冠状动脉病变与白细胞介素-6受体及金属肽酶含血小板反应蛋白基元-1的相关性

目的探讨冠状动脉病变程度与外周血白细胞介素-6受体(IL-6R)和金属肽酶含血小板反应蛋白基元-1(ADAMTS-1)相关性。方法以272例冠心病患者为研究对象,包括急性心肌梗死(AMI)105例、不稳定型心绞痛(UA)126例、稳定型心绞痛(SA)41例,其中单支病变120例,双支病变72例,多支病变80例;选取冠状动脉粥样斑块72例,冠状动脉无狭窄56例为对照组。采用ELISA法检测术前外周血IL-6R、ADAMTS-1水平,并测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)指标。结果冠心病患者血清IL-6R、ADAMTS-1水平显著高于冠状动脉粥样斑块组、对照组(P<0.05),且AMI、UA患者血清IL-6R、ADAMTS-1水平显著高于SA(P<0.05);冠状动脉粥样斑块组血清IL-6R、ADAMTS-1水平与对照组相比无显著性差异(P>0.05);多支病变、双支病变及单支病变组间无显著性差异(P>0.05)。结论 IL-6R、ADAMTS-1对冠心病具有预测价值,与冠心病血管病变支数无关。

血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5在创伤性骨关节炎早期软骨细胞凋亡中作用机制

目的探究血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5(ADAMTS-5)基因对小鼠创伤性骨关节炎(PTOA)早期软骨细胞凋亡的影响及其具体的作用机制。方法分别随机选择3只8周龄转基因雌性C57BL/6小鼠(实验组),3只8周龄普通雌性C57BL/6小鼠(对照组),构建小鼠双侧膝关节骨折PTOA模型,术后4周取样。采用番红O染色、Mankin评分评估软骨损伤情况,通过TUNEL染色、免疫荧光染色检测软骨细胞凋亡情况,以明确ADAMTS-5对PTOA早期软骨细胞凋亡的影响。此外,利用ADAMTS-5体外转染ATDC5小鼠成软骨细胞系,通过干扰及过表达慢病毒转染方法构建过表达稳转株组、过表达对照组、干扰稳转株组、干扰对照组。采用MTT法检测软骨细胞增殖情况,通过免疫荧光染色观察ADAMTS-5、Caspase-9蛋白的表达情况,以明确ADAMTS-5影响软骨细胞凋亡的分子机制。结果番红O染色及Mankin评分显示,相较于对照组,实验组小鼠在骨折部位的软骨损伤较轻;TUNEL染色显示,相较于对照组,实验组绿色荧光染色更弱、数量更少;免疫荧光染色显示,相较于对照组,实验组Caspase蛋白红染更弱、数量更少。MTT法显示,第72 h时,与干扰稳转株组及过表达稳转株组相比,干扰对照组及过表达对照组光密度(OD)值显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色显示,过表达稳转株组与干扰稳转株组的ADAMTS-5及Caspase-9蛋白表达明显高于过表达对照组及干扰对照组,即随着ADAMTS-5基因的表达,Caspase-9蛋白的含量逐渐增加,最终促使软骨细胞发生凋亡。结论ADAMTS-5对小鼠PTOA早期软骨细胞凋亡具有促进作用,其可通过促进Caspase-9蛋白的生成加速软骨细胞发生凋亡。

含血小板反应蛋白18型基序的解聚素样金属蛋白酶在肝细胞癌中的表达及其生物学功能

目的探讨含血小板反应蛋白18型基序的解聚素样金属蛋白酶(ADAMTS18)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其对HCC细胞迁移、侵袭功能的影响。方法免疫组化染色法检测50对HCC及癌旁组织中ADAMTS18表达。分析ADAMTS18表达与患者临床特征的相关性。通过转染ADAMTS18过表达质粒提高Huh-7细胞内ADAMTS18的表达水平,Transwell小室模型检测过表达ADAMTS18对Huh-7细胞迁移和侵袭的影响,蛋白质免疫印迹检测过表达ADAMTS18对Huh-7细胞内蛋白激酶B(AKT)磷酸化及E-cadherin表达的影响。结果ADAMTS18在HCC组织中的表达水平显著降低(P=0.003);ADAMTS18低表达与HCC血管侵犯(P=0.018)及TNM分期(P=0.038)密切相关。过表达ADAMTS18抑制Huh-7细胞迁移(P=0.038)、侵袭(P=0.027)和AKT磷酸化(P=0.047),但促进了E-cadherin表达(P=0.032)。结论ADAMTS18低表达与HCC恶性临床特征密切相关,ADAMTS18可能通过抑制AKT的磷酸化而发挥抗HCC细胞迁移侵袭作用。

