谷胱甘肽过氧化酶4及铁蛋白重链1在甲状腺乳头状癌组织中的表达

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)组织中谷胱甘肽过氧化酶4(GPX-4)和铁蛋白重链1(FTH-1)的表达情况,分析二者在PTC发生发展中的生物学意义。方法采集2019年6月至2023年8月合肥市第三人民医院40例PTC病人的手术切除标本,分别为癌组织和癌旁组织。应用免疫组织化学染色检测PTC组织和癌旁组织中GPX-4和FTH-1的表达情况,然后利用SPSS 22.0软件进行统计分析。结果GPX-4在PTC组织与癌旁组织中的阳性表达率分别为80.00%(32/40)和15.00%(6/40),GPX-4在癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ^(2)=18.38,P<0.001)。同样,FTH-1在PTC组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为72.50%(29/40)和10.00%(4/40),FTH-1在癌组织中的阳性表达率也显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ^(2)=18.58,P<0.001)。GPX-4和FTH-1在PTC组织中的表达与PTC的TNM分期及淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。结论GPX-4和FTH-1在PTC组织中均呈阳性高表达,与PTC的TNM分期和淋巴结转移有关,提示其与PTC的发生发展密切相关,二者检测可作为评估PTC临床预后的辅助指标,也为PTC的分子靶向治疗提供新的方向。

铁蛋白重链1在头颈鳞癌中的表达及对口腔鳞癌增殖、迁移、侵袭的影响

目的:明确头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)、口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织与癌旁组织中铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)的表达差异,分析FTH1表达与HNSCC、OSCC患者预后及临床病理特征之间的关系。在口腔鳞癌CAL-27细胞株中探讨其对OSCC的影响,为临床上OSCC的分子检测与治疗提供新的策略。方法:通过癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载HNSCC转录组数据样本及临床样本信息,使用R软件研究HNSCC肿瘤组织与正常组织中FTH1的表达差异,分析FTH1表达与HNSCC患者临床病理特征之间的关系。收集40例OSCC患者的癌及癌旁组织样本,通过RT-qPCR检测样本中FTH1的表达,明确FTH1在OSCC组织中的差异表达,结合患者临床病理特征进行相关性分析。选取人正常口腔黏膜上皮细胞系OMECs和口腔鳞癌细胞系CAL-27培养,进一步检测并明确FTH1在OSCC中的表达变化。体外实验研究FTH1对CAL-27细胞增殖、侵袭、迁移的影响,利用CCK-8实验观察FTH1对CAL-27增殖活性能力的作用,利用划痕愈合实验(Transwell小室实验)检测FTH1对CAL-27迁移和侵袭的作用,利用Matrigel Transwell实验检测FTH1对CAL-27侵袭的作用。结果:TCGA数据库结果显示,FTH1在HNSCC组织中表达显著高于癌旁组织(P<0.001),其表达与患者不良病理特征和不良预后相关(P<0.05)。FTH1在OSCC组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.001),其表达与患者颈淋巴结转移、病理分级、临床分期有关(P<0.05)。FTH1在CAL-27中的表达显著高于OMECs(P<0.001)。CCK-8实验结果显示,敲减FTH1可抑制CAL-27的增殖能力(P<0.05)。划痕愈合实验和Transwell小室实验结果显示,敲低FTH1可抑制CAL-27的迁移、侵袭能力(P<0.05)。结论:在HNSCC和OSCC中,FTH1基因表达上调,其表达与不良病理特征和不良预后有关。敲低FTH1基因将抑制CAL-27的增殖、迁移及侵袭能力,其在OSCC中可能发挥促癌作用。

