重组角蛋白单体外源表达、纯化及鉴定

为了制备具有生物活性的可溶性重组角蛋白单体,构建能够外源表达重组角蛋白的重组菌株BL21(DE3)-pET32a(+)-Keratin。使用最适诱导条件(0.5 mmol/L IPTG,18℃培养15 h)诱导重组角蛋白基因表达,经Ni柱亲和层析法纯化得到蛋白产量约为40 mg/L,浓度约为2 mg/mL,Western Blot证实此蛋白是重组角蛋白。S.maltophilia DHHJ在重组角蛋白M9培养基中能够正常生长且不会产生絮状沉淀,与化学法制备的角蛋白相比,重组角蛋白溶解性更高。这更有利于S.maltophilia DHHJ降解角蛋白分子过程的研究。