用野百合碱诱导的肺动脉高压雄性大鼠的右心室结构与功能变化

目的观测用野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)雄性大鼠的右心室(right ventricle,RV)结构与功能变化情况,以进一步验证其诱发肺动脉高压的机制。方法将SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组,每组12只。模型组大鼠接受单次40 mg·kg-1的MCT皮下注射。注射MCT第0周、2周、3周、4周末时检测超声心动图,评价右心室功能和右心室-肺动脉(RV-PA)耦合情况。注射MCT第4周时采用右心导管术检测大鼠平均肺动脉压(mPAP),取脏器并称重,计算脏器系数及右心室肥厚指数(RVHI);采用HE染色法观察肺小动脉病理形态学变化,计算管腔面积占血管总面积的百分比(WA%)、管壁厚度占血管外半径的百分比(WT%);采用HE、Masson染色法观察右心室心肌细胞的肥大程度和纤维化程度。结果与0周相比,2周时,模型组大鼠右心室游离壁厚度(RVFW)增加、平均肺动脉压(mPAP)升高(P<0.05),三尖瓣环平面收缩期位移(TAPSE),肺动脉加速时间(PA-AT)和右心室流出道速度时间积分(RVOT-VTI)及PAT/PET、TAPSE/mPAP降低(P<0.05);3周时,右心室内径(RVID)增加、TAPSE/PAT升高(P<0.05)。与对照组比,模型组大鼠mPAP、RVHI升高(P<0.05)。模型组大鼠肺小动脉管壁增厚,中膜平滑肌细胞增生,管腔狭窄,WA%、WT%升高(P<0.05);RV心肌细胞肥大,心肌纤维化(P<0.05)。模型组大鼠心、肺增大(P<0.05)。结论用MCT诱导的PAH雄性大鼠的右心室结构与功能均发生变化,导致肺动脉高压。

分子印迹聚合物对血液中野百合碱-血红蛋白加合物的分析

目的基于分子印迹技术,建立快速检测体内野百合碱和血红蛋白加合物的方法。方法以制备的野百合碱血红蛋白加合物为模板分子,经表面印迹聚合法制备野百合碱-血红蛋白分子印迹聚合物,用作固相萃取介质识别造模大鼠血液中的血红蛋白加合物。结果理化性质表征结果显示聚合层成功接枝在碳纳米管表面,且聚合物具备良好的热稳定性;将聚合物作为固相萃取介质,对造模大鼠血液进行分析,结果显示聚合物血红蛋白加合物具有较强的吸附能力(吸附量达90.86 mg/mg),该结果与肝脏病理检测结果呈正相关性。结论所制备的聚合物可以快速分析体内血红蛋白加合物的含量,与肝脏病理结果相结合,为肝小静脉闭塞症的无创伤诊断提供新的研究思路。

兰州百合和野百合组织培养及快速繁殖研究

以兰州百合 (LiliumdavidiiVar.Unicolor (Hoog)Cotton)和野百合 (LiliumbrowniiF .E .BrownexMiellez)鳞茎及叶片为外植体获得再生植株 ,并建立起快速无性繁殖系 .兰州百合鳞茎的最佳诱导培养基为MS +0 6～ 1 0mg/LBA +0 2mg/LNAA ;芽增殖培养基选MS +0 5～ 0 6mg/LBA +0 1mg/LNAA ;生根培养基为 12 MS +0 2mg/LIAA +0 1%活性炭 .野百合鳞茎及叶的最佳诱导培养基分别为MS +0 1～ 0 5mg/LBA +0 1～ 0 2mg/LNAA或 0 5mg/LIAA和MS +0 7mg/LBA +0 0 7mg/LNAA ;鳞茎诱导的芽的增殖培养基为MS +0 2～ 0 4mg/LBA +0 1mg/LNAA ;生根培养基为 12 MS +0 15mg/LNAA +0

秦岭野百合鳞片植株再生体系的建立

以鳞片为外植体,建立了秦岭野百合(LiliumbrowniiF.E.Brown)植株再生体系。结果表明愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,最适继代培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,幼苗根诱导的最适培养基为1/2MS+IBA0.3mg·L-1。随着培养时间的延长,生根率会不断提高,培养到30d,生根率可达100%。