电离辐射对鼻咽癌中铁死亡驱动因子SOCS1与抑制因子FTH1表达水平的影响

目的 探索铁死亡驱动因子细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)与抑制因子铁蛋白重链1(FTH1)在鼻咽癌中的表达水平及电离辐射对其的影响。方法 分析来自GEO数据库的鼻咽癌数据集GSE53819(18个鼻咽癌样本和18份鼻咽正常组织样本)和GSE12452(31个鼻咽癌样本和10份鼻咽正常组织样本)中SOCS1与FTH1的表达水平,并联合GSE62328(30个鼻咽癌样本)分析不同肿瘤分期、淋巴结转移状态与原发-复发类型中SOCS1和FTH1表达水平;利用GSE48501数据集中放射抵抗性鼻咽癌CNE2-IR细胞和放射敏感性鼻咽癌CNE2细胞中m RNA表达数据,分析SOCS1与FTH1在放射抵抗性和放射敏感性鼻咽癌细胞株中的表达水平;以经2 Gy电离辐射照射后的鼻咽癌C666-1细胞为实验组,0 Gy电离辐射照射的鼻咽癌C666-1细胞为对照组,应用RT-q PCR法分别检测其中SOCS1与FTH1的表达水平。结果 GEO数据库分析显示,鼻咽癌组织中SOCS1与FTH1表达水平高于正常鼻咽组织(P<0.05)。与伴淋巴结转移的鼻咽癌样本比较,无淋巴结转移的鼻咽癌样本中SOCS1与FTH1表达水平较高(P<0.05)。SOCS1与FTH1在放射抵抗性和放射敏感性鼻咽癌细胞株中的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果提示,实验组C666-1细胞中SOCS1表达水平高于对照组,FTH1表达水平低于对照组(P<0.05)。结论 铁死亡驱动因子SOCS1与抑制因子FTH1在鼻咽癌中差异表达且可作为鼻咽癌放射治疗潜在靶点。

清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及对铁死亡的影响

目的 研究清瘟败毒饮对盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用及机制研究。方法 取75只SD健康雄性大鼠,按随机数字表法分为假手术组,模型组,清瘟败毒饮低、中、高剂量组,共5组。假手术组只切开腹壁并缝合,不进行CLP,灌胃等体积生理盐水,其余各组运用CLP建立脓毒症肺损伤大鼠模型。检测治疗后各组大鼠生存率、肺组织的湿干重比、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总蛋白含量、BALF总细胞数、肺组织脂质过氧化水平及肺组织HE染色,研究清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤的治疗作用。运用Western-Blot法,检测各组大鼠肺组织中铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)、铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)、转铁蛋白(transferrin)、谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白表达情况,探讨清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠模型中铁死亡相关因子的影响,初步研究其作用机制。结果 模型组生存率为40.00%,清瘟败毒饮低、中、高剂量组生存率分别为53.33%、60.00%、73.33%;同假手术组相比,模型组能明显增加脓毒症肺损伤大鼠肺湿干重比(W/D)(P<0.01),模型组BALF上清液总蛋白含量显著增多(P<0.01),总细胞数显著增多(P<0.01)。同模型组相比,清瘟败毒饮中、高剂量组能减少脓毒症肺损伤大鼠肺W/D(P<0.05,P<0.01),清瘟败毒饮低、中、高剂量组均能显著减少BALF上清液总蛋白含量(P<0.05,P<0.01),减少总细胞数(P<0.05);同假手术组相比,模型组大鼠白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxide,4-HNE)、总谷胱甘肽(total-glutathione,T-GSH)、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)和二价铁离子(Fe^(2+))水平显著升高(P<0.01)。同模型组相比,清瘟败毒饮中剂量和高剂量组大鼠IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著降低(P<0.01),清瘟败毒饮高剂量组大鼠MDA和4-HNE水平显著降低(P<0.01);清瘟败毒饮各剂量组均能降低GSSG和Fe^(2+)水平,尤其以清瘟败毒饮高剂量组更为显著(P<0.01)。同假手术组相比,模型组大鼠中T-GSH、GSH水平和GSH/GSSG比值明显降低,清瘟败毒饮各剂量组均能显著提高T-GSH、GSH水平和GSH/GSSG比值(P<0.01),模型组大鼠FTH、FTL、Transferrin蛋白表达量显著增加(P<0.01),GPX4蛋白表达明显下降(P<0.01)。同模型组相比,经各剂量清瘟败毒饮干预后FTH、FTL的蛋白表达量显著降低(P<0.01),而中、高剂量清瘟败毒饮干预同样可以降低Transferrin的蛋白表达量(P<0.01);此外,清瘟败毒饮各剂量组可明显升高GPX4蛋白表达(P<0.01)。结论 清瘟败毒饮对脓毒症肺损伤大鼠的治疗作用明确,其治疗机制可能同抑制铁死亡相关。

