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结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白免疫小鼠效果初步评价
被引量:
1
1
作者
栾秀丽
范雪亭
+9 位作者
王瑞欢
李马超
于晋杰
钱程宇
曹斌
赵秀芹
刘志广
刘海灿
李桂莲
万康林
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期589-596,共8页
目的融合表达和纯化结核分枝杆菌(MTB)CFP10-ESAT6(CE),初步评价免疫效果。方法构建pET32a(+)-CE重组质粒,E.coli BL21(DE3)中融合表达,Ni-NTA层析纯化。用CE加铝佐剂,50μg CE/只/次,分3次免疫BALB/c小鼠。ELISA测定血清IgG抗体;ELISpo...
目的融合表达和纯化结核分枝杆菌(MTB)CFP10-ESAT6(CE),初步评价免疫效果。方法构建pET32a(+)-CE重组质粒,E.coli BL21(DE3)中融合表达,Ni-NTA层析纯化。用CE加铝佐剂,50μg CE/只/次,分3次免疫BALB/c小鼠。ELISA测定血清IgG抗体;ELISpot与Luminex检测细胞因子,进行MTB体外生长抑制试验。卡介苗(BCG)为阳性对照。结果CE免疫小鼠,能诱导产生高效价的IgG、IgG1和IgG2a,且IgG1(t=19.1,P<0.0001)和IgG2a(t=8.7,P<0.0001)抗体水平均高于BCG组。CE组与BCG组诱导产生的分泌IFN-γ的斑点形成细胞(SFC)数量差异无统计学意义(t=0.4,P>0.05),但诱导分泌IL-4的SFC数量高于BCG组(t=8.0,P<0.0001)。CE组诱导分泌GM-CSF(t=8.4,P<0.05)、IL-6(t=8.3,P<0.05)、IL-10(t=2.5,P<0.05)和IL-4(t=7.0,P<0.05)均高于BCG组,而CE组诱导分泌IFN-γ(t=1.4,P>0.05)、TNF-α(t=1.8,P>0.05)、IL-2(t=2.0,P>0.05)、IL-12(t=0.9,P>0.05)和IL-17(t=1.3,P>0.05)均与BCG组相似,差异无统计学意义。CE组小鼠脾细胞的MTB体外生长抑制结果与BCG组相似(t=0.8,P>0.05)。结论CE免疫小鼠可诱导较强的Th1与Th2混合型免疫反应,且有较强的体外抑制MTB生长的能力,表明CE具有良好的结核疫苗研制应用价值。
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关键词
结核分枝杆菌
培养滤液
蛋白
10
早期分泌抗原靶6
重组融合蛋白ce
疫苗
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职称材料
题名
结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白免疫小鼠效果初步评价
被引量:
1
1
作者
栾秀丽
范雪亭
王瑞欢
李马超
于晋杰
钱程宇
曹斌
赵秀芹
刘志广
刘海灿
李桂莲
万康林
机构
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
南华大学公共卫生学院
温州医科大学检验医学院与生命科学学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期589-596,共8页
基金
“一带一路”重要传染病协同防控关键技术研究(No.2018ZX1010-1002-004)。
文摘
目的融合表达和纯化结核分枝杆菌(MTB)CFP10-ESAT6(CE),初步评价免疫效果。方法构建pET32a(+)-CE重组质粒,E.coli BL21(DE3)中融合表达,Ni-NTA层析纯化。用CE加铝佐剂,50μg CE/只/次,分3次免疫BALB/c小鼠。ELISA测定血清IgG抗体;ELISpot与Luminex检测细胞因子,进行MTB体外生长抑制试验。卡介苗(BCG)为阳性对照。结果CE免疫小鼠,能诱导产生高效价的IgG、IgG1和IgG2a,且IgG1(t=19.1,P<0.0001)和IgG2a(t=8.7,P<0.0001)抗体水平均高于BCG组。CE组与BCG组诱导产生的分泌IFN-γ的斑点形成细胞(SFC)数量差异无统计学意义(t=0.4,P>0.05),但诱导分泌IL-4的SFC数量高于BCG组(t=8.0,P<0.0001)。CE组诱导分泌GM-CSF(t=8.4,P<0.05)、IL-6(t=8.3,P<0.05)、IL-10(t=2.5,P<0.05)和IL-4(t=7.0,P<0.05)均高于BCG组,而CE组诱导分泌IFN-γ(t=1.4,P>0.05)、TNF-α(t=1.8,P>0.05)、IL-2(t=2.0,P>0.05)、IL-12(t=0.9,P>0.05)和IL-17(t=1.3,P>0.05)均与BCG组相似,差异无统计学意义。CE组小鼠脾细胞的MTB体外生长抑制结果与BCG组相似(t=0.8,P>0.05)。结论CE免疫小鼠可诱导较强的Th1与Th2混合型免疫反应,且有较强的体外抑制MTB生长的能力,表明CE具有良好的结核疫苗研制应用价值。
关键词
结核分枝杆菌
培养滤液
蛋白
10
早期分泌抗原靶6
重组融合蛋白ce
疫苗
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
culture filtrate protein-10
early secretary antigentic target 6kDa protein
recombinant fusion protein
ce
vaccine
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白免疫小鼠效果初步评价
栾秀丽
范雪亭
王瑞欢
李马超
于晋杰
钱程宇
曹斌
赵秀芹
刘志广
刘海灿
李桂莲
万康林
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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