鼻咽癌病人血清抗重组EB病毒Zta抗原IgG抗体检测

目的:用免疫印迹法检测鼻咽癌病人血清中抗EB病毒Zta-IgG抗体。方法:利用含EB病毒BZLF1基因完整开放读框的pGEX2TK-ZcDNA质粒转染大肠杆菌,诱导产生并提纯重组基因产物GST-Zta,以GST-Zta作为抗原,用免疫印迹法检测24例鼻咽癌病人血清中Zta-IgG抗体,28例正常人血清作为对照。结果:鼻咽癌组血清中91.7%Zta-IgG阳性,对照组中10.7%Zta-IgG阳性,两组差异有统计学意义(P=0.000)。结论:免疫印迹法检测鼻咽癌病人血清中Zta-IgG抗体有较高的敏感性和特异性,可能可以作为鼻咽癌病人诊断筛选的指标。

抗重组EB病毒抗原双重抗体检测血清学诊断鼻咽癌的研究(英文)

背景与目的:在评估4种EB病毒抗原酶联免疫吸附法的基础上,探讨优化抗重组EB病毒抗原双重抗体检测应用于血清学诊断鼻咽癌。方法:收集广州地区57例治疗前鼻咽癌患者和58例健康成人的血清。应用EB病毒特异抗原(谷胱甘肽转移酶重组融合蛋白)为基础的4种免疫酶联吸附法,即EBNA1-IgA,EBNA1-IgG,Zta-IgA和Zta-IgG检测血清中抗EB病毒的抗体水平。结果:EBNA1-IgA的灵敏度(0.9123)和阴性预测值(0.9074)是单独使用4种ELISA实验中最高的。Zta-IgA具有最高的正确率(л,0.8870)和Youden指数(J,0.7738)。当评估配对的ELISA时,EBNA1-IgA和Zta-IgA双重阳性的所有指标是4种双重阳性实验中最高的。5例EBNA1-IgA阴性的鼻咽癌患者呈Zta-IgA阳性,而7例Zta-IgA阴性的鼻咽癌患者呈EBNA1-IgA阳性。结论:EBNA1-IgA酶联免疫吸附的单独检测在血清学诊断鼻咽癌时优于其他3项(EBNA1-IgG、Zta-IgA和Zta-IgG)单独酶联免疫吸附检测。EBNA1-IgA和Zta-IgA两项的组合应用在血清学诊断鼻咽癌时有互补作用,是血清学检测的合适组合。

裂解性复制诱导产生可视化重组Epstein Barr病毒

为了在病毒的整个基因组中研究基因的功能,分析基因与基因之间的相互作用,含有整个野生型EB病毒(EBV)基因组的BAC-EBV质粒(p2089),首先被转染EBV阴性的HEK293细胞,经潮霉素筛选建立了HEK293/p2089稳定细胞系.再构建pcDNA3.1(+)/BZLF1和pcDNA3.1(+)/BALF4真核表达质粒,共转染至HEK293/p2089细胞内,诱导EBV裂解性复制产生可视化的重组EBV颗粒.重组EBV颗粒感染Raji细胞,在倒置荧光显微镜下和流式细胞仪记数GFP阳性细胞,根据这些'绿色Raji单位'确定病毒的滴度.在国内首次建立这种以细菌人工染色体(BAC)为基础的EBV感染性克隆技术,将允许对EB病毒基因组中任何基因的任何遗传修饰,为在整个基因组中对EB病毒基因功能的研究奠定了基础,也为对EBV与其相关的肿瘤如鼻咽癌发生机理的研究建立了新的技术平台.