大鲵铁蛋白重链FTH基因的克隆、鉴定及表达分析

从大鲵皮肤cDNA文库中,筛选出大鲵铁蛋白重链AdFTH的cDNA序列,其全长为864 bp,开放阅读框为531 bp,编码176个氨基酸,5′和3′非翻译编码区(Untranslated region,UTR)分别为120 bp和214 bp,预测蛋白质的分子量为20.6 kD,理论等电点PI为5.41,预测蛋白无信号肽及跨膜结构,在5′-UTR的22—51 bp处有一个特殊的铁反应元件(Iron response element,IRE)。同源性和系统进化分析表明,铁蛋白重链在进化上有着较高的保守性。实时定量PCR结果表明,大鲵铁蛋白重链mRNA在各个组织中广泛表达,其中肝脏的表达量高于其他8种组织,表明肝脏是大鲵主要的参与铁储存代谢的器官。成功构建了大鲵铁蛋白重链的重组表达载体pET32a-AdFTH,利用大肠杆菌Escherichia coli BL21表达系统和Ni2+亲和层析方法,获得了纯度较高的重组大鲵铁蛋白,并证实重组大鲵铁蛋白(Recombinant AdFTH protein,rAdFTH)具有氧化和吸收铁离子的功能,为进一步制备AdFTH抗体了解其在大鲵体内的多种作用机制打下坚实的基础。

砷诱导Jurkat T淋巴细胞铁蛋白重链的表达

目的了解三氧化二砷诱导人JuikatT淋巴细胞的差异表达基因,探讨砷对淋巴细胞基因转录的影响机制。方法在体外用三氧化二砷(5μmol/L,24h)处理人JurkatT淋巴细胞后,应用抑制性消减杂交技术(SSH)和基因克隆技术构建差异表达的cDNA文库,用PCR技术和测序技术鉴定阳性克隆。结果用SSH技术构建了由三氧化二砷诱导的人JurkatT淋巴细胞的差异表达基因的正向消减cDNA文库。经测序分析结果显示,铁蛋白重链在正向消减cDNA文库中有2个阳性克隆。结论三氧化二砷可诱导铁蛋白重链的表达,铁蛋白重链在淋巴细胞抗砷损伤机制中可能起着一定的作用。

重稀土硅铁对焊缝金属冲击断口的影响

采用扫描电子显微镜（SEM）研究了重稀土硅铁对低合金高强钢焊缝金属低温冲击韧性的断口的影响，结果表明，向焊缝金属过渡适量的重稀土硅铁，可以有效地改善焊缝断口的形貌特征，提高焊缝的低温冲击韧性。