广东野百合DNA提取和RAPD条件的优化

以野百合(Lilium brownii)新鲜叶片、硅胶干燥叶片及鳞片为材料,研究了DNA的提取方法,并对影响随机扩增多态DNA(RAPD)反应的各因素进行了优化。建立了野百合RAPD的优化反应体系及程序,即在20μl反应体系中,含20 ng模板DNA,2.0 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、1.5 U Taq DNA聚合酶、0.3μmol/L随机引物S1519;扩增程序为:94℃预变性5 min,然后94℃30 s,38℃50 s,72℃1 min,35个循环,最后72℃延伸10 min,4℃保存。

野百合碱诱导大鼠肺动脉高压模型的建立

背景:目前尚缺乏简单易行、实用、操作性强的肺动脉高压动物模型。目的:建立一种实用的注射野百合碱诱导的肺动脉高压动物模型。方法:采用一次性皮下注射野百合碱60mg/kg的方法制备SD大鼠肺动脉高压模型。结果与结论:野百合碱注射后第1,2,3,4周,大鼠平均肺动脉压明显升高,右心室肥厚明显。光镜下可见肺小血管肌化程度增强,相对中膜厚度增加,肺血管密度减少,以上症状均随野百合碱注射时间的延长逐渐加重。证实此方法建立的大鼠肺动脉高压模型造模成功。

复方薤白胶囊对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠ET、TNFα含量的影响

目的:探讨复方薤白胶囊对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠血浆中内皮素(ET)、肿瘤坏死因子α(TNFα)含量的影响。方法:SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、复方薤白胶囊高剂量组和复方薤白胶囊低剂量组。采用MCT进行一次性腹腔注射(按60 mg.kg-1)造模,22 d后测定平均肺动脉压、平均右心室压以及血浆中ET、TNFα的含量,并观察肺小动脉及右心室病理变化。结果:模型组平均肺动脉压、右心室压以及血浆中ET、TNFα含量明显高于正常对照组(P<0.01)。其余各组平均肺动脉压、右心室压以及血浆中ET、TNFα含量明显低于模型组(P<0.05或P<0.01),且复方薤白胶囊高、低剂量组优于卡托普利组。结论:复方薤白胶囊能有效降低MCT诱导肺动脉高压大鼠的肺动脉压,可能的机制是抑制TNFα、ET产生,减轻MCT引起的炎性细胞浸润,改善肺小动脉及右心室重构。提示复方薤白胶囊将是防治肺动脉高压很有前途的中药,值得进一步研究。

白花前胡对野百合碱所致大鼠肺动脉高压的影响

目的∶研究中药白花前胡的提取物PPD对野百合碱(MCT)所致大鼠肺动脉高压的影响。方法∶用MCT制造大鼠肺动脉高压模型;以硝苯地平(Nif)为阳性对照药;PV-1聚乙烯管插管测量肺动脉压力;肺组织切片HE染色显微测量肺小动脉中膜厚度;免疫荧光法观察肺组织中Tenascin-C合成的变化。结果∶PPD可明显减少MCT引起的肺动脉压升高,而对体循环压力无明显影响;可明显减少MCT所致的右心指数的升高;可明显减轻MCT所致的肺血管损伤与肺血管重建(明显减少了炎性细胞浸润、TN-C的表达及血管平滑肌细胞的增殖)。结论∶PPD可明显抑制MCT所致大鼠肺动脉高压的形成。

