紫色野生樱桃李提取物抗氧化和降血糖活性研究及化学成分鉴定

野生樱桃李富含多酚类化合物,具有“雪域珍果”之称,但其抗糖尿病活性和主要成分不明。该文以紫色野生樱桃李(purple Prunus cerasifera Ehrh.,PPE)为研究对象,采用体积分数70%乙醇提取和溶剂萃取法提取和富集多酚类化合物,通过自由基清除能力、酶抑制能力、促进人肝癌细胞(HepG2细胞)葡萄糖消耗及抗糖基化能力实验评价醇提物和萃取组分的抗氧化和降血糖活性,通过液质联用技术鉴定主要化学组成。结果表明,PPE的乙酸乙酯相(ethyl acetate fraction,EAF)具有最高的总酚(219.27 mg GAE/g E)和总黄酮含量(165.58 mg QuE/g E),以及最强的ABTS阳离子自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶抑制能力、抗糖基化能力和HepG2胰岛素抵抗细胞模型细胞葡萄糖消耗能力,其中α-葡萄糖苷酶抑制能力为对照品阿卡波糖的31倍。PPE的正丁醇相具有最高的DPPH自由基清除能力和二肽基肽酶-4抑制活性。采用高效液相色谱飞行时间质谱联用(HPLC-quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry,HPLC-QTOF-MS/MS)技术从EAF组分中鉴定出43个化合物,包括12个有机酸、9个酚酸、16个黄酮类化合物和6个其他化合物。因此,乙酸乙酯和正丁醇是萃取富集野生樱桃李中活性成分的适宜溶剂,酚酸和黄酮类化合物是PPE中的主要抗氧化和降血糖成分,研究结果可为PPE在降血糖营养食品或膳食补充剂方面的应用提供理论指导。

影响野生樱桃李种子萌发相关因素研究初报

试验以野生樱桃李种子为材料,通过用机械去壳、去种皮、低温及赤霉素对野生樱桃李种子进行不同处理,研究了不同处理对野生樱桃李休眠及萌发的影响。结果表明:野生樱桃李种子经过100d左右的低温层积,其萌发率可达到72%,随着野生樱桃李低温层积时间的延长,其种子萌发率逐渐提高;野生樱桃李的种壳和种皮不同程度抑制种子萌发,去除种壳可使萌发日提前,同时去除种壳和种皮,可立即解除种子休眠,使种子萌发率达到78%;GA3对带壳种子的萌发有一定作用,但解除休眠、促进萌发的效果并不明显。

新疆野生樱桃李果实部分表型性状的遗传多样性分析

以中国新疆伊犁地区霍城县大西沟乡的新疆野生樱桃李(Prunus cerasifera Ehrh.)47个实生株系的成熟果实为试材,从果实形态性状、可溶性固形物和矿质元素含量以及挥发性化合物组分等不同层面对野生樱桃李遗传多样性进行了研究,旨在为新疆野生樱桃李的资源保护、合理利用和遗传改良提供基本资料。结果表明:①新疆野生樱桃李实生株系的果实形状主要为圆形,少数为椭圆形、卵圆形、卵形和宽卵形,果实颜色有黄色、红色、紫红色和黑色等4种类型,野生樱桃李果实纵径、横径、单果质量、果形指数以及可溶性固形物含量均存在一定程度的变异,遗传多样性较为丰富,其中以单果质量的变异系数最大(9.13%);②新疆野生樱桃李实生株系果肉组织的Zn、Ca、Mg、Mn、Fe及Cu等6种矿质元素含量变异丰富,其中以Fe元素的含量(平均值为21.2mg·kg-1)和变异系数(26.99%)最高,进一步筛选高铁性状单株的潜力很大;③从新疆野生樱桃李12个实生株系中共鉴定出醇类、醛类、酯类、酮类、烃类及杂环类等6类83种挥发性化合物,各实生株系挥发性化合物总含量、挥发性化合物种类及其含量以及主要挥发性化合物分离比率与含量等存在广泛的遗传变异,遗传多样性较为丰富,其中以甲酸己酯含量最高(平均值为4.33μg.g-1),是野生樱桃李果实香气形成的重要特征性化合物。

新疆野生樱桃李(Prunus cerasifera)茎段与叶片培养及其植株再生

以新疆野生樱桃李为材料,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类、浓度及配比、蔗糖浓度等多种因素对茎段腋芽萌发与生长、增殖以及叶片不定芽再生的影响,建立了其叶片再生体系。结果表明,1)植物生长调节剂组合IAA0.4mg/L+6-BA0.8mg/L较适合于樱桃李茎段腋芽的萌发与生长培养;2)正交试验筛选出不定芽的最佳增殖培养基为3/4MS+IAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L;3)ZT诱导不定芽再生的效果好于6-BA,ZT1.5mg/L+IBA0.05mg/L为诱导不定芽再生的最适植物生长调节剂组合;4)暗培养为叶片不定芽再生的必要条件,在最适不定芽再生的培养基上,暗培养14d的不定芽再生效果最好;5)樱桃李不定梢的最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.4mg/L。