含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素样金属蛋白酶9基因rs6795735多态性与血糖表型的相关性及性别差异的研究

目的研究含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素样金属蛋白酶9(ADAMTS9)基因rs6795735多态性与血糖表型的相关性,并分析是否存在性别差异。方法选取北京市2030名7～18岁中小学生,分为肥胖组(n=705)和非肥胖组(n=1325),采用基质支持的激光释放/电离飞行时间质谱分析法检测rs6795735多态性。在显性模型下,采用Logistic回归及多元线性回归分析rs6795735与IFG及血糖表型的相关性。结果rs6795735多态性与IFG相关[OR(95%CI)1. 38(1. 11～1. 71),P=0. 004],与FPG无相关性。按性别分层分析显示,rs6795735与IFG、FPG仅在女性中存在相关性[OR(95%CI)1. 61(1. 14～2. 28),P=0. 007;β(SE)=0. 056(0. 028),P=0. 048],在男性中未发现相关性。结论 ADAMTS9基因rs6795735多态性与IFG、FPG相关,且存在性别差异。在女性中,rs6795735 C等位基因携带者与非携带者比较,FPG水平升高,发生IFG的风险增加。

血管性血友病因子裂解酶间隔区结构域突变对酶生物学功能的影响

目的:探讨血管性血友病因子裂解酶ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1型13(ADAMTS13)间隔区结构域在血管性血友病因子(vWF)裂解过程中的生物学功能,阐明ADAMTS13在血栓性血小板减少性紫癜(TTP)发病机制中的作用。方法:将ADAMTS13间隔区结构域中的氨基酸残基TEDRLPR以点突变技术逐个基因突变(突变体M1~M7),将构建的ADAMTS13与其突变体质粒转染至人胚肾HEK293细胞,稳定表达后提纯重组蛋白。观察野生型和突变型ADAMTS13在变性条件、剪切应力作用和ADAMTS13抗体处理后裂解vWF的能力。结果:荧光共振能量转移(FRET)实验,与野生型ADAMTS13比较,ADAMTS13突变体M4(R635A)和突变体M7(R638A)对FRET-vWF73剪切能力降低(P<0.05)。变性条件下,野生型ADAMTS13可以将vWF多聚体裂解,与野生型ADAMTS13比较,ADAMTS13突变体M4(R635A)和突变体M7(R638A)的裂解活性明显降低(P<0.01)。在体外剪切应力作用下,与野生型ADAMTS13比较,ADAMTS13突变体M4(R635A)和突变体M7(R638A)裂解vWF多聚体的能力明显降低(P<0.01)。与野生型ADAMTS13比较,ADAMTS13突变体M4(R635A)和突变体M7(R638A)与vWF之间的结合力差异无统计学意义(P>0.05),表明ADAMTS13的C末端与vWF之间存在多个结合位点。ADAMTS13抗体处理可在一定程度上抑制野生型和突变型ADAMTS13裂解vWF的能力。结论:间隔区突变后ADAMTS13的活性降低。ADAMTS13突变体M4(R635A)和突变体M7(R638A)可能是ADAMTS13在底物识别时的重要作用位点。

血清ANXA2、ADAMTS4水平与短暂性脑缺血发作患者颈动脉斑块性质的关系

目的探讨血清膜联蛋白A2(ANXA2)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)水平与短暂性脑缺血发作(TIA)患者颈动脉斑块性质的关系。方法选择TIA患者156例(观察组)、同期体检健康的志愿者78例(对照组),采集所有研究对象外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清ANXA2、ADAMTS4。TIA患者入院后接受颈动脉血管超声检查,由两名经验丰富的影像科医师评估颈动脉斑块形成及稳定性。采用多因素Logistic回归模型分析TIA患者颈动脉斑块不稳定的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ANXA2、ADAMTS4水平对TIA患者颈动脉斑块不稳定的预测价值。结果观察组血清ANXA2、ADAMTS4水平均高于对照组(t分别为16.636、25.358,P均<0.05)。颈动脉血管超声检查发现,TIA患者颈动脉斑块不稳定者76例、颈动脉斑块稳定或无颈动脉斑块者80例,颈动脉斑块不稳定的发生率为48.72%(76/156)。单因素分析发现,TIA患者颈动脉斑块不稳定与年龄、吸烟、饮酒、合并高血压、卒中风险及血清ANXA2、ADAMTS4水平有关(P均<0.05);多因素Logistic回归分析显示,吸烟、饮酒、卒中风险增加以及血清ANXA2、ADAMTS4水平升高为TIA患者颈动脉斑块不稳定的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清ANXA2、ADAMTS4水平单独和联合预测TIA患者颈动脉斑块不稳定的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.780、0.874,血清ANXA2、ADAMTS4水平联合预测TIA患者颈动脉斑块不稳定的AUC大于二者单独(Z分别为3.151、3.326,P均<0.05)。结论血清ANXA2、ADAMTS4水平升高是导致TIA患者颈动脉斑块不稳定的独立危险因素;血清ANXA2、ADAMTS4水平对TIA患者颈动脉斑块不稳定均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。