四川白鹅铁蛋白重链基因克隆及其mRNA表达研究

目的研究四川白鹅铁蛋白重链(Ferritin heavy chain,FHC)基因编码区序列特征及其组织表达差异。方法应用分子生物学技术克隆FHC编码区序列并分析预测其编码蛋白质的结构和功能,实时荧光定量PCR技术定量检测四川白鹅13种组织中FHC的表达量。结果四川白鹅FHC编码区序列为549 bp,编码182个氨基酸,其蛋白质分子质量为21345.9,理论pI值为5.74。四川白鹅FHC氨基酸序列与北京鸭和原鸡的相似性最高(分别为100%和97%),与北京鸭具有最近的亲缘关系。FHC是稳定的可溶性蛋白质,含有高度保守的2个铁蛋白铁离子结合结构域标签和7个亚铁氧化酶双铁离子结合位点。在所检测的四川白鹅13种组织中,FHC基因均有表达,并且不同组织中FHC表达量存在明显差异。四川白鹅脾脏和视网膜中FHC的表达量显著高于其他各组织(P<0.05),肝脏、垂体和肾脏次之,肌肉中FHC表达量最低。结论四川白鹅FHC是高度保守的、组织特异性表达的基因,具有维持铁稳态和参与抗氧化的双重功能,这为阐明鹅FHC功能和铁代谢机制的研究奠定了理论基础。

ELISA验证兔铁蛋白重链与RHDV VP60相互作用

为验证本实验室前期实验中初步鉴定的兔铁蛋白重链(FTH)与兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)具有相互作用关系,本研究采用RT-PCR技术从兔肝脏扩增编码FTH基因,并将其克隆至pET-32a(+)中转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达。重组FTH蛋白(rFTH)经IPTG诱导获得表达,采用Ni-NTA Agarose纯化rFTH。利用纯化的VP60作为ELISA包被抗原检测FTH与VP60的相互作用。结果表明,ELISA检测的OD490nm值与FTH蛋白量呈正相关。本研究进一步验证了FTH与VP60具有相互作用关系。

川芎嗪对大鼠脊髓损伤后铁代谢的影响

背景:铁代谢紊乱是导致脊髓损伤后神经细胞铁死亡的重要病理因素,不利于脊髓损伤修复。川芎嗪作为行气活血中药川芎的有效活性成分单体,被证实对脊髓损伤具有良好的抗炎、抗脂质过氧化反应以及神经保护作用,需进一步明确其促进脊髓损伤修复的作用机制。目的:研究川芎嗪对大鼠脊髓损伤后铁代谢的调节作用,探讨其改善脊髓损伤的相关机制。方法:将36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和川芎嗪组,每组12只;假手术组仅行椎板切除术,术后给予生理盐水腹腔注射;模型组和川芎嗪组制备脊髓损伤模型,术后分别给予生理盐水和川芎嗪腹腔注射,术后4周取材。采用BBB肢体运动功能评分评价大鼠肢体运动功能,尼氏染色观察神经元形态,普鲁士染色观察脊髓组织铁沉积,铁检测试剂盒检测脊髓组织铁含量,免疫组化检测铁蛋白重链1和铁蛋白轻链表达,Western blot检测铁蛋白重链1和铁蛋白轻链的蛋白表达量。结果与结论:(1)模型组和川芎嗪组大鼠各个时间点BBB评分显著低于假手术组(P <0.01),自术后第14天,川芎嗪组大鼠BBB评分显著高于模型组(P <0.01);(2)尼氏染色结果显示,假手术组神经元形态结构正常,模型组可见大量瘀血,神经元形态结构紊乱,川芎嗪组瘀血较少,神经元形态结构较模型组改善;(3)普鲁士染色结果显示,假手术组铁沉积较少,模型组和川芎嗪组铁沉积较多;普鲁士染色阳性平均吸光度值模型组和川芎嗪组显著大于假手术组(P <0.01),川芎嗪组显著小于模型组(P <0.01);(4)铁含量检测结果显示,模型组和川芎嗪组显著多于假手术组(P <0.01),川芎嗪组显著少于模型组(P <0.01);(5)免疫组化染色结果显示,铁蛋白重链1和铁蛋白轻链阳性表达平均吸光度值模型组和川芎嗪组显著小于假手术组(P <0.01),川芎嗪组显著大于模型组(P <0.01);(6)Western blot检测结果显示,铁蛋白重链1蛋白和铁蛋白轻链蛋白的相对表达量模型组和川芎嗪组显著少于假手术组(P <0.01),川芎嗪组显著多于模型组(P <0.01);(7)结果说明,川芎嗪通过调控铁蛋白重链1和铁蛋白轻链的表达而调节脊髓损伤后铁代谢紊乱,从而发挥神经保护作用,促进脊髓损伤大鼠肢体运动功能恢复。