野生樱桃李(Prunus cerasifera)果实多酚多样性分析

【目的】分析野生樱桃李资源果实多酚的多样性,以便为其利用和新品种培育提供基本材料。【方法】对收集、保存于辽宁兴城的野生樱桃李(Prunus cerasifera)103份高接株系中筛选出的13份优异资源和‘晚熟红李’(Prunus salicina)成熟果实酚类物质进行分析。【结果】13份野生樱桃李资源多酚质量分数变异幅度为2 597.63~5 802.33 mg·kg^(-1),变异系数为19.51%;绿原酸、原花青素B_1、儿茶素、原花青素B_2、表儿茶素、原花青素C、芦丁、槲皮素-半乳糖、槲皮素-葡萄糖、槲皮素-木糖醇、槲皮素-吡喃阿拉伯糖等组分含量变异系数为30.56%~108.01%,体现出野生樱桃李丰富的多酚含量多样性;野生樱桃李资源与‘晚熟红李’主要多酚组分不同,存在丰富的多酚组成多样性。【结论】13份野生樱桃李资源在多酚组成和含量上存在丰富的多样性。野生樱桃李5、野生樱桃李7、野生樱桃9、野生樱桃李10、野生樱桃12等5个株系是原花青素B_1、儿茶素、绿原酸、原花青素B_2、表儿茶素和原花青素C的良好来源,进一步挖掘利用的潜力很大。

野生樱桃李花粉活力与授粉结实特性初报

试验对新疆野生樱桃李花粉活力进行了测定并开展了不同树体间授粉结实研究。结果表明，不同蔗糖浓度、硼酸对野生樱桃李花粉萌发影响较大，培养基中加入15％蔗糖浓度，0．01％的硼酸比较适合野生樱桃李花粉萌发；野生樱桃李花粉在采集后几天内均有较高的生活力，室温下，野生樱桃李花粉生命力一般保持25-30d，4℃低温可有效延长花粉生活力时间，低温下可保持105-120d；部分野生樱桃李具有较高的自花结实率，部分不同树体间可相互作为授粉树。

低温胁迫对新疆野生樱桃李电解质渗出率和丙二醛含量的影响

通过使用外渗电导法结合植物体内丙二醛含量的变化,在-20℃至-40℃,设置5种温度梯度处理,以外界温度为对照,对新疆野生樱桃李不同生境,不同类型的20棵定点树和栽培李品种的一年生休眠枝的抗寒性进行了测定比较,研究结果表明大部分新疆野生樱桃李可以抵抗-25℃低温,少数可以抵抗-30℃的低温,抗寒顺序依次是:北方1号>绥李3号>牛心李>新疆野生樱桃李;而在野生樱桃李中,生境不同,基因型不同其抗寒力也有差异。

野生樱桃李叶总黄酮含量测定方法比较研究

采用高效液相色谱法、NaNO_2-Al(NO_3)_3法、AlCl_3法测定野生樱桃李叶总黄酮含量。结果表明,高效液相色谱法测定总黄酮含量为(36.53±0.46)mg/g,Al Cl_3法测定总黄酮含量为(38.27±0.59)mg/g,两种方法测定结果差异不显著;而NaNO_2-Al(NO_3)_3法测定总黄酮含量为(49.81±0.70)mg/g,与其它两种方法测定结果差异较大。通过显色机理分析知AlCl_3法可消除干扰,重现性好,准确度高,操作相对高效液相色谱法更快捷简便,确定AlCl_3法为测定野生樱桃李叶总黄酮含量的最佳方法。

新疆野生樱桃李营养成分测定

【目的】对采自两个不同区域的72种野生樱桃李进行营养成分的分析,为进一步开发野生樱桃李的食用价值提供理论依据。【方法】以采自新疆伊犁霍城大西沟的野生樱桃李及栽培于乌鲁木齐安宁渠的樱桃李为原料,采用直接滴定,2,4-二硝基苯肼法及液相色谱法对72个不同类型的新疆野生樱桃李中还原性糖、总糖及总酸;18个类型樱桃李中VC5、种樱桃李中总氨基酸含量进行测定。【结果】72个不同类型的新疆野生樱桃李中含有较为丰富的还原性糖、总糖及总酸,其最高含量分别为11.14、18.29及4.15 g/100 g;18种樱桃李中VC含量最高可达10 mg/100 g;5种樱桃李中总氨基酸含量超过2%。【结论】采自于两个不同区域的野生樱桃李中营养成分含量有较大差异。