H型高血压患者血清DcR3、ADAMTS13浓度与其心血管功能及预后的关系

目的探究H型原发性高血压(高血压)患者血清诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)、含1型血小板反应蛋白基序的去整合素金属蛋白酶13(A disintegrin and metalloproteinase with A thrombospondin type 1 motif member 13,ADAMTS13)浓度与其心血管功能及预后的关系。方法选取大庆市人民医院2020年6月至2022年6月收治的132例高血压患者作为观察对象,根据同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)浓度分为非H型高血压组40例和H型高血压组92例,根据预后情况将H型高血压患者分为预后良好组和预后不良组,并选择同期来大庆市人民医院健康体检的成年人70名作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测受试者血清中DcR3、ADAMTS13浓度,Pearson法分析血清中DcR3、ADAMTS13浓度与心血管功能指标的相关性,多因素Logistic回归分析H型高血压患者1年预后不良的影响因素。绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清DcR3、ADAMTS13浓度对H型高血压患者1年预后不良的预测价值。结果与对照组[(122.28±32.34)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)、(48.16±8.65)mmHg、(8.59±1.25)mm、(118.34±34.25)g/m2、(1.48±0.34)g/L、(57.15±14.94)mg/L、(1.45±0.31)、70.28%±15.21%]比较,H型高血压组患者的收缩压[(139.35±38.21)mmHg]、脉压[(57.37±11.75)mmHg]、左心室后壁厚度(posterior wall thickness,PWT)[(11.69±2.00)mm]以及左心室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)[(148.54±38.22)g/m2]显著升高,DcR3[(0.74±0.19)g/L]、ADAMTS13浓度[(14.13±4.62)mg/L]、二尖瓣舒张早期血流峰值/二尖瓣舒张晚期血流峰值(E-peak to A-peak of the mitral flow spectrum,E/A)(0.65±0.13)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)(64.26%±12.75%)显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与非H型高血压组患者组比较,H型高血压组患者的DcR3、ADAMTS13浓度及E/A显著降低,LVMI显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。H型高血压组患者血清中DcR3、ADAMTS13浓度均与收缩压、脉压和LVMI呈负相关(P<0.05),而与E/A、LVEF呈正相关(P<0.05)。预后不良组患者的年龄显著高于预后良好组,E/A(0.38±0.07)、DcR3[(0.45±0.13)g/L]、ADAMTS13浓度[(8.45±2.11)mg/L]显著低于预后良好组[0.75±0.11、(0.85±0.27)g/L、(16.25±4.85)mg/L],差异有统计学意义(P<0.05)。DcR3、ADAMTS13是H型高血压患者预后不良的保护因素(P<0.05)。血清DcR3、ADAMTS13浓度单独及二者联合预测H型高血压患者1年发生预后不良的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.906、0.844、0.950。结论H型高血压疾病患者血清DcR3、ADAMTS13浓度降低,与心血管功能及预后密切相关,对该疾病的预后评估有重要价值。

冠心病患者血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平及其临床意义

目的探讨冠心病患者血清可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、金属肽酶含血小板反应蛋白元(ADAMTS)9、甘露糖结合凝集素2(MBL2)水平及其临床意义。方法选取2018年1月至2019年6月该院收治的冠心病患者120例为观察组。同期选取该院的体检健康者100例为对照组。根据冠状动脉狭窄程度(Gensini积分)评分标准将冠心病患者分为轻度狭窄组(<60分,35例)、中度狭窄组(60~120分,52例)、重度狭窄组(>120分,33例)。采用酶联免疫吸附试验检测血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平,分析血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平与Gensini评分的相关性。随访2年,根据主要不良心血管事件发生情况将患者分为预后良好组(81例)和预后不良组(39例)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2对患者预后不良的预测价值。结果与对照组比较,观察组血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平升高(P<0.05)。重度狭窄组血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平高于中度狭窄组、轻度狭窄组,中度狭窄组血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平高于轻度狭窄组(P<0.05)。预后不良组血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平与Gensini评分均呈正相关(r=0.510、0.439、0.447,均P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2及三者联合预测冠心病患者预后不良的曲线下面积分别为0.801(95%CI 0.692~0.909)、0.785(95%CI 0.681~0.889)、0.814(95%CI 0.708~0.919)、0.909(95%CI 0.842~0.976)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平升高是影响冠心病患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论冠心病患者血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平明显升高,并与患者的病情严重程度及临床预后密切相关,联合检测血清sTREM-1、ADAMTS9、MBL2水平对评估冠心病患者的临床预后有较高参考价值。

