基于展示技术的Cd^(2+)结合肽筛选与酵母重金属吸附研究

利用Cd2+螯合树脂,对噬菌体随机十二肽库进行Cd2+结合肽筛选,并将亲和力较强的结合肽展示在酵母EBY100表面,以期得到耐受和吸附能力具佳的工程菌,为重金属的生物修复提供新的思路。通过筛选共得到6条不同的Cd2+结合肽,其中有2条对Cd2+亲和力较强,将其串联展示于酵母细胞表面。与对照菌相比,酵母工程菌对Cd2+、Ni 2+的吸附率显著提高。酵母工程菌对Cd2+的吸附率随诱导时间的增加而增加,诱导24h时最高,达30.4%,此时酵母工程菌对Ni 2+的吸附率达到32.9%。

基于分子模拟分析的紫贻贝体内重金属Cd^(2+)脱除机制

采用海水中添加制备的蛋白水解肽-Fe^(2+)配合物(TPH-Fe^(2+))暂养处理紫贻贝,结合分子同源模建、动力学模拟及相互作用能分析技术,探索TPH-Fe^(2+)对紫贻贝体内Cd^(2+)的脱除作用机制。结果显示,添加40 mg/L TPH-Fe^(2+)净化处理15 d后,紫贻贝体内Cd^(2+)质量分数由47.099μg/g降低至24.221μg/g,脱除效率显著(P<0.05)。进而以老鼠金属硫蛋白(metallothionein from rat,记为1DFT)为模板,同源模建出紫贻贝金属硫蛋白中β-结构域(metallothionein,MT)的三维结构,通过MT-Cd^(2+)、MT-Fe^(2+)、MT-Cd^(2+)+水解肽、MT-Fe^(2+)+水解肽等体系分子动力学模拟及半经验量子力学计算发现,紫贻贝体内Cd^(2+)脱除机制可能为水解肽携带Fe^(2+)到达机体靶向器官或位点遇到MT-Cd^(2+)复合物后,降低了MT与Cd^(2+)间的结合力,便于MT解脱Cd^(2+)并恢复活性,同时释放的Fe^(2+)可与Cd^(2+)竞争性结合MT,从而起到协助脱除Cd^(2+)的效果。研究表明,蛋白水解肽-Fe^(2+)配合物有效脱除贻贝体内Cd残留,可作为一种双壳贝类养殖饲料添加剂加以应用。

流感病毒血凝素衍生肽对T细胞活化抑制作用的研究

目的研究人类白细胞抗原(HLA)-DRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308-317变构肽在HLA-DR4限制性T细胞激活中的作用。方法采用固相法合成HA308-317原型肽及其变构肽。通过计算机模拟及流式细胞术分析HA308-317原型肽及其变构肽与HLA-DR4分子的结合作用;并检测这些多肽对T细胞激活信号CD69表达和白细胞介素(IL)-2分泌的影响及对T细胞增殖的抑制作用。结果HA308-317变构肽能结合细胞表面HLA-DR4分子,对T细胞激活信号CD69表达和IL-2分泌无明显影响,并能抑制HA308-317原型肽诱导的T细胞活化。结论替换HA308-317多肽中识别T细胞受体(TCR)的氨基酸残基形成的HA变构肽可与HLA-DR4分子结合,而且可抑制其原型肽诱导的T细胞活化。