野葛叶水提物、醇提物对急性酒精中毒小鼠的解酒护肝作用

目的研究野葛叶水提物、醇提物对急性酒精中毒小鼠的解酒护肝作用。方法 56°白酒建立急性酒精中毒小鼠模型,分别考察2种提取物对小鼠醉酒、睡眠、醒酒时间的影响,分析血液中乙醇质量浓度,检测肝组织中乙醇脱氢酶(ADH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)含有量;以及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,再通过氧化自由基吸收能力(ORAC)试验测定醇提物抗氧化能力。结果与模型组比较,野葛叶醇提物组能显著延长醉酒时间,缩短睡眠、醒酒时间;显著降低乙醇质量浓度;显著增加ADH、SOD活力和GSH含有量,减少MDA、TG含有量(P <0. 05,P <0. 01),并均优于水提物组,但对ALT、AST活力无显著影响(P> 0. 05)。同时,它在体外具有较强的氧自由基清除能力。结论野葛叶醇提物具有较好的解酒护肝作用,其作用机制可能与增强肝脏抗氧化能力有关。

野葛叶蛋白质提取工艺研究

以野葛叶为原料,采用水提醇沉法,通过单因素试验和正交试验,以凯氏定氮法测得野葛叶蛋白质含量和提取率,对提取温度、提取时间、溶液pH值、液料比4个因素进行优化研究,确定野葛叶蛋白质提取的最佳方法。结果表明,从野葛叶中提取蛋白质的最佳工艺条件为:提取温度90℃,提取时间120 min,提取溶液的pH值6,液料比1.4∶1(V/W,L∶kg)。

野葛叶总黄酮提取物对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用

目的探讨野葛叶总黄酮提取物对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用。方法选择6月龄SD雌性大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、己烯雌酚组、野葛叶总黄酮提取物低和高剂量组。观察各组胫骨抗弯力,右股骨和腰4椎体的骨密度和骨生物力学性能,血清中钙(Ca)、磷(P)和碱性磷酸酶(ALP)的变化。结果野葛叶总黄酮高、低剂量组及己烯雌酚组大鼠胫骨抗弯力,股骨和腰椎的骨生物力学性能均高于模型组(P<0.05);野葛叶总黄酮高剂量组及己烯雌酚组大鼠股骨和腰椎骨密度,ALP的变化均高于模型组(P<0.05)。结论野葛叶总黄酮提取物通过提高大鼠胫骨抗弯力,增加股骨和腰椎的骨密度,改善股骨和腰椎的骨生物力学性能,提高血清ALP含量等因素防治骨质疏松。

野葛叶提取物体内、外抗衰老活性

目的研究野葛叶提取物体内、外抗衰老活性。方法体内实验,以D-半乳糖(D-gal)致急性衰老小鼠为模型,灌胃不同浓度的野葛叶提取物,6 w后,观察各组行为学及学习记忆改变,分别测定血清、肝脏和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;体外实验,采用分光光度法分别测定野葛叶提取物清除二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基、2,2-聚氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的能力及还原能力。结果体内实验,与空白对照组比较,野葛叶提取物各组能明显改善衰老模型小鼠学习记忆能力,显著增强血清、肝脏和脑组织中SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量;体外实验,野葛叶提取物有较强的清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基能力及较强还原能力,分别在质量浓度400,300,400,400μg/ml时达到较高水平,之后进入平台期。结论野葛叶提取物具有较明显的抗衰老活性,作为药用资源可进一步开发利用。

野葛叶总黄酮最优超声提取工艺研究

以芦丁为标准品,建立总黄酮含量测定标准曲线;并建立以醇浓度(A)为60%、70%、80%,时间(B)为0.5 h、1 h、1.5 h,提取次数(C)为1、2、3次,料液比(D)为1:8、1:10、1:12的四因素三水平正交实验,研究野葛叶总黄酮超声提取工艺。研究得出,野葛叶总黄酮超声提取最优方法为:A_(3)B_(1)C_(3)D_(1),即乙醇浓度80%,提取时间0.5 h,超声次数3次,料液比1:8。结果表明,本实验优选出的最佳提取方法方便、可靠、提取率高,适合野葛叶总黄酮提取。

蔗糖和光对三裂叶野葛毛状根生长及次生物质产生的影响

研究了蔗糖浓度和光对固体培养的三裂叶野葛毛状根生长及其总异黄酮和葛根素产生的影响。结果表明:在供试的分别添加1%、3%、5%、7%和9%蔗糖的MS固体培养基中,3%蔗糖能促进三裂叶野葛毛状根的生长及其异黄酮类化合物和葛根素的积累;培养20d后,其生物量达到0.48g(DW,干重)瓶,总异黄酮和葛根素含量分别为25.44mgg(DW)和11.64mgg(DW)。与添加3%蔗糖的MS培养基培养的三裂叶野葛毛状根相比,含5%蔗糖的培养基培养的毛状根干重增殖倍数提高了7.0%,而含1%、7%和9%蔗糖的培养基培养的毛状根干重增殖倍数分别下降62.4%、42.8%和65.3%;其总异黄酮含量分别降低57.4%、13%和33.4%,葛根素含量分别下降47.9%、15.8%和35.1%,但其毛状根培养物的可溶性糖含量则分别增加了0.52、1.45和1.54倍。暗培养30d的毛状根的生物量达到0.83g(DW)瓶,分别比蓝光和白光培养的毛状根提高37.1%和23.3%。在蓝光和白光下培养的部分毛状根的表面呈淡绿色;但白光处理的毛状根中总异黄酮含量比蓝光和暗培养处理的分别提高了14.7%和19.2%;蓝光抑制毛状根中葛根素含量的积累,白光和暗培养的毛状根培养物中的葛根素含量分别是蓝光处理的1.61倍和1.52倍。