miR-181a-5p在ACS患者血清中表达及对人HCASMC细胞增殖迁移的调控作用、与ADAMTS1靶向关系

目的观察微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)在急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清中的表达及对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)增殖和迁移的调控作用,探讨miR-181a-5p与血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1(ADAMTS1)的靶向关系。方法采集100例ACS患者[ACS组,其中急性心肌梗死(AMI)患者55例、不稳定心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)患者44例]、40例冠脉造影结果阴性者(对照组)的外周静脉血,采用实时荧光定量PCR法检测两组血清miR-181a-5p。取对数生长期HCASMC细胞,分为一、二、三、四组,采用脂质体转染法分别转染miR-181a-5p模拟物(miR-181a-5p mimics)、模拟物阴性对照(mimics-NC)、miR-181a-5p抑制物(miR-181a-5p inhibitor)及抑制物阴性对照(inhibitor-NC),培养48 h时采用CCK-8法测算细胞增殖能力、采用Transwell迁移实验测算细胞迁移能力,培养24 h时采用采用Western Blotting法检测各组细胞ADAMTS1蛋白。取对数生长期HCASMC细胞分为A、B、C、D四组,A组先后转染突变型ADAMTS1荧光素酶报告基因质粒(ADAMTS1-MUT)、miR-181a-5p mimics;B组先后转染ADAMTS1-MUT、mimics-NC;C组先后转染野生型ADAMTS1荧光素酶报告基因质粒(ADAMTS1-WT)、miR-181a-5p mimics;D组先后转染ADAMTS1-WT、mimics-NC,培养24 h时取各组细胞采用双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞相对荧光素酶活性。结果与对照组相比,ACS组患者血清miR-181a-5p相对表达量低(P<0.01);与UAP患者相比,AMI患者血清miR-181a-5p相对表达量低(P<0.01)。与二组相比,培养48 h时一组细胞增殖能力和迁移能力降低,培养24 h时一组细胞ADAMTS1蛋白相对表达量低(P均<0.01);与四组相比,培养48 h时三组细胞增殖能力和迁移能力高,培养24 h时三组细胞ADAMTS1蛋白相对表达量高(P均<0.01)。A、B、C、D组细胞荧光素酶活性分别为1.03±0.03、1.01±0.04、0.45±0.06、1.02±0.05;与B组相比,A组细胞荧光素酶活性明显低(P<0.05)。结论miR-181a-5p在ACS患者血清中低表达。miR-181a-5p可抑制HCASMC细胞的增殖、迁移,其机制可能为miR-181a-5p靶向促进细胞ADAMTS1蛋白表达。

心脏超声造影联合血清ADAMTS-4、OPG评估冠心病病人冠状动脉病变程度的临床价值

目的:探讨心脏超声造影联合血清血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4(ADAMTS-4)、骨保护素(OPG)评估冠心病病人冠状动脉病变程度的临床价值。方法:选取2019年10月—2022年10月四川绵阳四0四医院收治的90例冠心病病人作为研究对象,根据Gensini评分将病人分为重度病变组(30例)、中度病变组(28例)、轻度病变组(32例),均行心脏超声造影检查及血清ADAMTS-4、OPG检测。比较3组心脏超声造影定量参数(A值、β值)及血清ADAMTS-4、OPG检测值;采用Pearson相关性分析心脏超声造影定量参数及血清ADAMTS-4、OPG水平与Gensini评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估心脏超声造影定量参数及血清ADAMTS-4、OPG水平对重度冠状动脉病变的评估效能。结果:中度病变组、重度病变组心脏超声造影定量参数A值、β值低于轻度病变组,血清ADAMTS-4、OPG水平高于轻度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度病变组心脏超声造影定量参数A值、β值低于中度病变组,血清ADAMTS-4、OPG水平高于中度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,心脏超声造影A值、β值与Gensini评分均呈负相关(P<0.05),血清ADAMTS-4、OPG水平与Gensini评分均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,A值、β值及血清ADAMTS-4、OPG单独诊断重度冠状动脉病变的最佳截断值分别为3.38、0.30、107.57 ng/mL、0.20 ng/mL,对应的曲线下面积(AUC)分别为0.797,0.883,0.895,0.680,4项指标联合诊断的AUC为0.937。结论:心脏超声造影定量参数A值、β值及血清ADAMTS-4、OPG与冠心病病人冠状动脉病变程度存在相关性,联合检测在重度冠状动脉病变的评估中具有较高的应用价值。