新疆野生樱桃李的生态—生物学研究Ⅰ.生态因子与植物学、物候学特性分析

对生长在新疆霍城县大、小西沟野生樱桃李群落，从分布区的自然地理条件、生境的土壤剖面记录及理化性质、植被、气象因子等方面进行了观测与统计，并结合其植物学、物候学特性等较详细的观察记载。分析了大、小西沟18年前后的气候状况与野生樱桃李的物候学特征的关系；并阐述了野生樱桃李在大、小西沟内的分布特征、繁衍和更新特点及其与生态条件的关系。与10多年前相比，发现野果林分布下限上移、野樱桃李面积缩小、开花提前了8～15d、分布区植被破坏严重。从诸多方面证明了野生樱桃李这个野生果树资源的濒危程度。并讨论了大、小西沟野果林生态系统受损现状和野生樱桃李濒危的原因。提出建立自然保护区就地保护这个珍贵物种的建议。

新疆野生樱桃李的生态—生物学研究 Ⅱ.新疆野生樱桃李的新类型及其特点

1986年起对伊犁霍城县大、小西沟野果林野生樱桃李资源中有代表性类型的植株作了植物学特征、生物学特性、分布、生境等定点观测,并将其分为21个类型。20年后重返霍城县大、小西沟野果林,有幸能找到大部分定点树,在原有基础上,又重新调查,增加了新的定点树,发现了19个新类型,用全球定位仪对每棵树定了位,重新分类、收集和保存,类型总共增加至40个。仅就野生樱桃李重新调查的结果分类介绍,并对收集和保存新类型的特点及其应用前景进行分析。

野生樱桃李天然群体果实形态多样性分析

对8个天然群体的野生樱桃李的14个果实表型性状指标进行了多样性分析。结果表明：野生樱桃李的果实性状存在极丰富变异，天然群体间变异系数平均值为4．3％～38．9％，天然群体内为5．6％～20．3％．通过欧氏距离进行的（UPGMA）聚类分析将8个天然群体划分为4组。主成分分析和方差分析结果显示：果实单果重、果实可溶性固形物含量和果实颜色是造成野生樱桃李天然群体间表型差异的主要因素。

野生樱桃李的形态多样性调查研究

以新疆霍城县大西沟自然状态下的野生樱桃李为研究对象,调查了30余种野生樱桃李的不同种下类型,测定了在原生状态下枝叶形态、花器官形态和果实形态特征差异。结果表明:野生樱桃李的种下类型具有十分丰富的变异类型,从枝叶到花果均有很大的变异,尤其是果实性状类型丰富,其中许多类型的经济性状优良,为优系的选择提供广阔的空间,可根据经济利用目的选择相应的类型。由于实生繁殖必然会产生各种变异类型,在人工栽培时必须选优良类型进行嫁接等无性繁殖方法。

野生樱桃李枝条抗寒性鉴定

以一年生休眠枝条为试验材料,利用电导法对7种不同类型的野生樱桃李休眠枝条在不同低温处理下的电解质渗出率进行了测定,并配合Logistic方程确定野生樱桃李枝条的低温半致死温度。结果表明:随着处理温度的下降,野生樱桃李枝条组织的电解质渗出率变化幅度呈现慢-快-慢的趋势,即"S"形曲线增长;野生樱桃李的半致死温度(LT50)在-25.33^-30.25℃;不同类型间的抗寒性不同,主要集中在-28℃左右;而对照中国李寺田实生的LT50在-35℃左右,比野生樱桃李抗寒性强。

伊犁大、小西沟野生樱桃李分布区的土壤条件

野生樱桃李在我国仅见于伊犁霍城县的大、小西沟。野果林下的土壤过去被定名为野果林土。通过对野生樱桃李主要分布区的土壤调查,发现属于山地黑钙土(按中国土壤系统分类为均腐土)和冲积土(冲积新成土)。由土壤发育滞后形成的土壤植被不对应是区域干旱化的证明。地表生草过程强烈对以种子繁殖为主完成世代更新的野生樱桃李十分不利。

