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重组KGF-2突变体对TNBS诱导的复发性大鼠炎性肠病模型治疗作用的研究
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作者 王金凤 王园园 +5 位作者 付文亮 蔡欣 邹民吉 邢微微 陈惠华 徐东刚 《医学研究杂志》 2013年第7期25-28,共4页
目的制备复发性大鼠炎性肠病模型,评价重组KGF-2突变体(STEA)给药对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的复发性大鼠炎性肠病模型的治疗效果。方法利用2%的TNBS(100mg/kg)对雄性Wistar大鼠进行灌肠,3周后,再次利用TNBS(10毫克/只)处理这些大... 目的制备复发性大鼠炎性肠病模型,评价重组KGF-2突变体(STEA)给药对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的复发性大鼠炎性肠病模型的治疗效果。方法利用2%的TNBS(100mg/kg)对雄性Wistar大鼠进行灌肠,3周后,再次利用TNBS(10毫克/只)处理这些大鼠。于再次灌肠当天,治疗组的大鼠腹腔注射3mg/kg STEA,模型对照组和正常组注射等量的PB缓冲液,每天1次,连续7天。对各组大鼠的生存状态、血清中IL-6和IL-1β的表达水平、以及结肠组织病理变化等情况进行观察和分析。结果利用TNBS二次致敏的方法,成功制备了复发性大鼠炎性肠病模型。STEA给药能显著降低模型大鼠血清中IL-6和IL-1β的表达水平,提高大鼠的存活率,促进受损结肠黏膜的修复。结论 STEA对TNBS诱导的复发性大鼠的结肠损伤具有治疗作用。 展开更多
关键词 重组kgf-2突变体 TNBS 炎性肠病 结肠黏膜
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重组人KGF-2突变体对小鼠小肠辐射损伤的防治作用研究
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作者 付文亮 王园园 +9 位作者 王金凤 邢微微 徐涛 袁顺宗 朱泽轶 洪明 金哲 邹民吉 苏航 徐东刚 《医学研究杂志》 2010年第12期60-63,共4页
目的探讨重组人KGF-2突变体给药对60Coγ全身照射小鼠小肠黏膜损伤的保护作用。方法将小鼠分为正常组、模型组、重组KGF-2突变体防治组和安多霖防治组。利用60Coγ射线放射源对模型组和防治组小鼠进行全身照射,总剂量为6.5Gy。从存活率... 目的探讨重组人KGF-2突变体给药对60Coγ全身照射小鼠小肠黏膜损伤的保护作用。方法将小鼠分为正常组、模型组、重组KGF-2突变体防治组和安多霖防治组。利用60Coγ射线放射源对模型组和防治组小鼠进行全身照射,总剂量为6.5Gy。从存活率、生存状态和小肠组织病理切片等方面分析重组人KGF-2突变体的防治效果。结果重组人KGF-2突变体防治组存活率明显高于安多霖防治组和模型组;病理切片观察结果显示,重组人KGF-2突变体给药能够促进小肠隐窝细胞的增生,加快受损肠黏膜上皮的修复。重组人KGF-2突变体防疗组在毛色、行动状态等形态学指标上也明显好于模型组。结论重组人KGF-2突变体给药可以显著提高存活率,对60Coγ照射小鼠的小肠组织损伤具有较好的防治作用。 展开更多
关键词 重组kgf-2 辐射损伤 黏膜修复 存活率
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人干细胞生长因子Ca^(2+)依赖糖识别结构域缺失突变体的重组表达及生物学活性的初步探讨
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作者 原野 要晖宇 +4 位作者 李秀森 郭子宽 吴英 江小霞 毛宁 《生物技术通讯》 CAS 2005年第3期235-238,共4页
本文作者已有的研究结果证明,完整的人干细胞生长因子(hSCGF)没有种属特异性,即可以作用于小鼠骨髓造血细胞。这一点与在Ca2+依赖糖识别结构域(CRD)缺失了78个氨基酸残基的截短分子(hSCGFβ)有所不同。本研究从hSCGF全长cDNA中完全删除... 本文作者已有的研究结果证明,完整的人干细胞生长因子(hSCGF)没有种属特异性,即可以作用于小鼠骨髓造血细胞。这一点与在Ca2+依赖糖识别结构域(CRD)缺失了78个氨基酸残基的截短分子(hSCGFβ)有所不同。本研究从hSCGF全长cDNA中完全删除了CRD结构域编码序列,进一步探讨CRD结构域的生物学功能。由于该突变体序列GC含量较高,因此将该缺失突变体序列克隆在GST融合表达载体中进行融合表达。通过低温(28℃)诱导,表达产物主要以可溶蛋白的形式存在。利用亲和层析纯化CRD结构域完全缺失的hSCGF突变体融合蛋白,通过检测重组突变分子的协同刺激造血活性有无改变来初步探讨CRD结构域在hSCGF分子中的生物学功能。研究结果表明,去掉完整CRD结构域的突变分子仍然具有造血刺激活性。据此推断CRD结构域在hSCGF分子中可能对于受体配体结合起辅助作用。 展开更多