冠状动脉内血管性血友病因子裂解蛋白酶活性和全球急性冠状动脉事件注册评分对急诊经皮冠脉介入术治疗ST段抬高型心肌梗死病人住院期间主要心血管不良事件的预测价值

目的 探讨冠状动脉内血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)活性和全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)行急诊经皮冠脉介入术(PCI)的病人住院期间主要心血管不良事件(MACE)的预测价值。方法 选取2019年10月至2021年6月在潍坊医学院附属医院住院的162例STEMI接受急诊PCI治疗的病人,根据住院期间是否发生MACE,分为MACE组(38例)和无MACE组(124例)。记录两组病人的重要临床特征、GRACE评分。采用荧光共振能量转换法(FRETS-VWF73)分别测定两组病人急诊PCI术前外周血和冠脉内的ADAMTS13活性。四格表χ~2检验及独立样本t检验比较两组病人的重要临床特征、GRACE评分。Pearson相关性分析探讨ADAMTS13活性与GRACE评分的相关性。多因素logistic回归分析MACE的独立危险因素。应用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析冠脉内ADAMTS13活性、GRACE评分以及联合诊断对MACE的预测效能。结果 两组比较,MACE组病人糖尿病史、吸烟史更多,年龄较大、外周血血小板计数更低、凝血酶原时间(PT)更长、N端脑钠肽前体(NT-proBNP)和肌钙蛋白I(cTnI)更高(P<0.05);MACE组病人GRACE评分更高[(187.26±35.50)分比(153.87±32.95)分,P<0.001],术前外周血[(59.01±4.56)%比(63.86±5.75)%]和冠脉内[(46.37±5.43)%比(54.26±5.70)%]的ADAMTS13活性更低(均P<0.001)。术前冠脉内ADAMTS13活性与GRACE评分中等强度负相关(r=-0.40,P<0.001),而外周血ADAMTS13活性与GRACE评分无明显相关性(r=-0.08,P=0.457)。多因素logistic回归分析,糖尿病史和GRACE评分为MACE的独立危险因素[OR=2.513,95%CI:(2.045,3.381),P=0.007;OR=1.089,95%CI:(1.033,1.147),P=0.001],术前冠脉内ADAMTS13活性是MACE的保护性因素[OR=0.568,95%CI:(0.429,0.753),P=0.001]。术前冠脉内ADAMTS13活性、GRACE评分诊断MACE的AUC及其95%CI分别为0.833(0.735,0.932)和0.746(0.624,0.867),截断值分别为50.95%和158.50分,联合诊断的AUC为0.893(0.824,0.962)。结论 GRACE评分增高、术前冠脉内ADAMTS13活性降低均是接受急诊PCI治疗的STEMI病人住院期间MACE的独立危险因素,二者联合诊断的预测价值更高。

内脂素上调ADAMTS-4表达增加动脉粥样硬化斑块易损性的研究

目的:探讨内脂素对冠状动脉粥样硬化(AS)斑块易损性的影响。方法:入选中日友好医院心脏科2016年1月—2017年1月间60例ST段抬高性心肌梗死(STEMI)患者,收集患者外周动脉(桡动脉或股动脉)的血样和本次导致STEMI发生的冠状动脉罪犯病变局部血样,比较外周动脉与冠状动脉罪犯病变局部内脂素及血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4(ADAMTS-4)的表达水平,并对两者的表达水平行相关性分析,进而通过体外细胞试验在mRNA及蛋白水平上观察内脂素对巨噬细胞中ADAMTS-4表达的作用。结果:冠状动脉罪犯病变局部内脂素及ADAMTS-4水平高于外周动脉(内脂素:15.13±6.30ng/ml vs.9.20±4.13ng/ml,P<0.001;ADAMTS-4:101.27±9.56ng/ml vs 74.36±12.43ng/ml,P<0.001),同时,冠状动脉罪犯病变局部内脂素及ADAMTS-4的表达水平成正相关(R2=0.86,P<0.001)。体外实验证实,内脂素呈时间和浓度依赖性地上调ADAMTS-4mRNA及蛋白水平的表达。结论:内脂素通过促进AS斑块内巨噬细胞ADAMTS-4的表达从而导致斑块易损性的增加。