新疆野生樱桃李枝、叶不同萃取部位抗氧化活性研究

采用系统溶剂萃取野生樱桃李枝、叶甲醇提取物,分别得到其石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相,采用分光光度法测定其总酚含量,并通过清除DPPH自由基能力、还原能力、总抗氧化能力等化学模型对各部位的抗氧化活性进行测定。结果表明,野生樱桃李枝、叶提取物抗氧化活性与其总酚含量呈正相关性,提示酚类化合物为影响其抗氧化活性的主要因素。在三种抗氧化模型下,枝、叶各萃取相均表现一定的抗氧化活性,且具有相似的抗氧化活性规律:乙酸乙酯相>正丁醇相>石油醚相,说明乙酸乙酯和正丁醇可以有效地富集野生樱桃李枝、叶抗氧化成分,其中树枝乙酸乙酯相抗氧化活性著高于BHA。说明野生樱桃李枝、叶提取物具有作为天然抗氧化剂的开发价值。

响应面优化野生樱桃李叶总黄酮的超声辅助提取工艺

以具有地域特色的野生樱桃李叶为实验材料,在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、提取温度、料液比为自变量,总黄酮提取量为响应值,利用响应面法优化野生樱桃李叶总黄酮的超声辅助提取最佳条件为乙醇体积分数51%、提取温度72℃、料液比1∶45 g/m L,在300 W功率下超声提取30 min,提取次数2次,总黄酮提取量为38.27 mg/g,达到预测值的98.3%。超声辅助提取较传统索氏提取操作简单,耗时少,提取效率高,是野生樱桃李叶总黄酮提取的一种有效方法。

新疆濒危野生樱桃李幼苗的自然分布特征

[目的]研究樱桃李（Prunus divaricata）在不同生境中的幼苗组成与更新特征,从而为种群的恢复与保育提供理论依据和研究基础.[方法]以新疆霍城县大西沟山前逆温带内分布的天然野生樱桃李林为研究对象,采用样线法对野生樱桃李的天然更新特点及其影响因素进行了野外调查和分析.[结果]不同生境中野生樱桃李的幼苗均由实生苗和萌蘖苗组成;随着幼苗年龄的增长,四个生境中实生幼苗的密度越来越低,且不同龄级间存在显著性差异,且实生苗的最高年龄结构为5 a.高度小于1.0m的根萌苗的密度除樱桃李＋核桃＋准噶尔山楂群落中最低外,在其他群落生境类型中都比较高.在同一群落生境类型中,根萌苗的密度在不同高度级间均存在显著性差异（P＜0.05）.各生境中野生樱桃李不同龄级实生苗幼苗间的转化率差异除野生樱桃李单优群落生境中存在显著差异外,其他生境中不同龄级间实生幼苗的转化率均无显著性差异.根萌苗在不同龄级间差异不显著,且各龄级间的转化率在不同生境间也无显著性差异.野生樱桃李的根萌苗主要分散在以母树为中心的0.20～1.60 m,占总无性系分株的92.0％.[结论]现阶段野生樱桃李通过种子萌发实现种群的更新具有较大的风险,而萌生苗比实生苗的作用更大.研究为伊犁野果林典型生态系统的恢复与保育技术提供理论基础.

秋季自然降温对野生樱桃李叶片渗透调节物质的影响

【目的】了解秋季自然降温对野生樱桃李叶片渗透调节物质的影响。【方法】在秋季自然环境降温期间,以5种不同类型的野生樱桃李和中国李寺田实生的叶片为试验材料,对叶片内电解质渗出率、可溶性蛋白、可溶性糖及游离脯氨酸含量的变化规律进行测定。【结果】通过相关性和方差分析,秋季自然环境降温期间,对照中国李寺田实生抗寒能力比野生樱桃李强;通过主成分分析,对于野生樱桃李来说,认为在秋季自然环境降温期间,叶片的游离脯氨酸含量的变化与抗寒性的关系相对较密切,其次是可溶性蛋白,而可溶性糖含量的变化与抗寒性的关系不明显。【结论】野生樱桃李的抗寒性与脯氨酸和可溶性蛋白的含量有关。

土壤干旱胁迫对野生樱桃李叶片渗透调节物质的影响

以栽培李品种寺田实生和3个不同单株的野生樱桃李(1,2,3)植株为材料,通过田间土壤自然干旱试验,研究了干旱胁迫对4个不同单株叶片渗透调节物质的影响,并探讨了这些生理指标与其抗旱性的关系。结果表明:随着干旱胁迫的加剧,寺田实生和3个不同单株野生樱桃李叶片的脯氨酸含量、可溶性糖含量和质膜相对透性都在增加,可溶性蛋白含量不断减少;但野生樱桃李不同单株间变化幅度存在差异,其中野生樱桃李2在干旱胁迫第17天,脯氨酸和可溶性糖含量最高,蛋白质和质膜相对透性最稳定,抗旱性最强,而野生樱桃李1和3次之,野生樱桃李的抗旱性依次为野生樱桃李2>野生樱桃李1>野生樱桃李3。栽培李寺田实生抗旱性较野生樱桃李弱。