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利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7-Ag模拟表位疫苗
被引量:
4
1
作者
林涛
丁杰
+5 位作者
孟繁平
韩全利
喻召才
郭长存
刘志国
樊代明
《世界华人消化杂志》
CAS
2003年第1期14-17,共4页
目的:以复制缺陷的腺病毒为疫苗载体,构建基于胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒疫苗.方法:将编码MG7-Ag模拟表位的互补序列设计到上游引物的5/端.以含有HBcAg全序列的质粒p1.2Ⅱ为模板,通过PCR扩增,获得MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因...
目的:以复制缺陷的腺病毒为疫苗载体,构建基于胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒疫苗.方法:将编码MG7-Ag模拟表位的互补序列设计到上游引物的5/端.以含有HBcAg全序列的质粒p1.2Ⅱ为模板,通过PCR扩增,获得MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因.经序列测定证实后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组.经抗性筛选及酶切鉴定的重组质粒,再用导入293细胞进行包装,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:序列测定证实,PCR产物为胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片段;酶切鉴定表明胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片断插入了pAdTrack-CMV穿梭质粒,卡那霉素进行抗性筛选及PacⅠ酶切鉴定证实腺病毒重组质粒构建成功.PacⅠ酶切线性化的重组质粒导入293细胞3d后见明显的绿色荧光蛋白表达.回收病毒,可重复感染293细胞,证实有感染能力的病毒颗粒包装成功.结论:胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒载体的构建成功,为进一步研究胃癌MG7-Ag模拟表位诱发抗胃癌免疫打下了基础.
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关键词
细菌内
重组腺病毒系统
构建
胃癌
MG7-AG
模拟表位疫苗
下载PDF
职称材料
利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7—Ag模拟表位疫苗
2
作者
林涛
丁杰
等
《胃肠病学》
2002年第B11期14-14,共1页
关键词
细菌内
重组腺病毒系统
构建
胃癌
MG7-Ag模拟表位
疫苗
下载PDF
职称材料
乙型肝炎病毒聚合酶基因在重组腺病毒系统中的表达
被引量:
1
3
作者
杨国
尹隽
+1 位作者
吕佳清
钟江
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期1039-1043,共5页
乙型肝炎病毒是一种重要的人类病原,乙肝病毒聚合酶在病毒的复制中具有关键作用.拼接了HBV56的聚合酶全长基因,利用重组腺病毒系统,在HEK293细胞中表达乙肝病毒聚合酶.通过一种半定量PCR方法,检测到所表达的蛋白具有逆转录酶活性.这一...
乙型肝炎病毒是一种重要的人类病原,乙肝病毒聚合酶在病毒的复制中具有关键作用.拼接了HBV56的聚合酶全长基因,利用重组腺病毒系统,在HEK293细胞中表达乙肝病毒聚合酶.通过一种半定量PCR方法,检测到所表达的蛋白具有逆转录酶活性.这一研究对深入认识该酶结构与功能的关系,研制抑制病毒复制的药物,有一定的意义.
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关键词
重组腺病毒系统
乙型肝炎
病毒
表达
乙肝
病毒
聚合酶基因
HBV
病毒
复制
结构与功能
HEK293细胞
人类
原文传递
题名
利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7-Ag模拟表位疫苗
被引量:
4
1
作者
林涛
丁杰
孟繁平
韩全利
喻召才
郭长存
刘志国
樊代明
机构
中国人民解放军第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所
出处
《世界华人消化杂志》
CAS
2003年第1期14-17,共4页
基金
国家自然科学基金资助
No.398707424
文摘
目的:以复制缺陷的腺病毒为疫苗载体,构建基于胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒疫苗.方法:将编码MG7-Ag模拟表位的互补序列设计到上游引物的5/端.以含有HBcAg全序列的质粒p1.2Ⅱ为模板,通过PCR扩增,获得MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因.经序列测定证实后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组.经抗性筛选及酶切鉴定的重组质粒,再用导入293细胞进行包装,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:序列测定证实,PCR产物为胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片段;酶切鉴定表明胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片断插入了pAdTrack-CMV穿梭质粒,卡那霉素进行抗性筛选及PacⅠ酶切鉴定证实腺病毒重组质粒构建成功.PacⅠ酶切线性化的重组质粒导入293细胞3d后见明显的绿色荧光蛋白表达.回收病毒,可重复感染293细胞,证实有感染能力的病毒颗粒包装成功.结论:胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒载体的构建成功,为进一步研究胃癌MG7-Ag模拟表位诱发抗胃癌免疫打下了基础.
关键词
细菌内
重组腺病毒系统
构建
胃癌
MG7-AG
模拟表位疫苗
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7—Ag模拟表位疫苗
2
作者
林涛
丁杰
等
机构
第四军医大学西京医院消化内科
出处
《胃肠病学》
2002年第B11期14-14,共1页
关键词
细菌内
重组腺病毒系统
构建
胃癌
MG7-Ag模拟表位
疫苗
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
乙型肝炎病毒聚合酶基因在重组腺病毒系统中的表达
被引量:
1
3
作者
杨国
尹隽
吕佳清
钟江
机构
复旦大学生命科学学院微生物学和微生物工程系
出处
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期1039-1043,共5页
基金
上海市科委基础研究重点资助项目
文摘
乙型肝炎病毒是一种重要的人类病原,乙肝病毒聚合酶在病毒的复制中具有关键作用.拼接了HBV56的聚合酶全长基因,利用重组腺病毒系统,在HEK293细胞中表达乙肝病毒聚合酶.通过一种半定量PCR方法,检测到所表达的蛋白具有逆转录酶活性.这一研究对深入认识该酶结构与功能的关系,研制抑制病毒复制的药物,有一定的意义.
关键词
重组腺病毒系统
乙型肝炎
病毒
表达
乙肝
病毒
聚合酶基因
HBV
病毒
复制
结构与功能
HEK293细胞
人类
Keywords
hepatitis B virus
polymerase
recombinant adenovirus
semi-quantitative PCR
分类号
N4 [自然科学总论]
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7-Ag模拟表位疫苗
林涛
丁杰
孟繁平
韩全利
喻召才
郭长存
刘志国
樊代明
《世界华人消化杂志》
CAS
2003
4
下载PDF
职称材料
2
利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7—Ag模拟表位疫苗
林涛
丁杰
等
《胃肠病学》
2002
0
下载PDF
职称材料
3
乙型肝炎病毒聚合酶基因在重组腺病毒系统中的表达
杨国
尹隽
吕佳清
钟江
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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