颈动脉超声造影联合血清ADAMTS-1、HMGB1对冠心病颈动脉斑块性质的预测价值

目的探讨颈动脉超声造影(CEUS)联合血清金属肽酶含血小板反应蛋白1(ADAMTS-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对冠心病颈动脉斑块(CAP)性质的预测价值。方法收集冠心病患者84例,采用二维超声检查对CAP性质进行评价,记录CAP及易损斑块、稳定斑块病例数。对患者进行颈动脉CEUS检查,获得CEUS参数,包括达峰时间(TP)、最大峰值强度比(Peak)、曲线下面积(AUC)。取患者外周静脉血,ELISA法检测血清ADAMTS-1、HMGB1,生化分析仪检测血脂水平,包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。比较CAP稳定斑块与易损斑块冠心病患者的临床资料,取有统计学差异的临床资料进一步纳入多因素Logistic回归,分析冠心病患者CAP易损斑块发生的影响因素。采用Pearson相关性分析冠心病CAP易损斑块患者CEUS参数与血清ADAMTS-1、HMGB1的相关性以及血脂水平与CEUS参数、血清ADAMTS-1、HMGB1水平的相关性,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CEUS参数、血清ADAMTS-1、血清HMGB1对CAP易损斑块的预测价值。结果84例冠心病患者中存在CAP 77例,其中CAP稳定斑块30例、易损斑块47例。CAP易损斑块冠心病患者年龄≥60岁比例、TG、LDL-C、Peak、AUC及血清ADAMTS-1、HMGB1均高于CAP稳定斑块冠心病患者,TP低于CAP稳定斑块冠心病患者(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、TG、LDL-C、TP、Peak、AUC及血清ADAMTS-1、HMGB1均为冠心病患者CAP易损斑块发生的影响因素(P均<0.05)。冠心病CAP易损斑块患者血清ADAMTS-1、HMGB1与TP呈负相关关系,与Peak、AUC呈正相关关系(P均<0.01)。冠心病CAP易损斑块患者TG、LDL-C与TP呈负相关关系,与Peak、AUC、血清ADAMTS-1、血清HMGB1呈正相关关系(P均<0.01)。ROC曲线分析结果显示,CEUS参数TP、Peak、AUC及血清ADAMTS-1、血清HMGB1预测冠心病CAP易损斑块的AUC依次为0.821、0.783、0.840、0.792、0.834,颈动脉CEUS参数及血清ADAMTS-1、HMGB1联合预测冠心病CAP易损斑块的AUC为0.967。结论颈动脉CEUS联合血清ADAMTS-1、HMGB1对冠心病CAP性质具有一定的预测价值,这可能与其和血脂水平相关有关。

依达拉奉右莰醇注射液治疗急性缺血性脑卒中的效果

目的探究依达拉奉右莰醇注射液治疗急性缺血性脑卒中(AIS)的临床效果及安全性。方法以2020年10至2022年2月郑州市第一人民医院收治的113例AIS患者(发病48 h内入院)为研究对象,采用随机数字表法分为常规组(56例)、研究组(57例)。常规组接受常规治疗,研究组加用依达拉奉右莰醇注射液静脉滴注。比较两组临床疗效、治疗前及治疗14 d后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、Rankin修订量表(mRS)评分、大脑中动脉血流参数[平均血流速度(V_(m))、流速峰值(V_(s))、舒张末期流速(V_(d))]、血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)、金属肽酶含血小板反应蛋白基元-1(ADAMTS-1)、Sestrin-2蛋白水平及不良反应发生率。结果研究组临床总有效率(94.74%)高于常规组(80.36%)(P<0.05);治疗14 d后,研究组NIHSS、mRS评分低于常规组(P<0.05);治疗14 d后,研究组V_(m)、V_(s)、V_(d)高于常规组(P<0.05);治疗14 d后,研究组血清hs-CRP、IL-1β、ADAMTS-1、Sestrin-2水平低于常规组(P<0.05);研究组不良反应发生率(8.77%)与常规组(5.36%)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论依达拉奉右莰醇注射液辅助治疗AIS可有效抑制炎症因子表达,降低氧化应激反应,促进神经功能、脑循环改善,降低致残程度,提高日常生活能力,临床效果较好。

阿加曲班联合乌司他丁对急性缺血性脑卒中病人血清Lp-PLA2和ADAMTS-1水平的影响

目的探讨阿加曲班联合乌司他丁治疗急性缺血性脑卒中病人的疗效及对血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)和金属肽酶含血小板反应蛋白元-1(ADAMTS-1)水平的影响。方法选取2016年6月至2018年1月在本院就诊的急性缺血性脑卒中病人90例,按随机数字表法分为观察组和对照组,每组各45例,对照组给予阿加曲班治疗,观察组在对照组的基础上联合乌司他丁治疗。治疗7 d后,观察并比较2组病人的疗效、炎性因子以及Lp-PLA2、ADAMTS-1水平,并观察不良反应发生情况。结果治疗前,2组病人的NIHSS、日常生活活动能力(ADL)评分,IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP、人基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Lp-PLA2、ADAMTS-1水平差异均无统计学意义(P> 0. 05)。治疗后,2组病人的NIHSS评分均显著下降,且观察组下降更显著;ADL评分均显著升高,且观察组升高更显著,差异均有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01)。治疗后,2组病人的IL-6、IL-8、hs-CRP、TNF-α和MMP-9、Lp-PLA2、ADAMTS-1水平均显著下降,且观察组下降更加显著,差异均有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01)。2组病人均未发生严重的不良反应。结论阿加曲班联合乌司他丁治疗急性缺血性脑卒中病人的疗效较好,可调节体内的炎性反应,降低Lp-PLA2、ADAMTS-1水平,改善预后,在临床上可广泛使用。