不同剂量野百合碱诱导SD幼鼠右室阻力负荷性心力衰竭模型的比较

目的采用不同剂量野百合碱(monocrota line,MCT)诱导SD幼鼠右心衰竭模型,探讨适合的右心衰竭模型制作方法。方法清洁级SD雄性幼鼠125只,随机分为G0、G1、G2、G3、G4组,每组各25只SD幼鼠。G1～G4组幼鼠分别一次性腹腔注射MCT 30、40、50、60 mg/kg,诱导制作右心衰竭动物模型;G0组为对照组,给予生理盐水腹腔注射。腹腔注射后每2周1次,采用彩色多普勒超声仪测SD幼鼠右心室横径、三尖瓣反流速度、肺动脉压、射血分数(EF值)、缩短分数(FS值),共检测6周,4次;随后处死SD幼鼠,取心脏、肺组织病理切片对比观察。结果 G0组SD幼鼠无死亡,G1、G2、G3组SD幼鼠的死亡率远远低于G4组。各组SD幼鼠右心室横径逐渐增大,G1～G4组较G0组更明显(P<0.01);G0组SD幼鼠各时期的三尖瓣反流速度、肺动脉压无明显改变,而G1～G4组逐渐增高(P<0.01)。G1组SD幼鼠肺动脉仅出现轻度新生内膜病变,心脏组织病理切片无明显改变;G2组SD幼鼠肺动脉可见较明显新生内膜病变,心脏组织病理切片可见明显炎性细胞浸润;G3、G4组SD幼鼠肺组织病理切片可见中小动脉中膜明显增厚和小动脉肌化,部分肺组织远端小动脉闭塞,肺泡内可见心衰细胞,右室心肌细胞肥大伴纤维组织增生。结论 50 mg/kg MCT可成功诱导建立肺动脉高压致右心衰竭模型,其病理变化可更好模拟重度肺动脉高压致右心衰竭,且实验动物有较高的生存率。

施用8种野百合属绿肥后砖红壤速效钾含量随时间的动态变化

研究施用8种野百合属绿肥后砖红壤速效钾含量随时间的动态变化。结果表明,施用不同的绿肥对土壤速效钾含量的影响不同,但对土壤速效钾含量影响的基本规律一致。施用绿肥后的不同时间内能不同程度的提高土壤速效钾的含量,提高幅度最大的为埋田一个月,且施用绿肥后的土壤速效钾含量显著高于对照(不施用绿肥的土壤)。

应用分子标记探讨一种野生百合的分类地位

为了探讨采自辽宁省丹东市一种百合(Lilium)种质(简称丹东百合)的分类地位,应用RAPD(随机扩增多态性)分子标记方法对包括丹东百合在内的13种百合种质资源进行了亲缘关系分析。结果表明:丹东百合属于野百合种,与白天堂遗传距离最近,遗传距离为0.2667,与西伯利亚遗传距离最远,遗传距离为0.4286。

野百合试管鳞茎诱导与增殖的研究

以贵州野百合鳞片不同部位为外植体,用3%次氯酸钠进行消毒,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养。结果表明,用3%次氯酸钠对野百合鳞茎进行外植体进行消毒完全可行,且对操作人员,实验材料和环境都不存在不良影响,价格低廉;最佳的诱导培养基为MS＋6-BA1.5mg/L＋NAA0.3mg/L;最适合的外植体为百合鳞片基部。用相同的培养基进行增殖培养,25d后,可获得繁殖系数高、生长势好、并有新根生成的试管鳞茎;将直径为1～2cm的试管鳞茎移栽培养,成活率高于90%。该研究得出的方法可在短时间内提供大量的贵州野百合种苗。

野百合碱诱导的肺动脉高压小型猪的肺病理改变

目的观察野百合碱诱导小型猪肺动脉高压模型不同时期心肺组织的病理变化。方法12 头雄性西藏小型猪，4.0~4.5月龄，体质量15.0~18.0 kg。测定12 头小型猪平均肺动脉压作为基础值；然后选择10 头小型猪腹腔注射野百合碱（MCT）10.0 mg/kg；给药4周和8周后再分别测定小型猪平均肺动脉压。分别于4、8周处死两头小型猪，采样观察小型猪心肺组织病理改变情况。结果给药4 周和8 周后，西藏小型猪的肺动脉压力与人体相近，正常平均肺动脉压约为（15.19±0.70） mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）；给药4周后平均肺动脉压升至（19.69±2.47） mmHg；给药8周后升至（25.62±4.88） mmHg，与基础压相比均有显著差异（P〈0.01）。组织病理学分析显示，给药4 周后即可形成有意义的病理改变, 右心室肥厚；8周后有明显的病理学改变，如右心室纤维化和肺动脉中层增厚。结论MCT给药8周后，造成肺动脉压力升高和肺血管重构，可以诱导西藏小型猪形成慢性肺动脉高压模型。

