云南野生苜蓿与引进苜蓿的核型分析

以云南野生种紫花苜蓿(德钦地区紫花苜蓿)、逸散种紫花苜蓿(AC-3)和8个国外引进栽培种紫花苜蓿为材料,采用核型分析方法对供试材料的染色体组进行了分类和比较。结果表明,所有材料的染色体数目相同,均为2n=4x=32,各同源染色体组都为中短染色体组或短染色体组。核型结构存在微小差异,爱博出现超大染色体,牧歌701、牧歌702和GT13R带有随体,引进品种除射手外,进化程度高于德钦地区紫花苜蓿。

原子吸收光谱法测定新乡野生苜蓿中微量元素的含量

采用原子吸收光谱法测定新乡野生苜蓿的Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Mn6种元素的含量。该方法的加标回收率为95%—105%,RSD值小于5%,具有良好的准确度和精密度。研究结果表明:新乡野生苜蓿中Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Mn含量丰富。

内蒙古野生苜蓿种质资源及其开发利用前景

苜蓿属(MedicageL.)植物全世界有65种,分布很广,野生和栽培种均有。开发利用当地野生苜蓿种质资源,对解决当前半干旱和干旱地区可种植推广的牧草品种单调、缺乏主要草种问题至关重要。内蒙古地区野生苜蓿有黄花苜蓿、阿拉善苜蓿、天蓝苜蓿。野生苜蓿的开发利用对内蒙古地区的畜牧业生产有着重要的意义。

德钦地区野生紫花苜蓿群落多样性特征及其来源分析

德钦地区野生紫花苜蓿（MedicagosativaL．）发现于云南省迪庆藏族自治州德钦县，主要分布于澜沧江、金沙江流域海拔2000~3000m的干热河谷和森林边缘，是白刺花（SophoraviciifoliaHance）灌丛的草本成分之一，并在农区大量生长，调查表明，野生紫花苜蓿的生长和分布明显受降水量的影响；在干热河谷地区正常生长，但不能离水源太远；在自然群落中的竞争力较弱，当群落另有优势种时其物候期明显推迟；其根系发达，具有很强的水土保持能力；在水分及管理较好的条件下分枝可达800／m^2以上；在自然状态下产草量达5kg／m^2以上；染色体为2n=32，系四倍体。考证分析结果初步认为：德钦地区野生紫花苜蓿来源由我国青海和甘肃传人西藏，然后在横断山脉南部峡谷地区生存下来，并沿河流方向逐渐向下游传播；在德钦地区的扩展可能与藏传佛教的传播活动有关。德钦地区野生紫花苜蓿是云南发现的唯一成群落分布的苜蓿资源，其多样的形态和地理分布特征，孕育着丰富的遗传基础，特别是在于热地区生存可能孕育特异性种质。

野生黄花苜蓿叶肉原生质体培养和植株再生

取野生黄花苜蓿15～20天叶龄的叶片，去掉下表皮，用1％纤维素酶、1％半纤维素酶和0．5％果胶酶的混合液游离原生质体。用改良的MS培养基附加2，4－D、BA和NAA等，在黑暗条件下浅层悬浮培养。培养第4天、第7天和第10天，原生质体分别出现第一次、第二次和多次分裂，在此期间数次加液或换液调节渗透压，直至形成1mm左右的大细胞团，然后转移到附加2，4-D和KT等的MS固体培养基，诱导形成愈伤组织，再经4～5次继代培养，分化成为完整的再生植株。

陇东野生紫花苜蓿的生态特征

陇东野生紫花苜蓿Medicago sativa为根茎—平卧型多年生苜蓿,分布于甘肃清水、定西半阴湿山脚地带,经植物学、生物学特征特性观察,结果表明:陇东野生紫花苜蓿与栽培紫花苜蓿相比,其生长速度慢,叶片小且数量少,根系为根茎型,无主根,茎纤细且平卧或半平卧生长,分枝能力强,耐践踏,抗寒、抗旱,有许多栽培苜蓿所没有的植物学和生物学特征特性。

陇东野生紫花苜蓿的遗传特异性分析

为初步判定陇东野生紫花苜蓿(NativeMedicago sativa L. cv. Longdong)的遗传特异性,及与其他苜蓿材料的亲缘关系,借助垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对包括该材料在内的41个紫花苜蓿材料进行POD同工酶酶谱特征分析。结果表明:供试材料共出现22条酶带,最多9条,最少5条;陇东野生紫花苜蓿出现6条酶带,其特征谱带为Rf0.26;将0,1二态性矩阵转化为遗传距离矩阵进行聚类,陇东野生紫花苜蓿单独聚为一类。聚类分析的结果表明,陇东野生紫花苜蓿与其他40个材料存在较大的遗传差异,为其在形态学上与其他苜蓿的差异提供了有利支持。

