3-氨基苯二酰肼发光法在微粒体和重组细胞色素P450酶系中的毒理学应用(英文)

本文分别从微粒体和重组细胞色素P450酶系水平,研究了3-氨基苯二酰肼(luminol)化学发光在毒理学中的应用。研究结果表明luminol化学发光法不仅可用于P450酶系活力的测定,也可用来检测反应体系中由外来化合物代谢转化而产生的自由基。自由基清除剂SOD、过氧化氢酶和二甲亚砜对多种重组酶系的化学发光均有不同程度的淬灭作用,其中以SOD作用最强,其抑制率为93～100％。44种外来化合物的重组酶系化学发光的测定结果表明,已知在代谢转化过程中形成自由基的化合物,其化学发光强度明显增强,如四氯化碳、三氯甲烷、四氯乙烯等;经代谢转化后毒作用增强的化合物,其发光强度有的增强,如二硫化碳、苯、甲苯、甲基对硫磷等,有的不变或减弱,如对硫磷、苯胺、马拉硫磷等;毒作用与代谢转化关系不很密切的化合物,其发光强度与对照比较无变化或减弱,如氨基比林等,多环芳烃类和亚硝胺类致癌物的发光强度,除3-甲基胆蒽、二甲基亚硝胺外,均无明显变化。

六种大鼠肝微粒体细胞色素P450重组酶系对33种外来化合物的代谢

多氯联苯诱导的六种鼠肝微粒体细胞色素P450重组酶系A_1,A_2,B,C_1,C_2和D对33种外来化合物代谢的催化速率不同,其中以C_1酶系和C_2酶系催化活力最强,其次为A_1酶系,B酶系催化活力最弱,外来化合物的种类不同,经重组酶系催化的途径也不同,如卤代烷烃,卤代烯烃,苯及其同系物,亚硝胺类等化合物主要经P450C_1酶系代谢,而大多数有机磷酸酯,氨基甲酸酯类化合物及多环芳烃类致癌物则以P450 C_2酶系代谢为主。

植物细胞色素P450酶系的研究进展及其与外来物质的关系

植物细胞色素P45 0是分子量为 40— 60KD、结构类似的一类血红素 硫铁蛋白。它以可溶性和膜结合两种形态存在于植物细胞内 ,可催化多种化学反应 ,在防御植物免受有害物质侵害方面具有重要作用。目前已克隆 90多个植物细胞色素P45 0基因。本文概述了植物P45 0基因表达调控与环境、发育、组织特异性关系的研究进展。认为植物P45

氟喹诺酮类药物对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响

目的比较4种氟喹诺酮类药物[左氧氟沙星(LVFX)、加替沙星(GTFX)、莫西沙星(MXFX)、帕珠沙星(PZFX)]对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系的影响。方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、LVFX组(LV组)、GTFX组(GT组)、MXFX组(MX组)、PZFX组(PZ组),每组6只,给药方案为120mg/(kg.d),尾静脉注射给药,连续7d。末次给药后24h处死动物,差速离心法制备肝微粒体混悬液,Lowry法测定肝微粒体蛋白浓度,分光光度法检测肝微粒体CYP450酶系的含量及活性,并采用单因素方差分析进行统计。结果与空白对照组比较,MX组和GT组大鼠肝重明显降低(P<0.01,P<0.05),LV组、GT组和MX组大鼠肝微粒体蛋白浓度明显增加(P<0.01),LV组和GT组CYP450含量增加(P<0.05,P<0.01),GT组细胞色素b5(Cytb5)含量增加(P<0.05)。肝微粒体NADPH-CytC还原酶活性测定结果显示,给药组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。氨基吡啉-N-脱甲基酶活性测定结果显示,LV组、GT组和MX组酶活性与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。红霉素-N-脱甲基酶活性测定结果显示,与空白对照组比较,GT组酶活性降低,MX组酶活性升高,差异有统计学意义(P<0.01)。大鼠肝微粒体CYP450酶系亚家族活性检测结果显示,与空白对照组比较,LV组、MX组和PZ组7-苄基香豆素脱烃酶(BROD)活性升高(P<0.01),GT组7-甲氧基香豆素脱烃酶(MROD)活性降低(P<0.05)、7-苯基香豆素脱烃酶(PROD)活性增加,PZ组PROD活性降低(P<0.01),4种药物均可使乙氧基香豆素脱烃酶(EROD)活性增加(P<0.01)。结论 4种氟喹诺酮类药物对CYP450酶系均有肯定作用,对不同的酶其作用效果不同,从影响范围来看,GTFX、MXFX、LVFX和PZFX的作用依次减小。

细胞色素P450酶系及其在毒理学上的应用

综述了细胞色素P450酶系在生物有机体中催化代谢外来化合物的作用及影响因素。作为生物体内的混合功能氧化酶系统的重要组成部分,Cyt P450酶系(Cytochrome P450)在毒理学上的意义是作为早期预警系统来监测和预报环境污染状况的。在实际应用中,常以动物(多以鱼作为实验材料)肝脏中P450酶系的诱导作为评价多环芳烃、多氯联苯、二(?)(?)、石油烃类环境污染状况的最灵敏的生物学反应之一。对P450作为生化指标的优点和局限性也进行了探讨。

