硫糖铝在体外对抗幽门螺杆菌HpaA IgY的保护作用评价

目的评价硫糖铝对HpaA IgY的保护作用,为制备IgY口服制剂奠定基础。方法大量诱导工程菌DH5α-HpaA-pQE30,制备纯化的重组蛋白HpaA。以HpaA为抗原接种洛曼母鸡,制备纯化的IgY。在不同pH值、含不同浓度胃蛋白酶的HpaA IgY液中加入不同浓度的硫糖铝;将IgY液反复冻融;以ELISA法测定HpaA IgY的剩余抗体活性(AR/AC)。结果在pH 1.5条件下,60%硫糖铝可使IgY抗体剩余活性维持65.8%;在pH 2.0条件下,含30%硫糖铝的IgY可使抗体活性维持85.4%,含50%硫糖铝的IgY可完全维持抗体活性。在pH 3.0条件下,含30%硫糖铝的IgY可使抗体活性维持87.3%,而含40%以上硫糖铝的IgY几乎可完全维持抗体活性。在胃蛋白酶浓度0.02mg/mL条件下,当含10%、30%、50%硫糖铝IgY的剩余活性,在pH值2.0时,分别为62.8%、71.6%、82.5%;在pH值3.0时,分别为75.6%、87.4%、94.5%;反复冻融后,含10%硫糖铝的IgY可使抗体活性提高到70.6%,含30%硫糖铝可使IgY的抗体活性提高到82.7%,50%硫糖铝可提高到89.3%。结论 30%以上的硫糖铝可增强VacA IgY对低pH和胃蛋白酶的耐受能力,抗冻融能力,是较理想的IgY保护剂。