陇东野生紫花苜蓿的同工酶分析

利用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳技术对陇东野生紫花苜蓿及其他37个紫花苜蓿品种的过氧化物酶、过氧化氢酶和酯酶进行了分析。通过对供试材料间相似系数的计算、聚类分析和主成分分析，初步探讨了38个紫花苜蓿材料间的亲缘关系。结果表明，供试材料共表现出了24条酶带，其中有5条是陇东野生紫花苜蓿的特征酶带。38个紫花苜蓿材料的相似系数介于0．583～1．000，陇东野生紫花苜蓿与其他37个供试材料间的相似系数介于0．583～0．833，远远低于其他供试品种间的相似系数（0．625～1．000），聚类分析表明，供试材料在相似系数为0．702处可聚为2类，其中陇东野生紫花苜蓿单独聚为一类，其结果与主成分分析一致，由此可确定陇东野生紫花苜蓿与其他供试材料间的亲缘关系较远，为一相对独立的紫花苜蓿种质资源，以期通过育种途径扩大品种的遗传基础。

陇东野生紫花苜蓿愈伤组织原生质体游离条件的筛选

以陇东野生紫花苜蓿子叶诱导的愈伤组织为材料,研究了酶解时间、酶液组合、酶液中甘露醇浓度、预处理措施及愈伤组织继代培养时间对其原生质体游离效果的影响。结果表明：当酶解时间为10h、酶液组合为2%纤维素酶＋0.5%果胶酶＋0.3%离析酶＋0.3%半纤维素酶＋0.3%崩溃酶、甘露醇浓度为0.60mol/L、预处理措施为CPW-10溶液中浸泡1h、愈伤继代培养天数为12~14d时,游离出的原生质体产量最高,可达19.5×105个/g,存活率高达89.7%。

天蓝苜蓿野生种质的品质分析研究

以采集于甘肃、四川等我国西部地区的野生天蓝苜蓿Medicago lupulina生态型为试验材料，以《中国苜蓿》中的20种多年生苜蓿品种和蜗牛苜蓿M．scutellata、蒺藜苜蓿M．truncatula2种一年生苜蓿作参照，对其始花期的营养成分进行测定和比较。结果表明：13个天蓝苜蓿野生生态型的粗蛋白含量为24．26％～29．36％，粗脂肪为2．68％～4．36％，粗纤维为17．05％～22．61％，无氮浸出物为33．79％～40．25％，天蓝苜蓿各个生态型的各种营养指标均优于多年生苜蓿；3种一年生苜蓿中，蜗牛苜蓿的粗蛋白、粗脂肪以及无氮浸出物均为最低，品质较差。蒺藜苜蓿粗蛋白、粗脂肪、粗纤维含量高，无氮浸出物低，天蓝苜蓿虽然粗蛋白、粗脂肪略低于蒺黎苜蓿。但粗纤维都低，苹质柔软，适口性好．属优质饲草。

陇东野生紫花苜蓿过氧化物酶同工酶分析

利用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳技术对陇东野生紫花苜蓿（Medicago sativaL.cv.Longdong）及其他38个紫花苜蓿品种的过氧化物酶（POD）同工酶酶谱特征进行分析,通过对供试材料间欧氏距离的计算和聚类分析,初步探讨了39个紫花苜蓿材料间的亲缘关系。结果表明：供试材料共表现出11条酶带,且都具有4条主酶带,其中陇东野生紫花苜蓿表现出7条酶带;用组间均连法进行聚类分析,39个供试材料可聚为6类,其中陇东野生紫花苜蓿单独为一类,且与其他38个供试材料间的欧氏距离介于0.748～1.622,平均值（1.088）远远高于其他供试材料间的平均欧氏距离（0.533～1.029）,表明它们之间的遗传距离相对较大。由此可确定陇东野生紫花苜蓿与其他供试材料间的亲缘关系较远,为一相对独立的紫花苜蓿种质资源,可通过育种途径扩大栽培品种的遗传基础。

陇东野生紫花苜蓿硬实种子处理方法研究

以陇东野生紫花苜蓿种子为材料,采用机械法、98%浓硫酸处理法和不同浓度NAA引发处理法研究打破陇东野生紫花苜蓿种子硬实的效果。结果表明:用标准发芽法测定的发芽率仅为37%,各处理对破除种子硬实、提高发芽率的效果差异显著(P<0.05),其中划破种皮处理效果最佳,发芽率达到92%,其次是98%浓硫酸浸种30 min,发芽率达77%,NAA浓度为1.0 mg/L引发处理发芽率为63%,砂纸磨擦的发芽率为61%。