细胞色素P450酶系体外药物代谢研究方法进展

目的综述细胞色素P450(CYP 450)酶影响药物代谢的体外研究方法。方法参考国内外文献,对与药物代谢相关的CYP酶亚型、CYP酶种属差异、CYP酶体外反应体系、药物主要代谢酶的确认方法及体外CYP酶的抑制和诱导,进行分类、归纳和整理。结果与结论CYP 450在药物代谢中具有重要作用,药物代谢研究是新药评价体系中重要的一部分。

细胞色素P450酶系与除草剂代谢

细胞色素P45 0是广泛存在于动物、植物和微生物体内的一类具有混合功能的血红素氧化酶系。它不但能够催化苯丙烷类、萜类化合物和脂肪酸等内源性物质的生物合成 ,而且参与许多外源性物质包括除草剂等的生物氧化。综述了代谢除草剂的细菌、哺乳动物和植物细胞色素P45 0酶系 ,概述了细胞色素P45 0酶系参与除草剂代谢的作用方式 :脱烷基化作用、环甲基化羟基化作用和芳环的羟基化作用等。这些细胞色素P45 0酶系在培育除草剂抗性作物。

细胞色素P450和谷胱甘肽硫转移酶基因多态性与喉癌发生及临床预后的关系

目的 探讨代谢酶细胞色素P4 5 0 (cytochromeP4 5 0 ,CYP1A1)和谷胱甘肽硫转移酶(glutathioneS transferase ,GSTM1)基因多态性与国人喉癌的发生及临床预后的关系。方法 采用病例 对照研究的方法 ,以 89例喉癌患者及 16 4例非癌对照者的外周血白细胞为样本 ,利用聚合酶链反应(polymerasechainreaction ,PCR)技术分析了Ⅰ相代谢酶CYP1A1和Ⅱ相代谢酶GSTM1基因多态性。结果 喉癌组中CYP1A1的 3种基因型野生型 (wild type ,W)、杂合型 (wildnee +mutation ,MW )、突变型(mutate type ,M)各占 37 1%、2 7 0 %、36 0 % ,明显高于对照组 (χ2 =12 30 ,P <0 0 5 )。喉癌组中GSTM1缺失 (- )基因型频率 (5 6 2 % )高于对照组 (χ2 =4 6 1,P <0 0 5 )。联合基因型CYP1A1与GSTM1基因多态性的比较 ,则携带CYP1A1W和GSTM1(- ) ,CYP1A1MW和GSTM1(- ) ,CYP1A1M和GSTM1非缺失 (+)基因型者患喉癌的风险度分别为 1 4 2 (95 %可信区间 0 6 2～ 3 2 2 ) ,1 6 7(95 %可信区间 0 7～ 4 0 3) ,2 5 5 (95 %可信区间 1 0～ 6 5 4 ) ,而携带CYP1A1M和GSTM1(- )基因型个体患喉癌的风险度最高 ,为 4 0 2 (95 %可信区间 1 6 5～ 9 79)。吸烟与喉癌的发生有关 ,CYP1A1突变型及GSTM1缺失型与吸烟有协同作用 ,并与发病时?

细胞色素P450-RhFRED人工融合酶的研究进展与应用

来自于红球菌Rhodococcus sp.NCIMB 9784的P450RhF是一个自给自足型的细胞色素P450酶,它的血红素结构域主要负责控制酶的底物特异性,P450还原酶伴侣蛋白RhFRED与细胞色素P450血红素结构域天然融合在一起,电子主要从蛋白分子内转移到P450血红素结构域。依据融合型P450RhF自给自足的特性,有学者利用P450RhF的还原伴侣蛋白RhFRED,与其它P450构建人工融合酶P450-RhFRED,来实现多种细胞色素P450基因的功能表达。基于此建立的P450-Rh-FRED融合文库对未知功能P450的催化功能探索有很大意义,P450-RhFRED融合酶技术也可用于开发已知细胞色素P450酶的工业应用。

中草药对细胞色素P450酶系影响的研究进展

目的介绍中草药对细胞色素P450酶(cytochromep450,CYP)系的影响。方法查阅国内外近几年来关于中草药对细胞色素P450酶系影响的有关文献并进行综述。结果多种中草药能够抑制或诱导某个/某些细胞色素P450酶,从而影响合用药物的代谢,导致药物相互作用的发生。结论应重视一些中草药对细胞色素P450酶系的影响及所引起的药物相互作用和形成机制的研究,促进临床合理用药,提高中草药的有效性和安全性。

细胞色素P-450酶系的研究进展

细胞色素P-450酶系(简称P-450)因其在内源性和外源性的化学物质尤其对各种杀虫剂和环境有害化学物质的氧化代谢方面起着重要的作用,而受到广泛的重视。该酶系还在昆虫对杀虫剂的抗性机制以及选择毒性中,昆虫对寄主植物的适应性等方面都起着重要作用。