关键词 细胞生长因子 缺失突变体 Ca^2+ 结构域 糖识别 生物学活性 重组表达 生物学功能 全长cDNA 融合表达载体 研究结果 CRD 种属特异性 氨基酸残基 造血细胞 小鼠骨髓 编码序列 GC含量 可溶蛋白 表达产物 融合蛋白 层析纯化
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重组人角质细胞生长因子(KGF-2)在毕赤酵母中的克隆与表达 被引量:5
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作者 于成德 杨生玉 +3 位作者 沈永红 冯长访 王俊芳 朱显峰 《河南大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第3期59-61,共3页
利用RT -PCR技术 ,从体外培养的人胚胎成纤维细胞中扩增出人角质细胞生长因子 (KGF - 2 )的cDNA及基因序列 ,并将其基因序列克隆入质粒pGEM -TEasy中 ,经测序与文献报道序列一致 .将KGF - 2基因切出后定向插入酵母分泌性表达质粒pPICZα... 利用RT -PCR技术 ,从体外培养的人胚胎成纤维细胞中扩增出人角质细胞生长因子 (KGF - 2 )的cDNA及基因序列 ,并将其基因序列克隆入质粒pGEM -TEasy中 ,经测序与文献报道序列一致 .将KGF - 2基因切出后定向插入酵母分泌性表达质粒pPICZαA中 ,转化毕赤酵母菌株GS115 ,获得的重组体经甲醇诱导可表达出人角质细胞生长因子KGF - 2 .表达的KGF - 2经Ni2 + 柱亲和层析纯化后 ,有很好的生物学活性 . 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子 kgf-2 毕赤酵母 基因克隆 基因表达 多肽类药物 表达质粒
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hIL-5的E13Q突变体在大肠杆菌中的高效表达
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作者 梅俊杰 高杰英 +2 位作者 丁广治 刘育红 孔祥英 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期173-174,共2页
白细胞介素5(IL-5)主要由Th2细胞产生,对B细胞、T细胞和嗜酸性粒细胞具有多种生物学作用。人IL 5(hIL-5)cDNA编码134个氨基酸,其成熟多肽由115个氨基酸组成。目前hIL 5 cDNA在大肠杆菌表达尚未见报道。
关键词 突变体 肠杆菌 白细胞介素5 流行病研究 医学科学院 高效表达 微生物 TH2细胞 重组蛋白 生物学作用
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治疗癌基因HER—2/neu过表达肿瘤的重组毒素腺病毒突变体
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《科技开发动态》 2002年第12期43-43,共1页
关键词 治疗药物 癌基因 HER-2/NEU 重组毒素腺病毒突变体 肿瘤
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霍乱毒素突变体和福氏2a asd基因缺失突变体的构建
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作者 廖翔 王恒梁 +1 位作者 冯尔玲 苏国富 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期370-371,共2页
关键词 缺失突变体 霍乱毒素 asd基因 福氏2A 痢疾菌苗 痢疾疫苗 同源重组 医学科学院 染色体 下游序列
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角质细胞生长因子2突变体对小鼠放射性肠黏膜损伤的治疗研究 被引量:1
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作者 王艳峰 邹民吉 +4 位作者 徐涛 王园园 徐东刚 陈惠华 苏航 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期805-808,共4页