三裂叶野葛毛状根的生长及其培养基营养物质的消耗变化

研究了发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)ATCC15834遗传转化产生的三裂叶野葛(Pueraria phaseoloides)毛状根在液体培养过程中生长及其部分营养物质消耗的关系.结果表明:三裂叶野葛毛状根液体培养0～4d内处于生长迟滞期、8～16d为快速生长期、16d后进入生长平台期.培养基的PO43-、硝态氮和铵态氮在毛状根液体培养过程中被逐渐吸收和消耗,培养16d时培养基中的PO43-被消耗殆尽,其浓度仅为培养基起始PO43-浓度的0.26%;培养基的铵态氮和硝态氮则在培养20d时才消耗殆尽;而培养基中的Ca2+浓度在培养过程中逐渐降低,但在培养20d时仍未被完全消耗,其浓度约为起始浓度的30.5%.培养基的pH值随培养时间的延长而不断降低,培养20d后pH值由5.62降低到4.09;而毛状根的颜色也随培养基pH值的降低和培养时间的延长逐渐由白色变成浅黄色和浅褐色.该结果为今后设计合适的培养基以开展野葛毛状根的大规模液体培养来生产葛根素提供了可能性.

三裂叶野葛种子的休眠及萌发(简报)

20mg·L-1激动素 (KT)浸种的三裂叶野葛种子萌发效果最佳 ,萌发率达 75 %。用石英砂研磨破种皮后 ,再以 2 0mg·L-1KT浸种的三裂叶野葛种子的萌发率达到 95 % ,提早 5d萌发。根据种子抑制物实验的结果认为 ,三裂叶野葛种子的种皮和种仁中可能存在抑制种子萌发的物质。

三裂叶野葛毛状根的培养及其葛根素的产生

发根农杆菌ATCC15834感染三裂叶野葛叶片外植体20天后,从其切口叶脉处产生的愈伤组织上产生毛状根。感染35天后约85%的叶片外植体产生毛状根。毛状根能在无外源生长调节剂的MS固体和液体培养基上自主生长,但在液体培养基中培养的毛状根生长更迅速,也不会形成愈伤组织。毛状根线粒体膜电势的荧光染色结果表明,液体培养的毛状根细胞线粒体的膜电势比固体培养的毛状根高11.8倍。PCR结果证实,发根农杆菌Ri质粒的rolB和rolC基因已在三裂叶野葛毛状根基因组中整合并得到表达。HPLC测定结果表明,三裂叶野葛毛状根中的葛根素含量约为对照根(种子萌发产生的幼苗根)的2.5倍,达1.190 mg/g.dry.wt;并比多年生葛根生药片的葛根素含量高6.7%。

三裂叶野葛毛状根的诱导及其固体培养和液体培养

发根农杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes)ATCC15 834感染三裂叶野葛 (Puerariaphaseoloides)叶片外植体 2 0d后产生毛状根 ,毛状根可直接从叶片外植体叶脉处或从叶脉处产生的愈伤组织上产生。感染 35d后 ,约 85 %的叶片外植体产生毛状根。毛状根能在无外源生长调节剂的MS固体和液体培养基上自主生长。PCR扩增结果表明 ,发根农杆菌Ri质粒的rolB和rolC基因已在三裂叶野葛毛状根基因组中整合并得到表达。与固体培养的毛状根相比 ,在液体培养基中培养的毛状根不仅生长迅速 ,也不会形成愈伤组织。在无外源生长调节剂的液体MS培养基中培养 15d的三裂叶野葛毛状根的鲜重、干重、可溶性总糖含量及细胞内活性氧 (ROS)含量分别为固体培养毛状根的1.5 9倍、1.18倍、5 .2 5倍和 1.16倍。

细胞分裂素6-BA对三裂叶野葛毛状根生长和抗氧化酶活性的影响

以三裂叶野葛毛状根为试材,研究了不同浓度6-BA对三裂叶野葛毛状根生长、异黄酮化合物及可溶性蛋白质含量和抗氧化酶活性的影响。结果表明:6-BA抑制三裂叶野葛毛状根的生长,降低其鲜样质量,且抑制作用与6-BA浓度成正比例关系,同时能提高毛状根培养物中异黄酮化合物的含量;但降低其毛状根培养物中可溶性蛋白质含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性水平,提高过氧化物酶(peroxidase,POD)活性水平,这表明6-BA可能通过调节三裂叶野葛毛状根的抗氧化酶活性进而调控其生长和异黄酮化合物的积累。

