贯叶金丝桃(Hypericum perforatum)种子灌浆与发芽特性研究

贯叶金丝桃(Hypericum perforatum)是抗抑郁中药的基原植物,以有性繁殖为主,种子微小。为了揭示贯叶金丝桃种子发育规律,明确种子适宜采收期,以甘肃礼县栽培的2年生贯叶金丝桃为研究对象,于开花后第5天开始,每隔3 d测定种子粒重变化动态,并拟合Logistic曲线方程,最后测定各时期采收种子的发芽指标。结果表明:贯叶金丝桃种子灌浆持续期44 d,籽粒干质量变化符合Logistic生长曲线:开花后第5~11天为渐增期,第11~32天为快增期,第32~44天进入稳增期后略有下降。在灌浆过程中,种子鲜质量呈先升高后下降的动态变化趋势,在花后第32天达到最大值0.2697 g;灌浆速率和脱水速率呈波动趋势,种子干质量与平均灌浆速率、灌浆持续期呈极显著正相关,与含水量呈极显著负相关。种子发芽率和发芽指数在开花后44天达到最大,发芽势在开花后41天达到最大,发芽率、发芽势和发芽指数均与灌浆持续期呈极显著正相关,与含水量呈极显著负相关。以上说明甘肃礼县贯叶金丝桃繁种时以开花后44天左右(8月9日前后)为种子采收适宜期,过早采收和延迟采收均影响种子发芽质量。

西南金丝梅中结构新颖的PPAPs类化合物

以西南金丝梅(Hypericum henryi Levl.et fan)地上部分为材料,将其正己烷组分通过硅胶柱层析、中压制备色谱(MPLC)、SephadexLH-20凝胶柱层析等方法,分离并得到4个化合物,包括2个内酯环的间苯三酚类化合物(PPAPs),1个单环体系的间苯三酚类化合物(MPAPs)和1个双环体系的间苯三酚类化合物(BPAPs),其中1个为新的PPAPs类化合物,将其命名为hyphenrone Y。所有化合物的结构均通过核磁共振和质谱等多种波谱技术进行确定。

贯叶金丝桃二氯甲烷部位的化学成分研究

目的研究贯叶金丝桃Hypericum perforatum L.二氯甲烷部位的化学成分。方法贯叶金丝桃二氯甲烷部位采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、半制备HPLC等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到11个化合物,分别鉴定为贯叶金丝桃降碳聚酮A(1)、α-芒柄花醇(2)、(3 R)-thunberginol(3)、2-geranyloxy-1-(2-methylpropanoyl)-phloroglucinol(4)、4,6-dihydroxy-2-O-(3″,7″-dimethyl-2″,6″-octadienyl)-1-(2′-methylbutanoyl)benzene(5)、norhyperpalum G(6)、garsubellin A(7)、garsubellin B(8)、(2″R/S)-kellerine C(9)、kobusone(10)、圣草酚(11)。结论化合物1为新化合物,化合物2~3为首次在藤黄科植物中分离得到,化合物4~10为首次从该植物中分离得到。

贯叶金丝桃化学成分的分离与鉴定

目的研究藤黄科(Guttiferae)金丝桃属(Hypericum)贯叶金丝桃(Hypericum perforatum L.)的化学成分。方法采用正相硅胶色谱、反相ODS色谱、凝胶色谱及高效液相色谱等多种色谱方法对贯叶金丝桃体积分数95%乙醇提取物进行分离纯化。利用紫外、红外、核磁共振光谱,高分辨质谱及X-ray单晶衍射法对化合物的结构进行鉴定。结果从贯叶金丝桃中分离鉴定8个化合物,分别为perforxanthone A(1)、8-hydroxy-1,2,3-trimethoxyxanthone(2)、绵马酚D(3)、(S)-5-hydroxy-3,4-dimethyl-5-pentylfuran-2(5H)-one(4)、ent-4(15)-eudesmene-1β,6α-diol(5)、methyl-(E)-8-oxooctadec-9-enoate(6)、模绕酮酸(7)、白桦脂酸(8)。结论化合物1为新的氧杂蒽酮类化合物,化合物2-7为首次从该植物中分离得到。

