斑点金免疫渗滤法检测鼠疫菌的方法研究

目的 建立一种简便、快速的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)用于鼠疫菌的快速诊断。方法 用柠檬酸钠还原法制备 10nm的胶体金标记鼠疫多价抗体 ,制备成鼠疫抗体金探针。结果 鼠疫胶体金渗滤法对鼠疫FI抗原的最低检出限为 10ng/ml;对EV76的最低检出限为 2 .4× 10 5cfu ;除 4株鼠疫菌外 ,不与包括小肠结肠炎和假结核耶尔森菌等其他细菌发生交叉免疫反应 ;整个反应过程在 10min内完成。结论 该方法简便、快速、特异、敏感 ,不需任何特殊仪器设备 ,适合于现场鼠疫监测。

银强化斑点金免疫渗滤法检测微量结核杆菌膜抗原

目的 采用免疫金银染色法 (IGSS)增强斑点金免疫渗滤法 (DIGFA)的敏感性 ,用于检测微量样本。方法 将IGSS与DIGFA相结合 ,并设计一简易渗滤装置 ,形成银强化斑点金免疫渗滤法 (SEDIGFA)。结果 以测定微量结核杆菌膜抗原为模式进行上述银加强试验 ,SEDIGFA较DIGFA敏感性增强。结论 SEDIGFA可增强微量样本的敏感性 ,且便于实验室制作和推广应用。

胶体金免疫层析法在乙型肝炎病毒表面抗原检测中的应用评价

胶体金免疫技术是20世纪80年代继三大标记技术（荧光素、放射性同位素和酶标记）发展起来的固相标记免疫测定技术，该法优点是可单份测定，简单快速。2005年卫生部门要求所有做胃镜与肠镜的患者检测前必须进行乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测，因时间关系，这部分患者均采用GICA进行。GICA能否取代酶联免疫吸附试验（ELISA），成为至关重要的一个问题，现将两种方法检测HBsAg进行比较，报告如下。

应用金免疫层析技术检测猪瘟抗体的研究

用金标免疫层析技术测试30份标准阳性血清和18份标准阴性血清 ,结果阳性 ,阴性符合率100 %。用该方法与ELISA试剂、dot-ELISA试剂及正向间接血凝进行比对试验检测血清样品205份 ,结果阳性率ELISA为86.8% ,金标层析法为85.4% ,dot-ELISAO81.5% ,正向间接血凝为58.5% ,结果显示该方法特异性强 ,敏感性高 ,操作简单 ,使用方便。既可用血清 ,也可以用全血测猪瘟抗体 ,可广泛应用于猪场和个体养猪户现场检测。

快速检测猪囊虫抗体的金免疫层析法的建立及应用

目的 研制一种简便快速检测囊虫抗体的新方法 ,提供基层单位使用。方法 应用胶体金和免疫层析合成技术进行研究 ,建立检测囊虫抗体的金免疫层析法 ;以ELISA为对照 ,观察GICA法敏感性、特异性和稳定性。结果 每ml胶体金中兔抗猪IgG最适标记量为 30 8μg ,最佳抗原包被浓度为 1mg/ml。建立的GICA法检测囊虫病猪血清均为阳性 ,正常猪及其他疾病猪血清 ,结果均为阴性 ;整个实验仅一步操作 ,检测时间 5～ 15min。同ELISA法比较 ,两种方法检测囊虫抗体的相符率达 96 8% (P >0 0 5 )。GICA试纸条分别在 4℃和室温下保存 10 5d及 37℃保存 4 5d ,检测结果均未发现改变。结论 检测囊虫抗体的GICA法简便、快速、敏感、特异、稳定。

斑点金免疫渗滤法在检测囊虫抗体中的应用

目的 将斑点金免疫渗滤法用于检测囊虫抗体 ,以制备囊虫病诊断试剂盒。方法 经透析的猪囊尾蚴囊液作为检验抗原 ,对 71份囊虫病患者、90份正常人和 2 0份其他病患者血清进行了斑点金免疫渗滤法检测并与酶联免疫吸附法比较。结果 斑点金免疫渗滤法的敏感性为 90 .1% (6 4 / 71) ,特异性为 95 .6 % (86 / 90 ) ,其他病患者血清反应中仅 1例脑肿瘤患者血清阳性 ,其余为阴性。斑点金免疫渗滤法和酶联免疫吸附法的符合率为94 .4 % (15 2 / 16 1)。

滴金免疫测定法(DIGFA)检测血吸虫抗体的研究

目的建立一种简便、快速、敏感、特异的检测血吸虫抗体的新方法。方法用滴金免疫测定法（DIGFA）检测血吸虫病人血清抗体，并以ELISA作平行对照。结果DIGFA和ELISA的敏感性分别为97．1％和95．7％；特异性分别为99．1％和100％，两法无显著差异（P＞0．05）。62份其它寄生虫感染血清，除肺吸虫1例，ELISA呈阳性反应外，其余均为阴性。结论实验结果不仅显示了DIGFA的敏感性和特异性与ELISA相似，而且具有简便、快速、不需要特殊设备等优点，是一种值得推广应用的检测血吸虫抗体的新方法。

斑点金免疫渗滤法检测血清抗精子抗体

目的建立检测血清抗精子抗体的斑点金免疫渗滤法 (dot im munogold filtration assay,DIGFA)。方法 采用经 Sephadex G- 75 -抗人全血清柱亲和层析纯化的人精子抗原和胶体金标记的 SPA,根据免疫渗滤原理 ,建立抗精子抗体(ASAb)的斑点金免疫渗滤法检测法。结果 纯化的人精子抗原具有较好的特异性 ;斑点金免疫渗滤法与 EL ISA法比较 ,符合率为 97.7%。特异性为 96 .2 % (TN/ TN+ FP× 10 0 % ) ,敏感性为 88.9% (TP/ TP+ FN× 10 0 % ) ,阳性预测值 84.2 % (TP/TP+ FP) ,阴性预测值 97.2 % (TN/ TN+ FN) .结论 斑点金免疫渗滤法方法检测血清抗精子抗体有较好的特异性和敏感性 ,重复性好 ,试剂稳定 ,操作简便快速 。

斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留

研究斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留,将制备的金霉素多克隆抗体点在硝酸纤维素膜上,用以竞争捕获胶体金标记的金霉素-牛血清白蛋白结合物和样品中的游离金霉素,通过可见的颜色深浅判断结果。结果表明,本方法的检测限为0.4μg/ml,在金霉素浓度为0.6～1μg/ml范围内可实现定量分析。结果与酶联免疫方法的测定结果一致(相关系数r为0.970)。该法可应用于禽肉中金霉素残留的快速检测。

斑点金免疫渗滤法快速诊断布鲁杆菌病的研究

目的建立一种布鲁杆菌病快速免疫诊断方法。方法以硝酸纤维素膜为载体,胶体金标记蛋白为显示剂,通过最佳实验条件的选择及稳定性、重现性、敏感性、特异性和交叉反应试验,建立斑点金免疫渗滤法(DIGFA)快速检测布鲁杆菌病。结果 DIGFA快速检测布鲁杆菌病具有很好的重现性和稳定性;敏感性、特异性分别达到98％和100％;未发现与肺结核患者、乙肝患者及幽门螺杆菌感染者血清有交叉反应。结论 DIGFA快速检测布鲁杆菌病快速、简便,测试过程1-2 min内完成,试剂敏感、特异、稳定,非常适合布鲁杆菌病的诊断及流行病学调查。

光电传感器在金免疫层析试条定量测试中的应用

着重描述了如何设计特殊的光电传感器,以适应金免疫层析试条定量测试的需要。并将人工神经网络技术应用于该检测装置中,提高了定量检测的精度。

检测肌红蛋白的半定量金免疫层析法的研究

目的建立一种半定量检测人血清肌红蛋白的金免疫层析方法,用于急性心肌梗死的快速检测。方法一株抗人肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金,另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线,兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线,建立半定量金免疫层析测定方法。结果本法测定结果分为3个半定量判定区段：〈70、70-150和〉150μg/L;与化学发光免疫测定对照检测83份血清标本,符合性良好。结论金免疫层析测定法具有半定量的特点,方法简便、快速、准确,适用于急性心肌梗死的早期检测。

斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫病患者血清抗体的研究

目的 建立一种检测华支睾吸虫病血清抗体的简便、快速、敏感和特异的新方法。方法 以华支睾吸虫成虫抗原为包被抗原 ,金标记葡萄球菌A蛋白 (SPA)为显色剂 ,建立检测华支睾吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以dot ELISA作平行对照。结果 DIGFA和dot ELISA分别检测 119例华支睾吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 96 6 %和 92 4% ,两法差异无显著性。DIGFA分别检测正常人血清 40例、囊虫病患者血清 2 0例、日本血吸虫病患者血清 2 5例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 5 %和 4%。DIGFA与dot ELISA两法的符合率达 90 9%。结论 DIGFA的敏感性和特异性与dot ELISA相近 ,且具简便、快速及不需特殊设备等优点 ,是一种检测华支睾吸虫病患者血清抗体的新方法。

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体

目的：建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体．方法：将甲型肝炎抗原固相在硝酸纤维薄膜上，用来捕获血清标本中的ＩｇＭ抗ＨＡＶ，通过胶体金标记抗人ＩｇＭ而显色．斑点色泽鲜艳，结果易于判断．整个试验过程仅需２～４ｍｉｎ．结果：用本法与ＥＬＩＳＡ对比检测血清标本２７９份，两法均阳性１４８份，两法均阴性１２５份，总符合率为９７．８％．阻断试验与２－ＭＥ破坏试验证实其结果是特异的．本试验不需任何仪器设备，不受类风湿因子影响．结论：本方法可用于甲型肝炎的早期诊断和流行病学监测．

滴金免疫测定法在检测日本血吸虫抗体中的应用

滴金免疫测定法(DIGFA)是以胶体金作为标记物的快速斑点免疫结合试验,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应,阳性结果出现红色斑点。本文用血吸虫虫卵浸出液为抗原,金标记A蛋白为显示剂,建立了检测血吸虫抗体的DIG-FA。以本法检测血吸虫病患者血清81份,阳性卒92.6％;献血者血清50份,特异性为98％;42份产前检查的孕妇血清均为阴性;6例华枝睾吸虫患者未出现交叉反应;6例并殖吸虫患者中4例出现不同程度的阳性反应,其中3例环卵反应亦为阳性,环沉率8～15％。提示本法的敏感性和特异性与环卵反应相近。

滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的 建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法 应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果 对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论 DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。

斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体

目的 :建立一种快速测定抗子宫内膜抗体 (antiendometrialantibody ,EMAb)的新方法。 方法 :采用经抗人血清抗体 Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原 (endometriumantigen ,EMAg) ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体 ,根据免疫渗滤原理 ,建立斑点金免疫渗滤法 (Dot immunogoldfiltrationassay ,DIG FA)检测人血清EMAb。共检测 5 86份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验 (ELISA)作对比研究。结果 :纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应 ,8min内即可直接观察结果。在 5 86份血清的检测中 ,阳性率为 36 .8%,与ELISA的结果基本一致 (χ2 =3.45 ,P >0 .0 5 ) ,符合率 95 .0 %。特异性为94.7%,敏感性为 95 .6 %。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论 :DIGFA可快速测定EMAb ,具有推广使用的价值。