重组酵母测评系统对环境样品雌激素活性的检测

采用重组酵母测评系统对香烟烟雾溶液和汽车尾气提取物分别进行雌激素活性的测定.结果显示在受试浓度下,PBS烟雾溶液和DMSO烟雾溶液的β-半乳糖苷酶活性与溶剂对照相比均无显著性差异(P>0·05).汽油燃料车尾气在600mL·mL-1时,其酵母菌液OD600明显低于DMSO对照组(P<0·05);在150mL·mL-1剂量时,汽油燃料车尾气所检出的β-半乳糖苷酶活性为44·56,与DMSO对照组相比有显著性差异(P<0·05),当剂量增加至300mL·mL-1,酶活性升高为66·43,约为对照组的12倍,其它各剂量组酶活性与DMSO对照组相比无显著性差异(P>0·05);甲醇燃料车尾气的β-半乳糖苷酶活性与溶剂对照相比无显著性差异(P>0·05).提示汽油燃料车尾气具有弱雌激素活性,甲醇燃料车尾气和香烟烟雾溶液未检出雌激素活性.

对酵母细胞酶法破壁的研究

研究了在重组酵母测评系统中,重组酵母细胞破壁条件的优化问题。通过酶法破壁酵母细胞得知,对于0.75mL酵母液来说,最佳反应时间为4h,最适反应温度为40℃,最佳酶量为10mg。同时,蜗牛酶破壁效果明显好于溶菌酶。

汽油、甲醇燃烧汽车尾气类雌激素活性研究

目的探讨汽油、甲醇燃烧汽车尾气的雌激素样作用,为甲醇取代汽油作为汽车燃料提供卫生学依据。方法采用环境雌激素基因重组酵母测评系统,分别测定汽油、甲醇燃烧汽车尾气的雌激素活性。结果汽油燃烧汽车尾气在高剂量1000mL/mL时吸光度值(A600)仅为0.081,与二甲亚砜(DMSO)对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),说明汽油尾气在该剂量下对酵母细胞有毒性作用;汽油燃烧汽车尾气在31.25mL/mL剂量时检出雌激素活性,与DMSO对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),其他各剂量组均未检出雌激素活性。甲醇燃烧汽车尾气各剂量组与DMSO对照组相比,A600差异均无统计学意义(P>0.05),也未检出雌激素活性。结论以汽油作为燃料的汽车尾气具有微弱雌激素样作用,以甲醇作为燃料的汽车尾气无雌激素样作用。