Sphk1对SW480和HT-29体外血管生成拟态的影响

目的:观察Sphk1对人结肠癌细胞体外生成VM的影响,并探讨其作用机制。方法:用100 nmol/L PMA处理HT-29、SW480作为2组激活组,用50μmol/L DMS处理SW480作为抑制组;在抑制组内分别加入rhMMP2、rhMMP9作为2组试验组。采用Matrigel三维培养法观察VM形成;MTT检测细胞生长增殖;Transwell观察细胞迁移;RT-PCR检测mRNA表达;Western blot、Elisa检测蛋白表达及分泌。结果:PMA上调Sphk1表达,促进VM表达阴性的HT-29体外形成VM,增强SW480增殖迁移能力,上调MMP2、MMP9的基因与蛋白表达分泌。DMS抑制Sphk1表达,减少SW480体外形成VM,加入rhMMP2、rhMMP9后再次形成VM,减弱SW480增殖迁移能力,下调MMP2、MMP9的基因与蛋白表达分泌。结论:Sphk1可促进结肠癌细胞形成VM,其机制可能通过增强结肠癌细胞的侵袭力并增加MMP2、MMP9的表达与分泌而发挥作用。

姜黄素调节AKT/PI3K活性抑制人膀胱癌T24细胞的增殖和迁移

研究姜黄素对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。培养膀胱癌T24细胞,然后采用不同浓度的姜黄素进行干预。使用CCK8法检测姜黄素处理后T24细胞的存活率,Transwell实验检测其侵袭力。采用western blot检测处理前后T24细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的表达水平以及蛋白激酶B(AKT)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)磷酸化。CCK8结果表明姜黄素能够以浓度和时间依懒性抑制T24细胞的增殖。Transwell结果显示姜黄素能降低膀胱癌T24细胞的迁移能力。姜黄素也能降低T24细胞p-AKT和p-PI3K磷酸化以及MMP2和MMP9蛋白的表达,并且呈浓度依赖性。以上结果表明姜黄素通过抑制AKT/PI3K信号通路降低MMP2和MMP9的表达,从而抑制膀胱癌T24细胞的增殖和迁移。

MMP-2/TIMP-2在妊娠滋养细胞疾病组织中的表达及意义

目的探讨金属基质蛋白酶-明胶酶A(MMP-2)及其抑制剂(TIMP-2)在妊娠滋养细胞疾病发生、发展及预后中的作用。方法采用原位杂交、免疫组化法分别从mRNA、蛋白质水平检测MMP-2/TIMP-2在正常早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中的表达。结果未恶性转化葡萄胎MMP-2低表达,TIMP-2高表达,恶性转化葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒癌中MMP-2表达逐渐增强,TIMP-2表达相反。妊娠滋养细胞肿瘤组与正常绒毛、葡萄胎组相比,MMP-2、TIMP-2的表达均有显著性差异(P<0.01,P<0.001)。结论金属基质蛋白酶的激活与抑制比例失衡在妊娠滋养细胞疾病发展、浸润和转移中起重要作用。

子宫内膜异位症患者血清中SDC-1、sHLA-G及MMP-9表达水平变化及意义

目的：探讨子宫内膜异位症（EMS）患者血清中多配体蛋白聚糖-1（SDC-1）、可溶性人类白细胞抗原-G（sHLA-G）、金属基质酶-9（MMP-9）的表达水平变化及意义。方法：随机选取88例EMS患者（Ⅰ～Ⅱ期及Ⅲ～Ⅳ期各44例）,采用ELISA法检测血清中SDC-1、sHLA-G、MMP-9的表达水平,同时与35例同期健康体检的妇女对比。结果：SDC-1、sHLA-G、MMP-9在EMS患者血清中的表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;Ⅲ～Ⅳ期EMS患者血清中SDC-1、sHLA-G、MMP-9的表达水平均高于Ⅰ～Ⅱ期,差异有统计学意义（P〈0.01）;EMS组SDC-1和MMP-9之间呈正相关（r=0.683,P〈0.05）;sHLA-G与MMP-9之间呈正相关（r=0.456,P〈0.05）;三者联合检测诊断EMS的敏感度、特异性分别为93.18%、94.28%。结论：SDC-1、sHLA-G、MMP-9可能在EMS的发生、发展过程发挥重要作用;联合检测SDC-1、sHLA-G、MMP-9有望成为EMS的无创诊断的新指标。

E-cad、EGFR、MMP9与肺癌转移的关系

目的:探讨原发性非小细胞肺癌(NSCLC)组织中E-钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth FactorReceptor,EGFR)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP9)的表达与术后复发及转移的关系。方法:选择临床IB期非小细胞肺癌患者的手术切除标本,其中36例于36个月之内发生复发或转移,30例术后无病生存期超过36个月。采用免疫组织化学方法检测组织中E-cad、EGFR、MMP9的表达情况。结果:36例早转移IB期非小细胞肺癌术后患者的手术标本中,E-cad的异常表达率、EGFR及MMP9的阳性表达率,均明显高于30例非早转移IB期非小细胞肺癌术后患者(P<0.05),且在早转移IB期NSCLC中,三者的表达与病理分级、肿瘤大小有关(P<0.05),与病理类型,肿瘤是否浸润胸膜无关(P>0.05)。结论:对早期肺癌术后病人,检测E-cad、EGFR、MMP9的表达,对判断其恶性程度,提示肿瘤的复发及转移倾向大小,决定术后治疗方案有重要意义。

木犀草素对食管癌TE-1细胞增殖和迁移的影响

目的探讨木犀草素对食管癌TE-1细胞增殖和侵袭功能的影响及其作用机制。方法培养食管癌TE-1细胞,使用不同浓度的木犀草素干预。采用噻唑蓝(MTT)法检测木犀草素处理后TE-1细胞的活性,采用Transwell实验检测TE-1细胞的侵袭力。采用蛋白印记检测TE-1细胞中基质金属蛋白酶2和MMP9的表达水平及蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平变化情况。结果 MTT实验证明木犀草素具有抑制TE-1细胞的活性。Transwell实验证明木犀草素能减少TE-1细胞的迁移能力。木犀草素能降低TE-1细胞表达基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9,同时能够抑制蛋白激酶B(AKT)的磷酸化。结论木犀草素通过抑制AKT磷酸化,减少MMP2和MMP9的表达,从而抑制食管癌TE-1的活性和侵袭。