氯化钠对野生天蓝苜蓿种子萌发的影响

为探究野生天蓝苜蓿的耐盐特性,本试验选取西藏野生天蓝苜蓿为供试材料,用氯化钠溶液进行胁迫处理,共设0(CK)、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25 mol/L六个浓度处理。结果表明:在氯化钠浓度为0.20 mol/L时,种子只有胚根长出,而胚芽无法生长,说明当氯化钠溶液为0.20 mol/L时,野生天蓝苜蓿已经无法正常生长;当浓度为0.25 mol/L时,完全抑制种子萌发。当浓度低于0.20mol/L时,随着氯化钠溶液浓度增大对种子抑制作用越强。

紫花苜蓿杂交一代品系在云南的适应性分析

2002年以云南德钦地区的野生紫花苜蓿的优良无性系、云南昆明地区的逸散种紫花苜蓿优良无性系和引进紫花苜蓿品种(牧歌701、Acrora、GT13R)的优良无性系进行杂交。2006年,2007年对在云南省偏酸性土壤种植的8个杂交种进行了品比试验,对生育期、茎叶比、产草量、越冬性等指标的测定表明,杂交种138、152、196表现优异,可作为优良的候选杂交种。

6个紫花苜蓿材料的核型及其亲缘关系分析

运用染色体压片法对陇东野生紫花苜蓿(Medicago sativaL.)等6个紫花苜蓿材料进行核型分析,并通过核型似近系数对供试材料进行聚类分析。结果显示:(1)全部供试材料皆为2n=32的四倍体,核型进化由高到低依次为:[陇东野生紫花苜蓿、新疆大叶紫花苜蓿(M.sativa,Xinjiangdaye)]2B>[皇后2000紫花苜蓿(M.sativa,Regina 2000)、陇东紫花苜蓿(M.sativa,Longdong)、Pick 8925紫花苜蓿(M.sativa,Pick 8925)]1B>[肇东紫花苜蓿(M.sativa,Zhaodong)]1A。(2)供试材料间的核型似近系数(λ)均在0.900 0以上,并在进化距离(De)0.073 8处分为两类,陇东野生紫花苜蓿和新疆大叶紫花苜蓿归为一类,其它供试材料归为另一类。研究表明,陇东野生紫花苜蓿的染色体较不对称,与其它供试材料相比,亲缘关系远,系统演化快。

紫花苜蓿杂交种适应性分析

2002年对云南德钦地区的野生紫花苜蓿的优良无性系、云南昆明地区的逸散种紫花苜蓿优良无性系和引进紫花苜蓿品种(牧歌701、Acrora、GT13R)的优良无性系进行了杂交。2006～2007年在云南省偏酸性土壤中对8个杂交种进行了品比试验,对生育期、茎叶比、产草量、越冬性等指标的测定表明,杂交种13、138、196表现优异,可作为优良候选杂交种,也为继续选育新品种提供了宝贵的种质资源。

苜蓿的飞翔梦

紫花苜蓿创造螺旋线,遗憾失败 城市里,草坪边、墙角、水泥路旁,到处都能见到野生苜蓿的身影.大诗人李商隐有 "苜蓿榴花遍近郊"的诗句,可见唐朝那会儿,苜蓿的领地已经扩展到京城边了. 但一直以来,苜蓿却活在黎民百姓的视线之外.因为它们太不起眼了,没有高大的身躯,没有娇媚的花朵,没有芳香的韵味,就那么安安静静地守在属于自己的一隅,恬淡甚至是寂寞地活着.

陇东地区野生紫花苜蓿植株再生体系的建立

以陇东地区野生紫花苜蓿无菌苗的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,MS为基本培养基,研究划破种皮以及不同生长调节物质种类与配比对愈伤组织诱导和分化影响的结果表明:划破种皮可提高种子发芽率;在外植体中下胚轴的愈伤组织诱导率最高,达92.2%;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D2.0mg·L-1(单位下同)+NAA1.0+2.5%蔗糖+0.6%琼脂,最佳分化诱导培养基为MS+KT0.5+NAA0.3+2.5%蔗糖+0.6%琼脂,成苗培养基为1/2MS+NAA0.1+1%蔗糖+0.6%琼脂。

Sinorhizobium meliloti nifA mutant induces different gene expression profile from wild type in Alfalfa nodules

Several studies have demonstrated that the Rhizobium nifA gene is an activator of nitrogen fixation acting in nodule bacteria. To understand the effects of the Sinorhizobium meliloti nifA gene on Alfalfa, the cDNA-AFLP technique was employed to study the changes in gene expression in nifA mutant nodules. Among the approximately 3,000 transcriptderived fragments, 37 had differential expression levels. These expression levels were subsequently confirmed by reverse Northern blot and RT-polymerase chain reaction. Sequence analyses revealed that 21 cDNA fragments corresponded to genes involved in signal communication, protein degradation, nutrient metabolism, cell growth and development.