3种垫料物质对大鼠血液生化指标和肝细胞色素P_(450)酶系的影响

目的 观察松木、玉米秸、麦秸 3种垫料物质对大鼠血液生化指标和肝脏细胞色素P4 50 (CytP4 50 )酶系的影响。方法 将SD大鼠随机分为松木组、玉米秸组、麦秸组和对照组 ,于饲养 1、2、3、4周时测定血液中的丙氨酸转氨酶 (GPT)、白蛋白 (ALB)和总蛋白 (TP) ,测定肝脏细胞色素P4 50 酶 (CytP4 50 )、细胞色素b5酶 (Cytb5)和NADPH_细胞色素C还原酶。结果 3个实验组与对照组的GPT、ALB和TP值相比无统计学差异 (P >0 0 5 ) ,且均在正常范围之内。松木在 2～ 4周对CytP4 50 有显著诱导作用 (P <0 0 5 ) ,第 3周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 1～ 4周对NADPH_细胞色素C还原酶有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,其中 2～ 4周差异极显著 (P <0 0 1) ;在 2、3周对Cytb5有诱导作用 (P <0 0 5 )。麦秸在第 2、3周可以诱导CytP4 50 和Cytb5的活性增加 (P <0 0 5 ) ,在 3、4周可以诱导NADPH_细胞色素C还原酶的活性增加 (P <0 0 5 ) ;玉米秸在 2、3周时对CytP4 50 和NADPH_细胞色素C还原酶均有诱导作用 (P <0 0 5 ) ,而仅在第 3周表现对Cytb5的诱导 (P <0 0 5 )。将玉米秸组和麦秸组的酶诱导作用与松木组进行比较 ,2～ 4周 ,玉米秸组CytP4 50 的值低于松木组的值 (P <0 0 5 ) ;2、3周麦秸组CytP4 50

细胞色素P450酶系和药物的不良反应

细胞色素Ｐ４５０酶系在药物代谢中扮演了重要角色。本文描述了许多环境的和基因的因素，这些因素调整人体酶和它们的药物底物的活性。在一些情况下，细胞色素Ｐ４５０酶具有基因的多态性，导致对某些药物在表型上明显慢和明显快的代谢。慢代谢者（ＰＭｓ）易发生与浓度相关的药物不良反应，而快代谢者（ＥＭｓ）则对药物相互作用易感；其中抑制的相互作用可能会由于血桨浓度的增加而导致毒性。药物代谢被改变是药物不良反应的重要原因。

细胞色素P450s酶系催化除草剂代谢的研究进展

综述了细胞色素P450s酶系催化的单加氧反应机理,细胞色素P450s酶系在酰胺类、三氮苯类、磺酰脲类、脲类、苯氧羧酸类等除草剂的活性或降解代谢中的催化反应。讨论了研究细胞色素P450s酶系代谢作用在除草剂选择性、抗药性机理,抗除草剂作物的培育以及除草剂安全剂的解毒机理等方面的意义。

细胞色素P450酶系与苦皮藤素Ⅴ对昆虫选择毒性的关系研究

研究了细胞色素 P4 5 0含量及 NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性与苦皮藤素 对粘虫(Mythimna separata)和小地老虎 (Agrotisypsilon)选择毒性的关系。结果表明 ,对照组小地老虎中肠细胞色素 P4 5 0含量及 NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性均显著高于粘虫。苦皮藤素 处理后 ,小地老虎和粘虫中肠细胞色素P4 5 0含量均显著高于对照 ,粘虫中毒抽搐期及失水期中肠细胞色素 P4 5 0含量分别比对照升高 1 .4 6和 2 .2 6倍 ,NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性分别比对照升高 1 .2 6和 2 .5 6倍 ;处理组小地老虎中肠细胞色素 P4 5 0含量比对照升高 0 .39倍 ,NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性略高于对照。由此认为 ,中肠细胞色素 P4 5 0含量及NADPH-细胞色素 P4 5 0还原酶活性与苦皮藤素 对粘虫和小地老虎产生选择毒杀活性有着重要的关系。并且苦皮藤素 对细胞色素 P4 5 0酶系具有一定的诱导作用 ,但对不同昆虫以及同一种昆虫中 P4 5

细胞色素P450酶、谷胱甘肽转移酶多态性及其与肿瘤的关系

肿瘤的发生机制目前尚不明确 ,一般认为是环境因素和遗传因素相互作用的结果。P45 0酶属Ⅰ相代谢酶 ,可代谢多种化学物和药物 ,并可形成致癌性的物质。人谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)属Ⅱ相代谢酶 ,是催化谷胱甘肽 (GSH)与亲电子的外源物结合的二聚体酶 ,并可灭活外源物 ,促使它们排出体外 ,它们在人群中呈多态性分布。肿瘤的遗传易感性与代谢酶遗传多态性是密切相关的。通常情况下 ,大多数致癌物的形成 ,首先通过Ⅰ相代谢酶的活化 (如P45 0酶 ) ,灭活主要通过Ⅱ相代谢酶(如GST酶 )进行的。因此 ,Ⅰ相代谢酶与Ⅱ相代谢酶的多态性往往决定癌症的发生率及发生类型。