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题名重组米曲霉丝氨酸羧肽酶O的性质鉴定及脱苦应用研究
被引量:3
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作者
陈丹
游子娟
黄伟谦
马纳纳
罗晓春
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机构
华南理工大学生物科学与工程学院
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出处
《广东农业科学》
CAS
2015年第5期103-108,共6页
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基金
广东省科技计划项目(2012B020311003)
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文摘
为了研究羧肽酶在蛋白水解及对蛋白水解物脱苦中的重要作用,利用毕赤酵母表达系统对米曲霉(Asperigillus oryzae)羧肽酶O(carboxypeptidase O,Ocp O)进行表达。重组米曲霉羧肽酶O(r Ocp O)经过分子筛和离子柱纯化,对其进行脱糖基化及酶学性质的检测研究。结果表明,该蛋白酶是以糖蛋白的形式进行表达,分子量约为74 ku,脱糖基化后的相对分子质量约为56 ku,产量约为20.4 n Kat/m L。该蛋白酶是一种酸性蛋白酶,最适p H值为4.0,且在p H 3.0~6.0时保持稳定;最适温度约为40℃,具有良好的热稳定性,在60℃孵育1 h后仍能保持63%的酶活;PMSF能够显著抑制该酶酶活,证明其为丝氨酸羧肽酶。通过r Ocp O对大豆蛋白和酪蛋白的Alcalase蛋白酶水解物的进一步水解研究发现,r Ocp O水解对两种水解液的苦味均有明显减轻,并且水解度有明显升高。
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关键词
米曲霉
重组羧肽酶o
酶学性质
脱苦
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Keywords
Aspergillus oryzae
recombinant carboxypeptidase o
enzymatic characteristics
debittering
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分类号
Q814.9
[生物学—生物工程]
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