树状大分子包裹的纳米金颗粒载体人铁蛋白重链转染自然杀伤细胞92和磁共振成像

目的以聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体,将人铁蛋白重链(FTH1)转染到自然杀伤细胞92(NK92细胞)中,并进行体外细胞MRI检查。方法将第5代聚酰胺-胺树状大分子用聚乙二醇(PEG)修饰之后包裹纳米金颗粒作为非病毒载体,压缩FTH1报告基因然后转染到NK92细胞内。应用磁共振氢谱、紫外分光光度计和透射电子显微镜等对合成的载体材料进行表征;采用琼脂糖凝胶电泳实验确定载体材料与相应基因之间最佳压缩的氮磷比;应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测载体材料的毒性;通过测定水动力粒径来确定不同氮磷比的条件下载体材料和基因形成的复合物能否顺利通过细胞膜;应用荧光显微镜和流式细胞仪测定转染效率;应用3.0T的MRI对转染FTH1的NK92细胞进行体外成像。结果合成的聚乙二醇化的包裹纳米金颗粒的树状大分子{(Au^0)_(25)-G5.NH_2-mPEG_(17)}DENPs具有较好的生物相容性,材料细胞毒性较小,在浓度达到3 000nmol/L时细胞存活率仍然能达到60%以上。荧光显微镜和流式细胞仪测定显示,在氮磷比为1∶1、2∶1、5:1、10:1时,转染效率分别为57.8%、64.0%、80.2%、38.3%。在200和500μmol/L枸橼酸铁铵的条件下,MRI检查发现T2加权像(T2WI)的信号均降低,后者更为明显。结论聚乙二醇化树状大分子包裹的纳米金颗粒能够成功地转染目的基因,MRI检查能有效地在体外检测FTH1转染之后的NK92细胞,为MRI活体示踪自然杀伤细胞过继免疫肿瘤治疗奠定了基础。

黄精多糖对糖尿病肾病大鼠铁死亡的影响

目的观察黄精多糖对糖尿病肾病(DN)大鼠铁死亡的影响,研究其可能的作用机制。方法50只雄性SD大鼠随机选取10只作为正常组,另40只喂食高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立DN模型,将成模大鼠随机分为模型组、阳性药组(厄贝沙坦30 mg/kg)和黄精多糖低、高剂量组(200、800 mg/kg),每组10只,各给药组分别予相应药物灌胃,连续4周。检测大鼠肾功能指标[血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白],HE染色观察肾组织病理变化,ELISA检测肾组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和总铁离子含量,qPCR和Western blot检测肾组织转铁蛋白(Transferrin)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)mRNA和蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量、血糖明显升高,SCr、BUN及24 h尿蛋白含量明显升高,肾小管局灶变性,肾小球基底膜增厚、系膜增生,肾组织MDA和总铁离子含量明显增加,GSH含量明显减少,Transferrin、FTH1 mRNA和蛋白表达明显升高,GPX4 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,黄精多糖高剂量组小鼠SCr、BUN及24 h尿蛋白含量明显降低,肾组织病变明显减轻,MDA和总铁离子含量明显减少,GSH含量明显增加,Transferrin、FTH1 mRNA和蛋白表达明显降低,GPX4 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论黄精多糖对DN大鼠具有治疗作用,其机制与调节铁死亡相关因子Transferrin、FTH1、GPX4表达,调控铁死亡有关。