目的研究角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)突变体对放射性肠黏膜损伤的治疗作用。方法将无特定病原体(specific pathogen free,SPF)C57BL/6J雌性小鼠随机分为模型组(A组)、静脉注射KGF-2突变体组(B组)、KGF-2突... 目的研究角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)突变体对放射性肠黏膜损伤的治疗作用。方法将无特定病原体(specific pathogen free,SPF)C57BL/6J雌性小鼠随机分为模型组(A组)、静脉注射KGF-2突变体组(B组)、KGF-2突变体加骨髓移植组(C组)和单纯骨髓移植组(D组),用γ射线放射源60Co对小鼠进行单次全身照射,总剂量为12 Gy,另设正常对照组(E组)。通过分析小鼠照射后30 d存活率,照射后72 h小肠组织病理变化、凋亡与自噬情况,阐述KGF-2突变体对放射性肠黏膜损伤的治疗效果。结果 A组照射后9 d内小鼠全部死亡,C组30 d仍有70%存活。HE染色显示,C组小肠组织各级结构最为完整,免疫组化发现C组小肠隐窝处自噬水平升高,凋亡水平降低。结论 KGF-2突变体对放射性肠黏膜损伤有显著的治疗作用。 展开更多
关键词 放射 kgf-2突变体 放射性肠黏膜损伤 骨髓移植
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乙型肝炎表面抗原不同突变体对细胞免疫的影响 被引量:1
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作者 白玉 夏国良 +5 位作者 郭瑜 丛郁 贾志远 郭敏卓 赵洪兰 詹美云 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期124-127,共4页
目的 研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)不同突变体对细胞免疫的影响。方法 将野生型和变异型HBsAg基因重组质粒NS2 Swt、NS2 S12 6、NS2 S133、NS2 S14 1、NS2 S14 5分别转染CHO细胞,72h收获细胞上清。采用ELISA法检测各组细胞上清preS2 ... 目的 研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)不同突变体对细胞免疫的影响。方法 将野生型和变异型HBsAg基因重组质粒NS2 Swt、NS2 S12 6、NS2 S133、NS2 S14 1、NS2 S14 5分别转染CHO细胞,72h收获细胞上清。采用ELISA法检测各组细胞上清preS2 蛋白的表达量。将这些细胞上清刺激PHA活化的人淋巴细胞,MTS法检测不同变异株抗原对淋巴细胞增殖活性以及淋巴细胞分泌IFN γ、IL 10和IL 2的影响。结果 变异和野毒株(wt)各组细胞上清preS2 蛋白的表达量基本一致。变异和wt重组HBsAg刺激T细胞后,其上清MTS显色后的A4 90 值均高于空白组和pCI neo组,说明HBsAg中的蛋白可以促进T细胞增殖;T12 6S氨基酸变异HBsAg能够刺激IFN γ分泌增加;M133T氨基酸变异刺激IL 10分泌增加。结论 这4种乙型肝炎病毒(HBV)变异株感染人体后,机体对它们的细胞免疫反应可能不会有明显的增强或减弱,但也不能忽视T12 6S和M133T变异抗原改变了某些细胞因子的表达,可能对机体细胞免疫造成的潜在影响。 展开更多
关键词 突变体 乙型肝炎表面抗原(HBsAg) 乙型肝炎病毒(HBV) PRES2蛋白 ELISA法检测 淋巴细胞增殖活性 转染CHO细胞 重组HBsAg IFN-γ IL-10 氨基酸变异 细胞上清 基因重组质粒 细胞免疫反应 机体细胞免疫 分泌增加 人淋巴细胞
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重组人角质细胞生长因子-2涂膜剂促进大鼠皮肤烫伤的修复 被引量:2
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作者 缪云萍 程敏 +3 位作者 叶小弟 诸葛定娟 王虎根 郑高利 《浙江省医学科学院学报》 2005年第1期22-24,共3页
