重组人过氧化物还原酶-5通过诱导巨噬细胞极化提高抗肿瘤免疫

肿瘤细胞能够采用不同的策略抑制人体免疫系统,使其不能正常杀伤肿瘤细胞。前期研究表明,重组人过氧化物还原酶-5(human peroxiredoxin-5,hPRDX5)能够激活机体正常的抗肿瘤免疫反应,从而控制与清除肿瘤,然而,其确切的作用机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨hPRDX5是否通过激活或者逆转小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化状态,从而发挥其抗肿瘤活性。CCK8法检测结果显示,与对照组相比,不同剂量hPRDX5均能显著增强巨噬细胞活力(P<0.001);一氧化氮(nitric oxide,NO)检测试剂盒检测结果显示,hPRDX5显著增强RAW264.7细胞NO分泌水平(P<0.001);ELISA检测结果揭示,hPRDX5促进RAW264.7细胞TNF-α(P<0.01)和IL-6(P<0.001)的分泌;流式细胞术结果揭示,hPRDX5能够升高RAW264.7细胞抗原分化簇(cluster of differentiation,CD)80(P<0.01)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)(P<0.001)的表达,降低肿瘤条件培养基(tumor conditional culture solution,TCS)诱导的巨噬细胞CD206(P<0.001)的表达;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测揭示,hPRDX5可以提高巨噬细胞对小鼠胰腺癌Panc02细胞的杀伤活性。hPRDX5能够激活小鼠巨噬细胞RAW264.7,促进其M1型极化,并且逆转M2型极化,通过免疫增强作用发挥抗肿瘤活性。

重组大肠杆菌S3-2产羰基还原酶发酵工艺优化及动力学研究

以重组大肠杆菌S3-2为发酵菌株,通过单因素实验和正交实验对重组大肠杆菌S3-2产羰基还原酶的1 L发酵罐发酵工艺进行优化,并通过Logistic方程和Luedeking-Piret方程对重组大肠杆菌S3-2分批发酵产羰基还原酶的动力学过程进行模拟。结果表明,重组大肠杆菌S3-2的最佳发酵工艺为:IPTG在OD600值为1.0时诱导、IPTG终浓度为0.30 mmol·L^(-1)、种子液OD600值为3.0时接种、诱导温度为26℃,在此条件下,菌体细胞干重为1.586 g·L^(-1)、羰基还原酶酶活为0.712 U·mL^(-1);菌体生长、羰基还原酶酶活及甘油消耗的动力学模型的拟合度分别为0.9883、0.9917和0.9807,说明该模型对重组大肠杆菌S3-2的发酵动力学模型拟合良好,为后续中试放大研究提供了理论依据。

游泳训练及联合补充线粒体营养素α-硫辛酸对wistar2型糖尿病大鼠血脂代谢及脂质过氧化水平的影响

目的:观察2型糖尿病(T2DM)模型大鼠,经8周游泳训练后,血脂代谢、血清氧化应激、血糖(FBG)、胰岛素敏感性(ISI)及肝脏组织二相酶活性变化,检测联合作用方式(游泳训练及联合补充α硫辛酸)对wistarT2DM大鼠血脂代谢及脂质过氧化水平的影响,并探讨其内在影响机制。方法:实验材料wistar大鼠60只,造模完成后随机分成4组,对照组(CON);α硫辛酸(LA);游泳运动组(SEX);α硫辛酸+游泳运动组(LA+SEX),每组15只。进行游泳训练共计8周,观察各组大鼠血脂代谢水平、FBG、ISI及肝脏组织二相酶活性变化。结果:经联合作用方式可极显著性降低wistar大鼠血清总胆固醇和甘油三酯水平,降低LDL-C含量和FFA水平,提高HDL-C;在降低FBG,提高ISI作用上存在叠加效应(P<0.01),对胰岛素水平无显著性影响;在改善血清氧化应激水平作用上(降低ROS和提高SOD),存在增强作用(P<0.01);对肝脏组织二相酶的影响,在对谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)存在增强作用,对醌氧化还原酶1(NQO-1)则无此作用。结论:联合作用方式可以有效降低血清及肝脏脂质过氧化水平,纠正血脂代谢异常,提高ISI。其保护作用可能是通过降低机体氧化应激水平,维持机体血脂正常代谢水平,减少氧化应激而实现。提示,联合作用方式可以为治疗T2DM提供新思路。