贯叶金丝桃提取物对急性缺氧大鼠肝肾损伤的改善作用

【目的】研究贯叶金丝桃提取物(Hypericum perforatum extract,HPE)对急性缺氧大鼠肝肾损伤的改善作用。【方法】通过小鼠常压密闭实验模型初步筛选HPE(20%乙醇提取物、70%乙醇提取物和95%乙醇提取物)的抗缺氧活性组分。进一步建立大鼠低压低氧肝、肾损伤模型:将80只健康大鼠随机分为8组,分别为常氧空白组(NG),缺氧模型组(HG),HPE低、中、高剂量组(HPE-L、HPE-M、HPE-H,100、200、400 mg/kg),金丝桃苷低、高剂量组(HYP-L、HYP-H,50、100 mg/kg)和醋酸地塞米松组(DXM,4 mg/kg)。观察HPE对急性缺氧大鼠肝、肾组织病理学变化的影响,并测定其中氧化应激指标和相关炎症因子的变化。【结果】与模型组比较,给予HPE干预后的大鼠肝、肾组织中丙二醛(MDA)和过氧化氢(H_(2)O_(2))含量下降(P<0.01,P<0.05),谷胱甘肽(GSH)含量增加(P<0.01,P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力有所提高(P<0.01,P<0.05)。同时,大鼠肝、肾组织中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的释放均被抑制(P<0.01,P<0.05)。【结论】HPE对急性缺氧大鼠肝、肾损伤具有一定程度的改善作用。

弯萼金丝桃总黄酮提取及抗氧化、降糖活性

通过单因素和响应面实验探究5种提取工艺(超声辅助提取、酸解提取、酶解提取、热水提取、热醇提取)对弯萼金丝桃总黄酮(TF)提取量的影响。采用HPLC测定并分析主要黄酮苷元的分布及含量,并进一步考察了TF与体外抗氧化活性〔1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH•)清除能力、2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS•)清除能力、•OH清除能力、还原能力〕的相关性及对α-葡萄糖苷酶的体外降糖能力。结果表明,超声辅助提取TF提取量最高。响应面优化最佳提取工艺为:超声提取温度68℃、提取时间23 min、乙醇体积分数24%、溶剂与样品的液料比(mL∶g)63∶1。在该条件下,TF提取量为34.85 mg RT/g〔以每克弯萼金丝桃中黄酮类化合物相当于芦丁(RT)的质量表示〕。经HPLC鉴定出TF中含有7种主要黄酮类化合物,其中,含量最高的为槲皮素-3-O-洋槐糖-7-O-鼠李糖苷和槲皮素,分别为3.897和2.874 mg/g;TF质量浓度与DPPH•清除能力、ABTS•清除能力、•OH清除能力、还原能力呈显著正相关,TF对α-葡萄糖苷酶的降糖能力可达到92.6%。

电感耦合等离子体原子发射光谱法对西南金丝梅中的15种元素的形态分析

目的建立电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)对西南金丝梅中15种元素形态的初步分析方法。方法样品采用去离子水浸提,直接用电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)检测,外标法定量,对西南金丝梅中的15种元素形态进行分析。结果各元素在0.01～2.5 mg/kg范围内,相关系数R>0.999 0,回收率在88.38%～109.5%,RSD值在0.27%～3.74%,检出限在0.1μg/kg～5.0μg/kg。结论方法快速、简便、准确、灵敏度高,能够准确测定西南金丝梅中15种微量元素的初步形态,为中药中微量元素形态分析提供有效参考。

西南金丝梅的黄酮成分研究

从西南金丝梅(hypericum henryi)的地上部分分得6个黄酮类化合物,应用光谱分析和化学方法鉴定其结构为二氢槲皮素,(2R,3R)二氢槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖甙,二氢槲皮素-7-O-α-L-双鼠李糖甙,槲皮素,槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖甙和槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖甙。