角质细胞生长因子-2(Keratinocyte growth factor-2,KGF-2)又称成纤维细胞生长因子-10(Fibroblast Growth Factor-10,FGF-10),是FGF家族成员之一。KGF-2生理作用主要承担间质细胞-上皮细胞之间的信号传递。KGF02能促进角质上皮细胞... 角质细胞生长因子-2(Keratinocyte growth factor-2,KGF-2)又称成纤维细胞生长因子-10(Fibroblast Growth Factor-10,FGF-10),是FGF家族成员之一。KGF-2生理作用主要承担间质细胞-上皮细胞之间的信号传递。KGF02能促进角质上皮细胞的增殖,刺激伤口周围上皮细胞的再生、分化和迁移, 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子-2 皮肤烫伤 涂膜剂 成纤维细胞生长因子 修复 大鼠 上皮细胞 kgf-2 家族成员 信号传递 间质细胞 生理作用 FGF
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HCV核心基因插入突变体编码蛋白对人肝癌细胞系(Huh-7)细胞基因表达的影响
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作者 窦骏 刘蓬勃 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期501-506,共6页
目的用基因表达分析法鉴定丙型肝炎病毒(HCV)核心(Core,C)区基因插入突变体编码蛋白在人肝癌细胞系(Huh7)表达,探讨该蛋白生物学功能及其基因表达改变与致病的关系。方法构建HCV1bC基因插入突变体编码蛋白重组表达质粒,建立表达C基因插... 目的用基因表达分析法鉴定丙型肝炎病毒(HCV)核心(Core,C)区基因插入突变体编码蛋白在人肝癌细胞系(Huh7)表达,探讨该蛋白生物学功能及其基因表达改变与致病的关系。方法构建HCV1bC基因插入突变体编码蛋白重组表达质粒,建立表达C基因插入突变体编码蛋白Huh7细胞系,按Affymetrix公司实验程序制备探针、再与该公司HGU133A和HGU133B芯片杂交。对基因表达上调或下调≥3倍的基因,用NetAffx作进一步分析。并用半定量RTPCR对其中3个上调基因进行鉴定。结果Microarray分析显示,HCV1bC基因插入突变体编码蛋白比C蛋白引起更多的基因表达改变,主要集中在信号传导、蛋白酶活性、分子转运、免疫反应等,特别是免疫反应基因表达更加显著。C基因插入突变体编码蛋白表达可同时导致凋亡基因/抗凋亡基因表达上调或下调及致癌基因上调。半定量RTPCR对有趣的致癌基因FHL2、抗凋亡基因PRKCZ和凋亡基因LGALS1的鉴定结果表明,FHL2、PRKCZ和LGALS1基因的表达比空载体转染对照组相同基因明显上调。结论HCVC基因插入突变体编码蛋白在Huh7细胞表达对其基因表达有很大影响,其中对免疫反应基因的影响更明显,这一结果对理解HCVC基因插入突变体编码蛋白在HCV致病过程中的作用及其研制抗HCV药物均有重大的参考价值。 展开更多
关键词 人肝癌细胞系 基因插入 编码蛋白 突变体 半定量RT-PCR 丙型肝炎病毒(HCV) AFFYMETRIX Microarray 基因表达改变 抗凋亡基因 PRKCZ 重组表达质粒 HCV-1B 免疫反应基因 抗HCV药物 表达上调 致癌基因 FHL2 生物学功能 蛋白酶活性
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重组人角质细胞生长因子-2流体膜的研究
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作者 王虎根 《浙江省医学科学院学报》 2007年第2期19-20,共2页
人角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)又称为成纤维细胞生长因子-10(fibroblast growth factor—10,FGF-2),是FCF家族成员之一,特异性靶细胞为各种上皮细胞,特异性受体为氨酸激酶受体FGFR-2IIIb(KGFR)... 人角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)又称为成纤维细胞生长因子-10(fibroblast growth factor—10,FGF-2),是FCF家族成员之一,特异性靶细胞为各种上皮细胞,特异性受体为氨酸激酶受体FGFR-2IIIb(KGFR)和FGFRI。KGF-2生理作用主要承担间质细胞一上皮细胞之间的信号传递,它能促进角质上皮细胞的增殖,刺激伤口周围上皮细胞的再生、分化和迁移,但对成纤维细胞和内皮细胞则无直接作用, 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子-2 成纤维细胞生长因子 特异性受体 上皮细胞 体膜 氨酸激酶受体 kgf-2 家族成员
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