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白纹伊蚊唾液ralb34k2-1对DENV2在不同细胞中复制的影响
被引量:
1
1
作者
李莹
黄贞植
+3 位作者
覃燕春
朱亚妮
吴家红
商正玲
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2023年第6期683-688,694,共7页
目的探讨白纹伊蚊ralb34k2-1对DENV2在不同宿主细胞中复制的影响。方法采用Dot-ELISA和间接ELISA检测ralb34k2-1与DENV2/DENV-EDⅢ的结合特性。采用qRT-PCR检测不同剂量ralb34k2-1对蚊细胞C6/36、Aa23T,哺乳动物细胞BHK-21、RAW264.7、H...
目的探讨白纹伊蚊ralb34k2-1对DENV2在不同宿主细胞中复制的影响。方法采用Dot-ELISA和间接ELISA检测ralb34k2-1与DENV2/DENV-EDⅢ的结合特性。采用qRT-PCR检测不同剂量ralb34k2-1对蚊细胞C6/36、Aa23T,哺乳动物细胞BHK-21、RAW264.7、HacaT、THP-1中DENV2-E基因表达的影响;检测C6/36细胞中抗菌肽DEFE、DPT以及RAW264.7、THP-1细胞中抗病毒因子IFN-β、ISG15、ISG56基因表达的影响。结果Dot-ELISA和间接ELISA检测显示ralb34k2-1能与DENV2、DENV-EDⅢ结合,其中与DENV-EDⅢ结合的A值最高,为0.9177±0.04422。ralb34k2-1预孵育可促进DENV2在C6/36、Aa23T细胞中的复制(2^(-ΔΔCT)值最高为2.0419±0.1027)。5μg ralb34k2-1对C6/36中DEFE的抑制率可达73%(P<0.05)。ralb34k2-1能促进HacaT、THP-1细胞中DENV2的复制,瞬时混合组DENV-E2^(-ΔΔCT)值最高,为2.8024±0.3091,高于预孵育组的2.1325±0.06746,但对鼠源细胞BHK21、RAW264.7中DENV-E基因的表达无显著影响(均P>0.05)。抗病毒因子检测显示,ralb34k2-1单独作用能诱导RAW264.7、THP-1中IFN-β、ISG15、ISG56的表达,其中5μgralb34k2-1作用于RAW264.7细胞后ISG56RNA相对表达(2^(-ΔΔCT))值为377.9795±12.5457,THP-1细胞ISG56RNA的相对表达(2^(-ΔΔCT))值为9.5703±1.0332。结论ralb34k2-1可与DENV2、DENV-EDⅢ结合,推测该蛋白可能通过抑制蚊细胞中抗菌肽的表达协助蚊源细胞中DENV2的复制,而在人源细胞中ralb34k2-1协助DENV2复制的机制与蚊源细胞不同,可为伊蚊雌蚊唾液中34k2蛋白参与DENV2在蚊-人细胞中循环的研究提供实验线索。
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关键词
白纹伊蚊
重组34k2蛋白
DENV
2
蚊源细胞
鼠源细胞系
人源细胞
原文传递
题名
白纹伊蚊唾液ralb34k2-1对DENV2在不同细胞中复制的影响
被引量:
1
1
作者
李莹
黄贞植
覃燕春
朱亚妮
吴家红
商正玲
机构
贵州医科大学基础医学院免疫学教研室
联勤保障部队第九四○医院检验科
贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2023年第6期683-688,694,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.81960295)。
文摘
目的探讨白纹伊蚊ralb34k2-1对DENV2在不同宿主细胞中复制的影响。方法采用Dot-ELISA和间接ELISA检测ralb34k2-1与DENV2/DENV-EDⅢ的结合特性。采用qRT-PCR检测不同剂量ralb34k2-1对蚊细胞C6/36、Aa23T,哺乳动物细胞BHK-21、RAW264.7、HacaT、THP-1中DENV2-E基因表达的影响;检测C6/36细胞中抗菌肽DEFE、DPT以及RAW264.7、THP-1细胞中抗病毒因子IFN-β、ISG15、ISG56基因表达的影响。结果Dot-ELISA和间接ELISA检测显示ralb34k2-1能与DENV2、DENV-EDⅢ结合,其中与DENV-EDⅢ结合的A值最高,为0.9177±0.04422。ralb34k2-1预孵育可促进DENV2在C6/36、Aa23T细胞中的复制(2^(-ΔΔCT)值最高为2.0419±0.1027)。5μg ralb34k2-1对C6/36中DEFE的抑制率可达73%(P<0.05)。ralb34k2-1能促进HacaT、THP-1细胞中DENV2的复制,瞬时混合组DENV-E2^(-ΔΔCT)值最高,为2.8024±0.3091,高于预孵育组的2.1325±0.06746,但对鼠源细胞BHK21、RAW264.7中DENV-E基因的表达无显著影响(均P>0.05)。抗病毒因子检测显示,ralb34k2-1单独作用能诱导RAW264.7、THP-1中IFN-β、ISG15、ISG56的表达,其中5μgralb34k2-1作用于RAW264.7细胞后ISG56RNA相对表达(2^(-ΔΔCT))值为377.9795±12.5457,THP-1细胞ISG56RNA的相对表达(2^(-ΔΔCT))值为9.5703±1.0332。结论ralb34k2-1可与DENV2、DENV-EDⅢ结合,推测该蛋白可能通过抑制蚊细胞中抗菌肽的表达协助蚊源细胞中DENV2的复制,而在人源细胞中ralb34k2-1协助DENV2复制的机制与蚊源细胞不同,可为伊蚊雌蚊唾液中34k2蛋白参与DENV2在蚊-人细胞中循环的研究提供实验线索。
关键词
白纹伊蚊
重组34k2蛋白
DENV
2
蚊源细胞
鼠源细胞系
人源细胞
Keywords
Aedes albopictus
ralb
34
k
2
-1 protein
DENV
2
mosquito cells
mouse cells
human cells
分类号
R384.1 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
白纹伊蚊唾液ralb34k2-1对DENV2在不同细胞中复制的影响
李莹
黄贞植
覃燕春
朱亚妮
吴家红
商正玲
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2023
1
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