DPPH法测定金丝梅体外抗氧化活性

目的研究金丝梅(Hypericum patalum Thunb.)体外抗氧化作用。方法以槲皮素为对照,采用DPPH法测定金丝梅总提物、氯仿(F2)、乙酸乙酯(F3)和水(F4)部位抗氧化活性。结果金丝梅总提物、F2、F3、F4均有清除DPPH自由基的能力,在低浓度和高浓度时,F3清除率最高,F4清除率最低;其中在低浓度时F3的清除率高于槲皮素的清除率。结论金丝梅总提物、F2、F3、F4的抗氧化结果为进一步研究其抗氧化活性成分及开发利用本植物提供科学依据。

攀枝花金丝梅观赏性的综合评价

对攀枝花金丝梅的观赏特性运用层次分析法(AHP)进行了综合评价,结果表明:金丝梅的综合评价值为2.75,在应用价值等级中为Ⅰ类,属于应用价值极高的种类。从综合评价的实际结果看,层次分析法这一评价系统的应用,能够较准确、客观地反映金丝梅的景观应用价值,得到了较满意的结果,为以后城市园林绿化树种的选择提供了科学的理论依据。

野生观赏植物金丝梅的迁地栽培适应性研究

[目的]驯化适宜攀枝花栽培的野生金丝梅(Hypericum patulum)品种。[方法]对野生金丝梅的迁地栽培进行了3年的物候观测记录。[结果]从生长量、存活率、物候期等重要指标观测发现,金丝梅在干热河谷地区生长良好,适应该区域环境;耐炎热,抗病虫害能力强;枝的萌发量多,可发2次枝;一年连续2次开花,甚至个别单株全年开花,且花期延长;温度是影响金丝梅生长发育的重要因子。[结论]合理开发利用金丝梅既能丰富园林植物种类,提高城市品位,克服园林绿化植物种类单调的问题,又能突出区域特色,增加攀枝花城市物种多样性。

贵州金丝桃与金丝梅的生药学鉴别研究

目的:探索贵州金丝桃与金丝梅的鉴别特征。方法:采用形态鉴定的方法研究原植物的性状特征,利用光学显微镜观察根、茎、叶的显微构造特征。结果:贵州金丝桃茎红色,金丝梅茎淡红色至橙色;贵州金丝桃花瓣亮金黄色,多开张或下弯,金丝梅花瓣金黄色,少内弯;贵州金丝桃萼片为狭卵形或披针形,金丝梅为宽卵形或圆形。在茎的显微粉末中,贵州金丝桃中有少数草酸钙簇晶存在,直径13.91～40.70μm,金丝梅中偶见草酸钙簇晶,直径21.52～47.81μm。在叶表皮细胞特征中,两种植物叶上表皮细胞、下表皮细胞和气孔的大小均有一定的差异。结论:传统的性状鉴别和显微鉴别可有效区分贵州金丝桃和金丝梅。

金丝梅花粉可溶性多肽提取工艺研究

采用温差破壁结合超声波辅助的复合花粉破壁法对金丝梅花粉进行破壁,并选用风味蛋白酶与中性蛋白酶组成的复合酶水解制备多肽。通过花粉浓度、酶解时间、酶浓度、pH及温度等条件考察对花粉水解度的影响,并以水解度为指标进行正交试验L9(34)优化因素,得到复合酶的最佳水解工艺为:水解pH 7,水解温度50℃,加酶量7.5%,水解时间7h。在此条件下金丝梅花粉水解度达到73.14%,固形物中多肽含量为65.42mg/mL。

金丝梅嫩枝扦插繁殖技术研究

采用L9(34)正交试验法,研究了新梢段位(梢部、中部、基部)、基质(河沙、珍珠岩、草炭)及生长素类型(NAA、IBA、NAA与IBA混合液(1∶1))对金丝梅(Hypericum Patulum)嫩枝扦插繁殖效果的影响。对扦插成活率、根系总生长量、根鲜重、根数、新梢总生长量、新梢鲜重等指标进行了测定分析。结果表明:以河沙或珍珠岩为扦插基质,扦插成活率较高;以枝条中上部位做插条,扦插苗根系的生长发育情况较好;用吲哚丁酸处理对扦插成活及扦插苗生长发育有一定的促进作用。综合各测定指标,进行金丝梅扦插繁殖时,以河沙或珍珠岩为扦插基质,采用新梢中上部作为插条,经吲哚丁酸处理可获得较高的成活率以及较高质量的扦插苗。

