突变型(α99,β82位Lys-Cys)人重组血红蛋白的纯化

将基因突变型 (α99,β82位Lys Cys)血红蛋白在 pBV2 2 0载体中诱导表达 ,表达产物达细菌总蛋白的 2 0 %左右。该表达产物以包涵体形式存在 ,包涵体经洗涤后 ,用 8mol/L尿素溶解 ,先用Q SepharoseFastFlow阴离子交换纯化 ,再经Sephacryl 10 0凝胶过滤纯化。纯化产物经复性 。

原核系统中改造人重组血红蛋白的研究进展

重组血红蛋白作为血液代用品可以解决血源短缺和病毒传播的危险。本文从模拟动物Hb、降低氧亲和力、稳定四聚体及抗氧化四个方面综述改造重组血红蛋白使之成为合适血液代用品的研究进展,并提出了突变应遵循的原则和评价标准。

重组血红蛋白的纯化

在大肠杆菌中用热诱导方式分别进行了人重组血红蛋白的α、β珠蛋白的非融合高效表达,并对表达产物进行阴离子交换、凝胶过滤纯化,使表达产物的纯度达90%左右。此为下一步制备和纯化人血红蛋白多克隆抗体奠定了关键基础。

红细胞代用品开发中的重组血红蛋白

红细胞代用品开发中的重组血红蛋白许多年来，人们对于开发安全而有效的红细胞代用品来作为载氧手段一直有着很大兴趣。由于捐献血液的病毒污染日益严重，迫切需要找到一种血液代用品（或更准确地说红细胞代用品，因为这种溶液不能代替血液的所有功能）。发展红细胞代用品...

重组血红蛋白对大鼠失血性休克的治疗效果

目的 探讨两种重组血红蛋白及清蛋白对失血性休克的治疗效果。方法24只大鼠随机等分为3组,由股动脉抽血建立失血性休克模型,保持平均动脉压(MAP)40 mm Hg45 min。休克后对照组输入人体清蛋白(HSA),其他两组分别输入重组血红蛋白rHb 1.1和rHb 2.0。测定休克前后不同时间点MAP、肠系膜上动脉血流、股动脉血气和肠系膜上静脉血气值。结果 rHb 1.1输入后30rainMAP显著高于休克前(P<0.01)和其他两组(P<0.05);在休克后各时间点上,肠系膜上动脉血流量接近休克前水平,但显著低于rHb2.0和HSA组(P<0.01)。重组血红蛋白可恢复并维持MAP休克前水平60-90min,清蛋白只能维持30min。动脉及肠系膜上静脉血气分析显示两种重组血红蛋白治疗效果相似,显著高于HSA组(P<0.05)。结论 重组血红蛋白治疗失血性休克效果优于清蛋白,rHb 2.0是较理想的血液替代品。

重组血红蛋白对冠心病大鼠氧供需平衡的影响

目的探讨两种重组血红蛋白（rHb1．1、rHb2．0）对冠心病（CHD）大鼠氧供需平衡的影响。方法按随机数字表法将雄性Wistar大鼠分为正常对照组、CHD模型组、人血清白蛋白（HSA）处理组、rHb1．1处理组、rHb2．0处理组，每组20只。高脂饮食联合脑垂体后叶素注射构建大鼠CHD模型。制模成功后股动脉抽血使平均动脉压（MAP）降至40mmHg（1mmHg=0．133kPa），随后各处理组于以60mL·kg^-1·h^-1的速率（20mL／kg）分别输入13．4％HSA、rHb1．1和rHb2．0进行复苏治疗。计算制模前和末次注射垂体后叶素后12h心电图ST段变化值，记录给药0、30、60、90和120min时MAP、心率（HR）、肠系膜上动脉血流量（QSMA）及动脉血气分析结果。实验末禁食12h，取血用酶法测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量；处死大鼠取心脏，光镜下观察心脏组织病理学改变。结果与正常对照组比较，模型组制模前后心电图ST段变化值明显增大，TC、TG明显升高。与模型组比较，rHb两组可明显降低趼段变化值，而HSA无此作用；rHb的短期输入对血脂无显著影响，但可减轻心肌组织病理学改变。与正常对照组比较，模型组MAP明显降低，HR明显加快，QSMA减慢，pH值、剩余碱（BE）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、HCO3-明显下降。rHb1．1组和rHb2．0组MAP较HSA组升高更明显，且rHb2．0组给药90min和120min时MAP显著高于rHb1．1组（mmHg：80．9±3．3比69．4±4．9，79．2±4．0比69．1±3．7，均P〈0．05）；HSA、rHb1．1、rHb2．0处理组给药30minHR即降至正常，明显低于模型组（次／min：534±46、518±28、526±37比609±52，均P〈0．05）；rHb2．0组给药60、90、120min时QSMA较模型组明显增加（qv·mL^-1·min^-1：5．6±0．4比3．9±0．6，6．2±0．6比4．1±0．4，6．9±0．7比4．0±0．3，均P〈0．05），而HSA组和rHb1．1组QSMA与模型组比较差异均无统计学意义。HSA组给药后pH值、BE、PaCO：均未恢复到正常水平；rHb1．1组pH、PaCO2和HCO3-在给药后60min、BE在给药后90min恢复到正常水平；而rHb2．0组各指标提前30min即可恢复到正常水平。结论rHb可显著升高CHD缺血损伤大鼠血压，增加循环中的血流量，降低心肌的氧需求，还可快速、有效地纠正缺氧状态下的血液代谢性酸中毒，且rHb2．0的效果优于rHb1．1。

基因重组人血红蛋白研究进展

目前，由于人们对安全血液以及自然灾害、战争等特殊环境下对血液的大量需求，加上血液常规保存及来源有限等条件的限制，使得血液代用品的研究成为研究热点。基因工程重组技术为此提供了一种有效的方法。由于基因工程产品性能稳定、可大量生产、

用基因工程方法生产重组人血红蛋白

本文概述了研制重组人血红蛋白(rhHb)的发展过程、存在问题与解决方法,回顾了在原核系统中高效表达rhHb的几种途径及人们从不同种类脊椎动物的Hb得到的启示。

美国将开发重组人血红蛋白

美国克罗拉多州索马托金公司计划生产一种重组人血红蛋白(RHH),它能像红细胞一样,与氧结合,经转运释放氧到组织中去。RHH与氧结合密切,在血流中RHH分子不会被破坏。1992年5月出版的《自然》杂志上。

人工血液前瞻性研究

本文以国内外前人对人工血液的研究为基础 ,通过概述人工血液研究的进展 ,和几代制品的发展情况 ,重点从人工血液的最新研究热点 脂质体微囊包埋技术和基因工程的前沿科研角度 ,围绕人造血红蛋白的稳定性、制备工艺、临床毒副作用进行了综述。

外科手术的血液代用品

研制血液代用品的理论基础在美国,每年约有1200万单位的血液被转输到大约400万受者体内。2/3的袋装红血细胞单位在围手术期环境下被输注。一些对血液应用的限制包括:(1)血液需要进行血型和交叉配对的时耗过程以便最大限度地减少输血反应的可能性。(2)袋装红血细胞的贮藏寿命有限,超过42天后即被扔掉。(3)