效果观察

为了解重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗免疫高邮鸭的效果,选取21日龄高邮鸭150只,随机分成3组,每组50只。一免组21日龄腿部肌肉注射0.5 m L/只;二免组21日龄0.5 m L/只首免、42日龄1.0 m L/只二免;对照组不免疫。分别于免疫前(0 d)和一免后21、28、60 d对采集血清样品,检测免疫抗体水平。结果显示:一免组免疫后21 d,H5(Re-8株)免疫抗体合格率达85%,H7N9(Re-1株)免疫抗体合格率达95%,28 d均达100%;二免组二免后7 d,H5(Re-8株)和H7N9(Re-1株)免疫抗体均达100%。结果表明,该疫苗能够刺激高邮鸭产生有效保护抗体,可用于防控禽流感。

樱桃谷肉鸭免疫重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗血清抗体监测报告

为监测重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)在樱桃谷肉鸭免疫效果,于2017年8~9月,对5个樱桃谷肉鸭养殖场开展了疫苗免疫与抗体检测试验。监测结果表明,35日龄时,有4个场的H5N1 Re-8禽流感亚型疫苗的平均抗体滴度高于4log2,3个场的抗体阳性率高于70%;H7N9禽流感亚型疫苗免疫后5个场的平均抗体滴度均高于4log2,抗体阳性率均高于70%。两个疫苗批次间免疫效果差异不显著(P>0.05)。但生长前期禽流感H7N9亚型存在母源抗体空白期;生长中期,禽流感H5N1亚型存在抗体低谷阶段。均存在一定程度AIV感染风险。建议进一步加强疫苗应用监测与免疫程序研究,提醒养殖场户加强生物安全防控,防止疫病发生。需要进一步加强疫苗应用监测与技术指导,提醒养殖户加强生物安全防控,防止疫病发生。

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗免疫效果评估

2017年7月,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为评价重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对家禽的安全性及免疫效果,2017年10—12月以田间试验方式,常规养殖肉鸡(江村黄鸡)、樱桃谷白鸭、黑棕鹅各120只。按程序免疫:肉鸡9日龄首免(剂量0.3 mL),30日龄二免(剂量0.5 mL);樱桃谷白鸭15日龄首免(剂量1 mL);黑棕鹅15日龄首免(剂量1 mL)、50日龄二免(剂量1.5 mL)。定期采集血清测定抗体效价直至出栏,并每日观察禽群临床表现。试验结果显示:鸡首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为4.2 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为7.5 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于8 log2,抗体合格率均大于70%。鸭首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为5.1 log2,抗体合格率均大于70%,H7亚型HI抗体效价为5.6 log2,抗体合格率均大于70%,出栏前(47日龄)H5和H7亚型HI抗体效价均大于6 log2,抗体合格率均大于70%。鹅首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为3.9 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为5.2 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于7 log2,抗体合格率均大于70%。通过临床观察,未发现该疫苗有严重免疫副反应。试验结果表明,该二价灭活疫苗安全有效,但对于生长周期超过70 d天的家禽,应免疫两次。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-4+Re-6)试验报告

高致病性禽流感是人畜共患病，在特定环境下，可感染人，当人感染高致病性禽流感后，死亡率较高，并且严重危害公共安全卫生。由于禽流感毒株的不断变异，为了有效地防控禽流感疫情的发生，2012年农业部推出重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-4＋Re-6），为了保证新疫苗的安全使用，昌平区动物疫病预防控制中心在新疫苗大批使用前先做小范围试验。

重组禽流感病毒(H5-H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)在种鸽中免疫的试验效果观察

疫苗免疫仍是预防禽流感的有效手段之一,被一些国家和地区采用。为满足H7亚型流感疫情防控急需,国家禽流感参考实验室研制了重组禽流感病毒（H5-H7）二价灭活疫苗（H5N1 Re-8株H7-Re1株）。

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗免疫效果试验

禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类急性败血性、高度接触性传染病。对家禽进行禽流感疫苗的预防接种是我国采取防制禽流感的主要措施之一，可以通过检测血清免疫抗体的血凝抑制效价来反映机体的免疫状态和抵抗力。为了了解重组禽流感病毒H5二价灭活疫苗（H5N1，Re-4株＋Re-5株）免疫抗体的消长规律，特制定本试验方案，具体如下：

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗免疫效果评估

对崇左市2017年10月至2018年9月家禽实施免疫重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1亚型Re-8株+H7N9 H7-Re1株)的免疫效果进行了评估,旨在为崇左市家禽禽流感防控决策提供参考。结果表明,H5亚型禽流感免疫抗体合格率为90.35%,H7亚型禽流感免疫抗体合格率为84.94%,禽流感病毒核酸均为阴性。H5+H7免疫抗体水平较高,抗体合格的血清中,H5平均效价为8.33log2,H7平均效价为7.41log2,疫苗安全稳定,可有效抵抗当前禽流感流行毒株的侵袭。