野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织apelin及其受体的变化

目的:探讨新的小分子活性肽apelin及其受体(APJ)在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的变化及意义。方法:雄性SD大鼠25只,随机分为对照组(n=10)和野百合碱组(n=15)。野百合碱组大鼠一次性腹部注射野百合碱60 mg/kg,对照组注射相同剂量的溶媒。注射野百合碱后第21天时,测定大鼠平均肺动脉压,HE染色观察肺组织病理学变化,Masson三色染色检测肺血管重建指标,放射免疫法及Western blot法测定肺组织中apelin和APJ的蛋白,RT-PCR法观察肺组织apelin和APJ的基因。结果:野百合碱组的平均肺动脉压、右心室肥大指数、肺血管重建指标、肺组织中apelin蛋白含量均明显高于对照组,而肺组织中APJ蛋白及基因表达显著低于对照组(P<0.05,P<0.01);但肺组织apelin基因表达两组间无显著统计学差别。免疫组化定位发现,野百合碱组大鼠apelin及APJ蛋白在肺组织内的炎症细胞胞膜及胞浆内呈强阳性表达。结论:内源性apelin及其受体的表达异常可能在野百合碱诱发的肺动脉高压的发生发展中起重要作用。

辛伐他汀对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠IL-6和IL-8表达的影响

目的观察辛伐他汀对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠炎症细胞因子IL-6和IL-8表达的影响,探讨辛伐他汀作用于肺动脉高压的机制。方法将30只健康雄性SD大鼠随机平均分为正常对照组、MCT诱导的肺动脉高压组(模型对照组)、辛伐他汀干预治疗组(治疗组)。模型对照组和治疗组注射野百合碱造模。治疗21 d后,采用右心导管法检测大鼠平均肺动脉压(mPAP);称量RV和LV+S,计算右心肥大指数(RVHI)。采用RT-PCR检测大鼠肺组织中IL-6和IL-8 mRNA的表达,采用ELISA法检测大鼠血清中IL-6和IL-8水平。结果模型对照组mPAP和RVHI值显著高于治疗组和正常对照组,治疗组和正常对照组mPAP和RVHI值比较无显著性差异。模型对照组大鼠肺组织中IL-6和IL-8 mRNA的表达和血清中IL-6和IL-8水平显著高于正常对照组和治疗组,而治疗组大鼠肺组织中IL-6和IL-8 mRNA的表达和血清中IL-6水平与正常对照组比较无显著性差异,但治疗组大鼠血清IL-8水平高于正常对照组(P<0.05)。结论辛伐他汀可通过抑制MCT诱导大鼠肺动脉高压模型大鼠肺组织中炎性细胞因子的表达、下调大鼠炎性细胞因子的分泌,达到对肺动脉高压的治疗作用。

野百合碱诱导实验性肺动脉高压病理形态观察

目的 :30只Wistar大鼠一次性腹腔注射野百合碱 (monocrotaline ,MCT) (6 0mg kg体重 ) ,建立肺心病模型 ,观察野百合碱诱导肺动脉高压的机理。方法 :利用注射野百合碱方法建立肺动脉高压的动物模型 ,通过光学显微镜及电子显微镜观察野百合碱对肺动脉血管内皮细胞的损伤 ,和导致肺动脉血管平滑肌增生及右心室的变化 ,并分析病变之间的关系。结果 :野百合碱注射可使肺动脉血管内皮细胞损伤 ,并诱导肺动脉血管壁的重建 ,特别是平滑肌明显增生 。

间尼索地平对野百合碱诱导的肺动脉高压防治作用及其抗5羟-色胺—细胞外信号调节激酶通路的机制探讨(英文)