三裂叶野葛茎段和叶柄培养成再生植株

三裂叶野葛的叶柄和茎段外植体在含有 6 - BA1.0 mg/L 和 NAA0 .1m g/L 的 MS培养基上产生愈伤组织 ,愈伤诱导率分别为 10 0 %和 94% ,并进一步分化出芽 ,芽再生率分别为 10 0 %和 33.3%。而在添加 6 - BA3.0mg/L和 NAA 1.0 mg/L的 MS培养基中叶柄和茎段外植体的愈伤诱导率分别为 10 0 %和 6 4.3% ,芽再生率分别为 5 7.1%和 2 1.4%。芽长成嫩枝后转移至添加 0 .1m g/L NAA的 MS培养基后分化出根 ,形成小植株。再生植株的移栽成活率达 90 %。

硒对三裂叶野葛毛状根生长及抗氧化酶活性的影响

本文研究硒(Se)对三裂叶野葛毛状根生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明,低浓度亚硒酸钠(0～0.5 mg/L)可促进毛状根生长及异黄酮的生物合成,而高浓度亚硒酸钠抑制其生长和异黄酮的积累,且浓度愈高抑制作用愈强。此外,硒可促进可溶性蛋白的生物合成,亚硒酸钠浓度愈高促进作用愈明显;硒还可降低毛状根中SOD活性,提高POD活性,降低MDA含量。说明硒对三裂叶野葛毛状根生长和抗氧化酶活性有重要的调节作用。

壮药三裂叶野葛的显微鉴别研究

采用显微鉴别的方法研究壮药三裂叶野葛[Pueraria phaseoloides(Roxb.)Benth.]的组织结构和粉末显微特征,确定壮药三裂叶野葛的不同部位根、茎、叶的组织结构及根、茎叶粉末的主要显微鉴别特征,为壮药三裂叶野葛质量标准的制定提供参考依据。

正交试验优选壮药三裂叶葛藤中葛根素的提取工艺研究

目的:探讨壮药三裂叶葛藤中葛根素的提取工艺优化。方法:以葛根素含量作为研究指标,考察了提取时间、提取方式、溶剂浓度、物料比对三裂叶葛藤中水溶性成分提取率的影响,并通过正交试验设计确定了其最佳提取工艺。结果:取三裂叶葛藤粉末加入6倍量80%的甲醇加热回流提取1.5h,是其最佳提取工艺。结论:该工艺稳定可靠,可为壮药三裂叶葛藤中水溶性成分的工业化提取提供科学依据。

6-BA和硝酸银对三裂叶野葛毛状根生长及异黄酮含量的影响

本文研究了6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和硝酸银(Ag NO3)组合对固体培养的三裂叶野葛毛状根生长、异黄酮化合物含量及抗氧化酶活性的影响。结果表明,不同浓度的6-BA和30μmol·L-1 Ag NO3组合抑制三裂叶野葛毛状根的生长,促进毛状根中异黄酮化合物的合成与积累,但降低总异黄酮化合物和可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性水平,促进细胞程序性死亡的发生。这说明6-BA和Ag NO3组合对三裂叶野葛毛状根的生长和异黄酮化合物的积累具有重要的调控作用。

6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸对三裂叶野葛毛状根生长和异黄酮含量的影响

为了探讨植物激素对三裂叶野葛毛状根生长和异黄酮化合物含量的影响,采用不同浓度的6-苄氨基腺嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)或6-BA和萘乙酸(α-Naphthaleneacetic,NAA)结合处理三裂叶野葛毛状根,观察其对毛状根生长的影响,然后利用分光光度计测定毛状根中异黄酮化合物含量及抗氧化酶活性。结果表明:6-BA抑制三裂叶野葛毛状根的生长,降低三裂叶野葛毛状根的生物量,且随着6-BA浓度的增加,其抑制效果愈明显;同时降低其总异黄酮化合物的含量。与对照相比,不同浓度6-BA和NAA 2.0 mg/L结合抑制毛状根的生长,降低毛状根中总异黄酮化合物含量。6-BA和NAA结合能显著提高毛状根可溶性蛋白质含量和过氧化物酶活性,但降低其超氧化物歧化酶活性;单独6-BA处理的毛状根培养至30 d时,可以检测到典型的DNA ladder带,而6-BA和NAA结合处理的毛状根培养至20 d时就可以检测到DNA ladder带,表明6-BA或6-BA和NAA结合都可以促进细胞程序性死亡的发生,且NAA具有协同作用。

福建共生固氮植物资源调查(三) 50种豆科绿肥或牧草的分布、生长性特、结瘤固氮及主要用途

豆科植物与根瘤菌的共生固氮在农业生产上具有重要意义,可以增加肥源、节约能源、改良土壤、保持水土、改善生态环境。我国的豆科植物资源丰富,种类繁多,据报道,在我国已发现的豆科植物约有160属1400种(杨民权,1983)。虽然,我国是世界上利用豆科绿肥最早的国家,而且栽培面积也很广(孙醒东,1958),但是。