乳酸链球菌素对腹泻小鼠盲肠菌群结构及脂代谢的影响

本试验旨在研究乳酸链球菌素(Nisin)对腹泻小鼠盲肠菌群结构和脂代谢的影响。选择7~9周龄无特定病原体(SPF)级50只小鼠(雌雄各占1/2),随机分成5组,分别为空白对照组、阴性对照组、环丙沙星组、氨苄青霉素组及Nisin组。除空白对照组小鼠腹腔注射等量灭菌生理盐水外,其余各组小鼠连续3 d腹腔注射致病性大肠杆菌(E.coli)O1悬液(2.50×1011CFU/mL)0.2 mL/只构建小鼠腹泻模型。连续注射3 d后,空白对照组和阴性对照组灌胃灭菌生理盐水,其他组灌胃对应物质,每天2次,每次0.3 mL,连续灌胃15 d。第15天灌胃2 h后采样,采用高通量测序技术对小鼠盲肠内容物中细菌结构测序分析,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法对小鼠血清、空肠、回肠和脑组织中金属肽酶含血小板反应蛋白1(ADAMTS1)、总胆固醇(TC)和胰岛素(INS)的含量进行检测。结果显示:与阴性对照组相比,Nisin使小鼠血清、回肠和脑组织中ADAMTS1的含量和回肠中INS的含量显著降低(P<0.05),血清、空肠和脑组织中TC的含量显著增加(P<0.05),并使小鼠各阶段的体重显著增加(P<0.05)。Nisin组小鼠盲肠菌群丰富度最高(ACE指数=2 469.54、Chao1指数=3 340.29)且多样性最高(Shannon指数=7.56),而阴性对照组则最低。Nisin组中疣微菌门(Verrucomicrobia)、蓝细菌门(Cyanobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)及厚壁菌门(Firmicutes)为优势菌门。阴性对照组中放线菌门(Actinobacteria)、芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)、变形菌门(Proteobacteria)及拟杆菌门为优势菌门。由此得出,Nisin可提高盲肠菌群多样性,降低血清、回肠和脑组织中ADAMTS1的含量和回肠中INS的含量,增加血清、空肠和脑组织中TC的含量,从而影响腹泻小鼠盲肠菌群结构及脂代谢。

急性冠状动脉综合征患者OX-LDL、ADAMTS-1及hs-CRP的观察

目的探讨金属肽酶含血小板反应蛋白元-1(metal peptidase containing platelet reactive protein-1,ADAMTS-1)、氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,OX-LDL)和高敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)水平对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者诊断价值。方法选取经冠状动脉造影检查确诊为冠心病组208例,其中不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)组87例,急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)组90例,稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)组31例;选取冠状动脉造影证实冠状动脉无狭窄病变48例为对照组。采集研究对象入院24小时内静脉血,检测OX-LDL、ADAMTS-1、hs-CRP、低密度脂蛋白(low densith lipoprotein,LDL)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)指标。结果 ACS组患者外周血清中ADAMTS-1、hs-CRP、OX-LDL水平与对照组比较,明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);AMI组OX-LDL、ADAMTS-1、hs-CRP显著高于UAP、SAP组,差异有统计学意义(P<0.05);UAP组hs-CRP、OX-LDL、ADAMTS-1显著高于SAP组,差异有统计学意义(P<0.05)。ACS组患者ADAMTS-1的敏感性高于OX-LDL、hs-CRP;hs-CRP特异性高于OX-LDL、ADAMTS-1。结论联合检测OX-LDL、ADAMTS-1、hs-CRP有助于对ACS的诊断。

基于ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22和CD62p急性A型主动脉夹层患者预后列线图预测模型的建立与评价