人重链铁蛋白偶联HER2抗体的纯化及其在成像中的初步应用

目的:利用临床常用抗体将人重链铁蛋白(HFn)纳米材料更好地靶向肿瘤,以期改善肿瘤的靶向成像或药物治疗,促进蛋白类纳米材料向临床转化。方法:在大肠杆菌内表达纯化得到HFn,以抗人表皮生长因子受体2抗体(anti-HER2)作为模型抗体,用双功能交联剂马来酰亚胺-聚乙二醇-琥珀酰亚胺琥珀酸酯(Mal-PEG-NHS)将HFn与anti-HER2偶联形成HFn/anti-HER2复合物;标记荧光后,观察其不同时间内在HER2阳性乳腺癌荷瘤小鼠内的分布,判断其作为靶向肿瘤药物的可能性。结果:通过尺寸排阻凝胶色谱纯化的靶向复合物HFn/anti-HER2保留典型的对称球状结构,粒径大小为16.88±0.49 nm,较HFn粒径7.11±0.1 nm增加;HFn/anti-HER2组在肿瘤部位的荧光强度是对照组HFn的3倍,说明可以通过偶联抗体提升HFn的靶向性。结论:构建了人重链铁蛋白与抗体的复合物,提升了铁蛋白的靶向性。抗体铁蛋白复合物为铁蛋白类靶向成像及治疗药物的开发提供了新的思路。

重链-铁蛋白:一个下调细胞增生的细胞因子

铁离子代谢与细胞增生有关,而铁蛋白与铁离子代谢密切相关。基因重组技术显示:重链(H)铁蛋白(酸性铁蛋白)和轻链(L)铁蛋白(碱性铁蛋白)由不同基因所编码。常规血清检测的铁蛋白是 L-铁蛋白,几乎不能检测到 H-铁蛋白;应用重组人(rhu)

铁自噬及相关基因NCOA4、FTH1在口腔鳞癌中的研究进展

铁自噬(ferritinophagy)是一种与铁死亡关系密切的自噬类型,由核受体共激活因子4(nuclear receptor coativator4,NCOA4)介导铁蛋白在自噬溶酶体中降解,然后使铁蛋白结合的铁降解释放出游离铁,是铁代谢的重要途径。近年来,越来越多的研究表明,铁自噬和铁死亡在肿瘤发生发展中起着重要作用。但目前铁自噬在口腔鳞癌中的作用机制尚未完全阐明,对口腔鳞癌中铁自噬机制的深入研究,有望帮助寻找此类疾病治疗的新靶点。本文对铁自噬在口腔鳞癌中作用研究的最新进展作一综述。

内蒙古产硅砂除铁可选性研究

分析了内蒙古部分地区硅砂中铁的赋存状态：介绍了相应的除铁方法和设备；提出了较适用的除铁工艺流程；并分析了一些典型矿区可能达到的除铁效果。

浅谈提高重的油缸表面粗糙度的途径

针对重铁油缸的中工特点，及易于产生划伤，波纹使缸径粗糙度达不到要求的质问问题，合理的安排加工工艺，设计制造了新的液压头，改进了刀具，选择最佳切削用量解决缸径拉镗过程中的断屑排屑问题，提高了缸径的表面粗糙度达到了图纸的要求。

铁蛋白纳米粒子的修饰及细胞内化特性的研究

通过基因工程的方法将人表皮生长因子(EGF)和TAT分别修饰于FTH1亚基的N端,采用原核表达系统可获得EGFR靶向修饰的铁蛋白重链亚基蛋白(EGF∷FTH1)和修饰有穿膜肽的铁蛋白重链亚基蛋白(TAT∷FTH1)。随后,将变性的EGF∷FTH1与TAT∷FTH1以一定比例混合进行复性得到TAT/EGF-FTH1双功能化的纳米粒子。荧光显微镜的结果表明,TAT的修饰能有效增强纳米粒子的内化效果。