山奈酚与野马追总黄酮对实验性高脂大鼠的降脂作用及其血液流变学比较

目的观察山奈酚单体对实验性高脂大鼠的降脂作用和血液流变学的影响,并与野马追总黄酮进行比较。方法 70只大鼠分为空白对照组,高脂模型组,山奈酚大、小剂量组,野马追总黄酮大、小剂量组和阳性药物组。每天上午8:30左右,山奈酚大、小剂量组分别灌服300 mg/kg和100 mg/kg山奈酚,野马追总黄酮组灌服(生药)100 mg/kg和50 mg/kg,阳性药物组灌服非诺贝特20 mg/kg,各组动物给药容量0.5 mL/100 g,空白对照组灌服赋形剂0.5%羧甲基纤维素钠溶液;除空白对照组每天按常规给予基础饲料外,其余实验组给予高脂饲料。连续给药6周后,各组动物采血测定血清中TC、TG、HDL-c、LDL-c、SOD、MDA、NO和血液流变学。采用油红O染色观察山奈酚对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的巨噬细胞泡沫化的影响。结果山奈酚大、小剂量动物组血脂、血液流变学参数和MDA均明显低于高脂模型组(P<0.01);而与野马追总黄酮大、小剂量组相比,组间无统计学差异(P>0.05)。山奈酚有效抑制oxLDL诱导的巨噬细胞内脂质的聚集。结论山奈酚单体连续给药能降低实验性高脂动物血脂、血液流变学参数和血清中MDA浓度而升高SOD活性,山奈酚也能抑制巨噬细胞泡沫化的形成。山奈酚单体有望替代野马追总黄酮用于降脂、抗氧化、抗炎等临床治疗。

野马追总黄酮纯化工艺的研究

目的研究利用大孔吸附树脂富集纯化野马追总黄酮的工艺条件及参数。方法以总黄酮吸附量、醇洗物总黄酮含量、总黄酮回收率为考察指标,考察D101大孔吸附树脂分离纯化野马追总黄酮的动态吸附洗脱条件。结果野马追提取物上样总黄酮浓度为6 mg/mL,pH调节为5～ 6时,动态吸附容量达65 mg/g(11.7 mg/mL),吸附流速以1 BV/h为宜,6倍量柱体积70%乙醇为洗脱剂,以5 mL/min的(相当于3BV/h)流速进行洗脱,树脂可重复使用5次为最佳次数。结论 本方法可方便有效地纯化野马追总黄酮,所得野马追总黄酮得率2.71%,含量72.13%。

野马追总黄酮的体内外抗乳腺癌活性及机制研究

目的探究野马追总黄酮的体内外抗乳腺癌活性及相关的作用机制。方法 MTT法检测野马追总黄酮对乳腺癌细胞(MCF-7、T47D、MDA-MB-231、MDA-MB-468)和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A增殖的影响;流式细胞术检测野马追总黄酮对乳腺癌细胞周期和凋亡的影响;吖啶橙(AO)染色法检测野马追总黄酮对细胞自噬的影响;Western blotting检测细胞周期、凋亡、自噬相关蛋白的变化,以及PI3K/Akt信号通路相关蛋白的变化;建立MDA-MB-231细胞的裸鼠移植瘤模型,观察野马追总黄酮的体内抗肿瘤活性。结果野马追总黄酮能明显抑制乳腺癌细胞增殖,并呈剂量依赖性,而对人正常乳腺上皮细胞无显著的抑制作用;野马追总黄酮能增加G2/M期细胞比例,上调p-cdc-2蛋白表达,下调cdc-2和CyclinB1蛋白表达;野马追总黄酮能显著增加乳腺癌细胞凋亡比例,上调促凋亡蛋白Bad和Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达;野马追总黄酮能够诱导乳腺癌细胞产生自噬,自噬相关蛋白LC3-II表达上升,p62表达降低;野马追总黄酮能够显著抑制PI3K和Akt的磷酸化水平;野马追总黄酮能够在体内抑制裸鼠肿瘤的体积。结论野马追总黄酮通过抑制PI3K/Akt信号通路,阻滞细胞周期、诱导凋亡和自噬,进而在体内外抑制乳腺癌细胞的生长。