目的探讨金属肽酶含血小板反应蛋白元1(ADAMTS1)、ADAMTS4、miR-22和P选择素(CD62p)与急性A型主动脉夹层(ATAAD)预后的关系,并建立列线图预测模型。方法选取2018年5月—2022年5月收治的ATAAD 228例为观察组,另选取同期体检健康者76例为对照组。比较2组ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22和CD62p水平,统计ATAAD患者生存及死亡情况,并比较生存、死亡患者的相关资料,采用多因素Logistic回归分析ATAAD患者预后的影响因素,建立ATAAD患者预后的列线图模型并以校准曲线验证,绘制ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22和CD62p评估ATAAD患者预后的决策曲线并进行分析。结果观察组ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22和CD62p水平均高于对照组(P<0.01)。228例ATAAD死亡41例(17.98%)。高血压病、年龄高、体外循环时间长及ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22、CD62p水平高是ATAAD患者死亡的独立危险因素(P<0.05,P<0.01);列线图预测模型预测值与实际结果几乎相同,校准曲线接近理想参考线,一致性指数为0.803,精准度、区分度较好。ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22及CD62p联合检测对ATAAD患者预后的评估价值优于单独检测。结论ATAAD患者ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22和CD62p水平均呈高表达,且ADAMTS1、ADAMTS4、miR-22和CD62p同时高表达表明ATAAD患者预后较差,可作为临床评估患者预后的辅助性指标。

ADAMTS7基因表达水平对神经胶质瘤患者预后作用及临床病理特征的关联性探讨

目的探讨血小板反应蛋白提取整合素金属肽酶7(ADAMTS7)基因表达水平对神经胶质瘤患者预后作用及临床病理特征的关联性。方法在中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库(http://www.cgga.org.cn)下载mRNAseq 693和mRNAseq 325两个转录组测序数据集,以mRNAseq 693作为探索数据集,mRNAseq 325作为验证数据集。提取数据集病例的ADAMTS7基因表达量,以ADAMTS7的中位值作为截断阈值将患者分为高表达组和低表达组。分析ADAMTS7基因表达水平与患者临床病理特征的关联性及对患者生存预后的影响,并以美国癌症基因组图谱数据库(TCGA)胶质瘤队列作为外部数据集再次验证ADAMTS7基因表达水平与胶质瘤患者预后的关系。结果无论是在探索数据集还是在验证数据集中,ADAMTS7基因高表达组与低表达组在发生状态、组织学类型、WHO分级、化疗状态、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变状态和1号染色体短臂和19号染色体长臂(1p19q)共缺失状态方面比较差异均有统计学意义(P<0.05)。对于探索数据集,多因素Cox回归分析结果显示,较高的ADAMTS7基因表达水平、疾病复发、WHO分级为Ⅳ级和年龄>43岁是影响患者术后生存预后的危险因素,而接受化疗、IDH突变和1p19q共缺失是影响患者术后生存预后的保护因素(P<0.05)。对于验证数据集,多因素Cox回归分析结果显示,较高的ADAMTS7基因表达水平、疾病复发、WHO分级为Ⅳ级是影响患者术后生存预后的危险因素,而组织学类型为多形胶质母细胞瘤(GBM)、接受化疗和1p19q共缺失是影响患者术后生存预后的保护因素(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,无论是对于探索数据集还是验证数据集,ADAMTS7基因低表达组的术后生存预后均显著优于高表达组(P<0.001)。以TCGA胶质瘤数据作为外部数据集验证,结果显示,ADAMTS7基因高表达组的总生存期(OS)和无进展间期(PFI)优于低表达组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论ADAMTS7基因表达水平可作为评估神经胶质瘤患者预后的预测因子,具有潜在的临床应用价值。

附子汤对三种骨关节炎大鼠IL-1β、MMP-13、ADAMTS4、ADAMTS5表达的实验研究

目的:分析附子汤对寒湿痹阻、机械损伤和化学损伤三种不同病因病机骨关节炎(OA)模型的药效作用,并阐明其作用机理。方法:选取SPF级健康SD大鼠42只,随机分成7组:正常组、寒湿痹阻OA组、寒湿痹阻附子汤组、机械损伤OA组、机械损伤附子汤组、化学损伤OA组、化学损伤附子汤组,每组6只。干预组灌胃给予附子汤,正常组及模型组灌胃给予等量生理盐水,每天1次,共持续12周。每2周记录一次大鼠体重;HE染色,观察膝关节软骨病理变化;ELISA法检测12周各组大鼠血清及关节液白细胞介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS 4)、ADAMTS5水平;qRTPCR法检测软骨和滑膜组织IL-1β、MMP-13、ADAMTS4、ADAMTS5水平。结果:各模型组大鼠体质量显著降低;与各模型组相比,各对应给药组大鼠体质量无统计学差异(P>0.05)。与各模型组相比,附子汤干预组能显著降低三种OA模型大鼠血清、关节液、软骨和滑膜组织IL-1β、MMP-13、ADAMTS4、ADAMTS5水平(P<0.01或P<0.05);寒湿痹阻附子汤组效果更为显著。结论:附子汤通过降低OA模型大鼠血清、关节液、软骨和滑膜组织IL-1β、MMP-13、ADAMTS4、ADAMTS5水平表达,抑制炎症反应,减轻软骨细胞和细胞基质的损害,达到促进软骨修复的作用。附子汤对症干预寒湿痹阻型骨关节炎效果更佳。