细粒棘球蚴重组HSP70蛋白免疫保护力研究

目的探讨细粒棘球蚴重组HSP70蛋白(rEgHSP70)免疫小鼠对原头蚴攻击感染的保护性效果。方法选取雌性6周龄ICR小鼠随机分为两组:实验组和对照组(每组10只),实验组接种rEgHSP70 3次,每次间隔两周,对照组注射等量的PBS。两组小鼠在末次免疫后2周用1500只活细粒棘球蚴进行腹腔攻击感染,攻击感染30周后剖杀小鼠,无菌取脾组织,并记录每只小鼠腹腔内包囊数量和直径,评价免疫保护力。用流式细胞仪检测脾组织中CD4+T细胞和CD8+T细胞,计算两者比值。结果细粒棘球蚴重组HSP70蛋白接种对原头蚴攻击感染的免疫保护力为44.20%,rEgHSP70免疫组小鼠脾CD4+T亚群(0.52±0.082)高于对照组小鼠(0.44±0.07),P<0.05,rEgHSP70免疫组小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+T亚群比值(3.35±0.02)高于对照组(2.00±0.77),P<0.05。结论细粒棘球蚴重组HSP70可诱导小鼠产生44.20%免疫保护力,具有一定的疫苗潜力。

生物信息学技术在细粒棘球蚴热休克蛋白70重组疫苗研究中的应用

目的通过基因序列分析,寻找细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)热休克蛋白基因(Heat shock pro-tein70,HSP70),为包虫病防治筛选新的候选疫苗抗原。方法①登录GenBank公共数据库,检索EgHSP70目的基因序列。②对克隆基因进行测序,结果输入DNAStar、BioSun分析软件和互联网SWISS-MODEL数据库,对重组EgHSP70的特性、抗原表位及构象进行预测分析。结果①获得了具有完整开放阅读框的EgHSP70核苷酸序列。②DNAStar分析软件推算氨基酸序列结果显示,EgHSP70由133个理论氨基酸组成,分子量约为14.53kDa。DNAStar、BioSun分析软件确定了重组EgHSP70可能的抗原表位。与其他动物热休克蛋白70氨基酸的同源性分析结果显示EgHSP70具有高度的保守性。结论生物信息学技术在EgHSP70重组疫苗研究中有一定的理论和应用价值。