民族药金丝梅总黄酮含量的测定

以芸香苷为对照品,用超声辅助提取、紫外-可见分光光度法测定金丝梅总黄酮含量。结果表明,金丝梅中总黄酮的相对百分含量为5.103%,RSD为0.936%;芸香苷对照品在0.0137 5～0.220 0 mg/mL范围有良好的线性关系,回归方程为D=9.926 1C+0.013,r2=0.999 7。说明该方法操作简便,结果可靠,能为金丝梅药用价值的开发及扩大资源利用提供科学的依据。

长柱金丝桃(Hypericum ascyron L.)分泌结构的研究

对长柱金丝桃各类器官进行了整体透明和解剖学研究,确定合理的采收部位和采摘时间。结果表明,植株富含分泌囊和分泌小管道两种分泌结构;叶片中分泌囊(道)的发育属于裂生型;地上部分泌结构分布较多,尤以叶片中数量最多、分布密度最大;确定植物的最佳采收时期是每年8～9月的花果期、最佳采收部位是地上部。此研究结果为此药用植物合理的采收部位和采收时间的确定提供解剖学依据,同时为其他植物分泌囊(道)发育规律的研究提供理论依据。

金丝梅培育技术试验研究

金丝梅具有药用、观赏、蜜源等多种利用价值。适生范围广,抗逆性强,是西部地区珍贵的野生观赏灌木,推广应用前景广阔。

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定中药西南金丝梅中26种农药残留量

提出了高效液相色谱-串联质谱法测定西南金丝梅中26种农药残留量的方法。样品用乙腈振荡提取,提取液经氨基固相萃取小柱净化。用shim-packXR-ODS色谱柱分离,采用电喷雾离子化正离子方式及多反应监测模式进行测定。26种农药的质量浓度在0.01～2.5mg·L-1范围内与峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)在4.16×10-5～2.85×10-4 mg·kg-1之间。在3个标准加入水平下进行了精密度和回收试验,方法的回收率在78.4%～112%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在1.2%～11%之间。

贯叶金丝桃对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的探讨贯叶金丝桃对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制。方法将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(尼莫地平0.012g/kg)和贯叶金丝桃高、低剂量组(5.212、1.303g/kg),每组10只。除假手术组外其余各组大鼠均采用改良线栓法构建大鼠大脑左侧中动脉闭塞再灌注模型。各药物组大鼠于术后第2天开始灌胃相应药液,每天1次,连续7d。分别于药物干预前(造模后第1天)和末次给药后进行大鼠神经功能评分,以TTC染色法观察其末次给药后的脑梗死情况,以苏木精-伊红染色法和TUNEL染色法分别观察其脑皮层、海马组织的病理改变和神经细胞的凋亡情况,以Westernblot法和反转录聚合酶链式反应法分别检测其促红细胞生成素(EPO)、促红细胞生成素受体(EPOR)、Janus激酶2(JAK2)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白和EPO、EPOR、JAK2、STAT3mRNA的表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠药物干预前、末次给药后的神经功能评分和脑梗死比例均显著升高(P<0.01);脑皮层和海马组织神经细胞受损明显,凋亡的神经细胞明显增多,凋亡率显著升高(P<0.01);脑组织中EPO、EPOR蛋白及mRNA的表达水平均显著降低(P<0.01),JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白和JAK2、STAT3mRNA的表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各药物组大鼠脑皮层和海马组织神经细胞受损及凋亡情况均有所改善,各定量指标大部分显著好转(P<0.05或P<0.01)。结论贯叶金丝桃对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与调节EPO介导的JAK2/STAT3信号通路有关。