超声心动图评价重组Peroxiredoxin-2蛋白对糖尿病心肌病大鼠心功能的影响

目的应用超声心动图来检测外源重组过氧化物还原酶(rePrx)-2对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心功能的影响。方法 30只SD雄性大鼠分为对照组(n=10),单纯DCM模型组(单纯模型组,n=10),干预组(DCM+rePrx-2,n=10只)。干预组于糖尿病模型构建成功后通过腹部皮下植入微渗透泵方法给予rePrx-2蛋白。于DCM大鼠模型建立后第12周检测各组的心脏超声心动图结果,并应用HE及Masson染色对大鼠心肌组织进行病理检查。结果与单纯模型组相比较,干预组大鼠心脏收缩期室间隔厚度(IVSs),舒张期室间隔厚度(IVSd),收缩期左心室内径(LVIDs),舒张期左心室内径(LVIDd),舒张期左室后壁厚度(LVPWd)和收缩期左室后壁厚度(LVPWs)显著降低,差异均具有统计学意义(均P<0.05);同时干预组心功能指标左室射血分数(LVEF)和缩短分数(LVFS)显著增高,差异具有统计学意义(均P<0.05),Masson及HE染色可见干预组明显改善单纯模型组心肌纤维化损伤程度。结论通过超声心动图检查,能有效证实rePrx-2对DCM大鼠心肌重构及心功能有明显改善作用。

食管鳞癌患者血清PRDX6、白介素-2及白介素-6差异表达的临床应用价值

目的 观察血清PRDX6、IL-2和IL-6在食管鳞癌(ESCC)患者中的表达情况,分析各指标间表达相关性,探讨血清PRDX6、IL-2和IL-6在ESCC中的诊断价值。方法 本研究共纳入50例ESCC患者和50名健康受试者。采取酶联免疫吸附试验(Elisa)检测两组血清PRDX6、IL-2和IL-6并分析表达水平差异,观察不同临床特征的ESCC患者的血清PRDX6、IL-2和IL-6水平,分析ESCC患者血清PRDX6与IL-2、IL-6的相关性,评价血清PRDX6、IL-2和IL-6对ESCC的诊断效能。结果 ESCC中血清PRDX6和IL-6表达水平显著高于健康受试者(P<0.05),IL-2水平显著低于对照组(P<0.05)。PRDX6、IL-2、IL-6及其三者联合诊断ESCC的AUC分别为0.712、0.759、0.803和0.751。PRDX6联合IL-2或IL-6诊断ESCC的准确性提高(P<0.05)。ESCC组不同TNM分期、肿瘤分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移有无、肿瘤定位与血清PRDX6、IL-2和IL-6水平差异均无统计学意义(P均>0.05),并且ESCC组的血清PRDX6、IL-2、IL-6表达水平之间未观察到显著相关性(P均>0.05)。结论血清PRDX6、IL-2和IL-6可作为诊断ESCC的血清标志物,PRDX6联合IL-2或IL-6检测可提高诊断灵敏度、特异度,尚未发现PRDX6、IL-2和IL-6表达水平差异与肿瘤病理因素存在相关性。

miR-383靶向PRDX3对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨微小RNA-383(miR-383)靶向调控人过氧化物还原酶-3(PRDX3)的表达对肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法体外培养肝癌HepG2细胞,应用实时定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测HepG2细胞中miR-383表达水平;将HepG2细胞分为空白(NG)组、miR-383阴性对照(NC)组、miR-383过表达(miR-383 mimics)组,转染48 h后,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;应用TargetScan数据库预测miR-383的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验加以验证,应用蛋白免疫印记(Western blotting)法检测对PRDX3、Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果与NG组、NC组比较,miR-383 mimics组HepG2细胞中miR-383表达水平显著升高(P<0.05);HepG2细胞增殖抑制率明显升高,侵袭、迁移细胞数明显减少(P<0.05)。TargetScan数据库预测显示PRDX3是miR-383潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系。Western blotting结果显示,miR-383过表达后,PRDX3、Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著下调。结论miR-383可能通过下调PRDX3表达抑制人肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭。

慢性丙型肝炎患者重组人干扰素α-2a短期治疗后诱导1型糖尿病一例

患者女，42岁。慢性丙型肝炎病史2年，于2013年3月3日住院，查丙型肝炎病毒（HCV）RNA1．32×10^5IU／ml，HCV基因型1b型，肝、肾功能正常，空腹血糖（FPG）5．2mmol／L，空腹胰岛素12．70mlU／L，糖化血红蛋白（HbA1c）4．5％，抗甲状腺球蛋白抗体（TgAb）、抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）及其他自身抗体均阴性.