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结核分支杆菌重组ESAT6蛋白抗原诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究
被引量:
7
1
作者
张灵霞
吴雪琼
+3 位作者
史迎昌
梁建琴
张俊仙
张翠英
《中华结核和呼吸杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期383-384,共2页
关键词
结核分支杆菌
重组esat6蛋白
抗原
迟发性超敏反应
结核病
诊断
esat
6
蛋白
原文传递
结核分枝杆菌esat6基因原核表达载体的构建和表达
被引量:
1
2
作者
陈全
骆旭东
+2 位作者
蒋英
江山
朱道银
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003年第1期4-7,共4页
目的:构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因原核表达载体并进行表达。方法:PCR扩增MTb esat6基因,克隆人pQE30质粒,测序正确后,再亚克隆人pET32a(+)质粒,构建pQE30-ESAT6和pET32a(+)-ESAT6重组体。结果:重组体分别转化DH5a和BL21(DE3)菌后,经...
目的:构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因原核表达载体并进行表达。方法:PCR扩增MTb esat6基因,克隆人pQE30质粒,测序正确后,再亚克隆人pET32a(+)质粒,构建pQE30-ESAT6和pET32a(+)-ESAT6重组体。结果:重组体分别转化DH5a和BL21(DE3)菌后,经IPTG诱导,pQE30-ESAT6未表达目的蛋白,而pET32a(+)-ESAT6表达出19kDa左右重组蛋白。SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4h重组蛋白表达量最高,表达蛋白以可溶性非包涵体形式存在于胞浆中,表达量占全菌蛋白质的42%,用Western blotting证实其有良好的抗原性。经过Ni-NTA柱纯化,获得了纯度为92%的重组蛋白。结论:成功构建原核表达载体pET32a(+)-ESAT6,并获得重组ESAT6蛋白,为MTb重组抗原的应用奠定基础。
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关键词
结核分枝杆菌
基因原核表达载体
克隆
重组esat6蛋白
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职称材料
题名
结核分支杆菌重组ESAT6蛋白抗原诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究
被引量:
7
1
作者
张灵霞
吴雪琼
史迎昌
梁建琴
张俊仙
张翠英
机构
解放军第三○九医院结核病研究室
出处
《中华结核和呼吸杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期383-384,共2页
关键词
结核分支杆菌
重组esat6蛋白
抗原
迟发性超敏反应
结核病
诊断
esat
6
蛋白
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
结核分枝杆菌esat6基因原核表达载体的构建和表达
被引量:
1
2
作者
陈全
骆旭东
蒋英
江山
朱道银
机构
重庆医科大学基础医学院微生物学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003年第1期4-7,共4页
基金
重庆市卫生局科学基金(00-1006)
文摘
目的:构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因原核表达载体并进行表达。方法:PCR扩增MTb esat6基因,克隆人pQE30质粒,测序正确后,再亚克隆人pET32a(+)质粒,构建pQE30-ESAT6和pET32a(+)-ESAT6重组体。结果:重组体分别转化DH5a和BL21(DE3)菌后,经IPTG诱导,pQE30-ESAT6未表达目的蛋白,而pET32a(+)-ESAT6表达出19kDa左右重组蛋白。SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4h重组蛋白表达量最高,表达蛋白以可溶性非包涵体形式存在于胞浆中,表达量占全菌蛋白质的42%,用Western blotting证实其有良好的抗原性。经过Ni-NTA柱纯化,获得了纯度为92%的重组蛋白。结论:成功构建原核表达载体pET32a(+)-ESAT6,并获得重组ESAT6蛋白,为MTb重组抗原的应用奠定基础。
关键词
结核分枝杆菌
基因原核表达载体
克隆
重组esat6蛋白
Keywords
Mycobacterium tuberculosis(MTb)
esat
6
gene
Recombinant
esat
6
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分支杆菌重组ESAT6蛋白抗原诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究
张灵霞
吴雪琼
史迎昌
梁建琴
张俊仙
张翠英
《中华结核和呼吸杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
7
原文传递
2
结核分枝杆菌esat6基因原核表达载体的构建和表达
陈全
骆旭东
蒋英
江山
朱道银
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003
1
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参考文献
引证文献
统计分析
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