研究间尼索地平对野百合碱诱导的肺动脉高压的防治作用及其作用机制。大鼠单剂量皮下注射野百合碱(60 mg.kg-1)制备肺动脉高压模型。导管法测定肺血流动力学指标;光镜观察肺小动脉结构的改变;同时测定血清中MDA及SOD的含量(活性);免疫印迹法测定PCNA、ERK1和p-ERK的表达水平;免疫组化法观察5-HT和PCNA的表达。结果表明,与正常对照组相比,模型组大鼠的平均肺动脉压及右心指数明显增加;肺小动脉肌化程度加重;丙二醛含量显著升高,超氧化物歧化酶活性明显降低;PCNA和5-HT阳性细胞数目明显增加;PCNA蛋白表达及p-ERK/ERK1比率也显著增加,不同剂量间尼索地平在一定程度上逆转了上述变化。间尼索地平对野百合碱诱导的肺动脉高压表现出一定的保护作用。这一作用可能与其降低5-HT的表达,抑制ERK/MAPK信号通路有关。

阿魏酸钠逆转早期野百合碱诱导的肺动脉高压

目的观察阿魏酸钠片早期干预由脱氢野百合碱(DHMC)诱导肺动脉高压(PAH)比格犬的疗效。方法 18只比格犬随机分入正常对照组、DHMC组、阿魏酸钠组,每组6只。阿魏酸钠组和DHMC组犬右心房注射DHMC制备PAH模型。分别在实验前和实验第4、8周测定肺动脉收缩压(PASP)、肺动脉平均压(MPAP)、肺血管阻力(PVR)和心排量(CO)。实验第8周取犬肺组织,经苏木精-伊红(H-E)染色后在光学显微镜下观察并照相。结果实验第4周(造模后),阿魏酸钠组和DHMC组的PASP、MPAP和PVR均显著高于同组实验前(P值均<0.01),CO均显著低于同组实验前(P值均<0.01)。阿魏酸钠组在实验第8周时的PASP、MPAP和PVR均显著低于同组实验第4周和DHMC组实验第8周时(P值均<0.01);CO显著高于同组实验第4周和DHMC组实验第8周时(P值均<0.01)。正常对照组不同时间点间上述各项指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。DHMC组犬的肺小动脉内膜显著增厚和新生内膜形成,肺小动脉增生伴充血,并导致肺泡组织塌陷;阿魏酸钠组犬的肺小动脉内膜增厚程度轻于DHMC组,无明显肺泡塌陷。结论DHMC诱导比格犬PAH模型的形成,阿魏酸钠片早期干预能降低肺动脉压力,减轻血管内膜增生。

秦巴山区5种野生百合鳞片繁殖特性研究

为了探索野生百合的繁殖特性,对秦巴山区5种野生百合32个生态型的32个品系进行了鳞片扦插试验。结果表明:不同野生百合鳞片扦插的籽球大小和繁殖系数不同,其中宜昌百合繁殖的籽球最大,繁殖周径达到了2.91cm,重量达0.53g,宝兴百合较低,分别为2.05cm和0.14g;卷丹百合的扦插繁殖系数最高,为2.10,宝兴百合最低仅为0.75;同一种类的不同生态型之间扦插繁殖特性也差异较大,如陕西省汉阴县平梁乡西林村的宜昌百合籽球周径、重量和扦插繁殖系数分别高达3.45cm、0.71g和1.67,而甘肃省舟曲县峰迭乡沙沟村的宜昌百合则分别为2.57cm、0.33g和0.99;扦插鳞片重量与其繁殖籽球大小之间存在极显著的正相关,其中鳞片重量与籽球周径和重量的相关系数分别为0.716和0.714。

秦巴山区野百合表型多样性

为揭示秦巴山区野百合天然居群的表型变异，对该地区17个野百合天然居群花、叶的8个质量性状和21个数量性状进行了观测。结果表明：野百合在秦巴山区适应性强、分布范围广，而且大多生长在海拔705～1913m的高山；表型性状变异丰富；上部叶片长与纬度存在显著正相关，柱头宽、上部叶片长与海拔高度存在显著正相关，下部叶间距与年降水量存在显著正相关，花梗长和上部叶片长与年均温度存在显著负相关；17个野百合天然居群被系统聚类为巴山和秦岭2大组。该研究结果为进一步开展野百合遗传育种、保护生物学的研究奠定了基础。