老年颅脑损伤急性期患者GCS评分与血清中超敏C反应蛋白、基质金属蛋白质-2和-9的关系

目的研究老年颅脑损伤急性期患者格拉斯哥昏迷评分(GCS)评分与血清中超敏C反应蛋白(hsCRP)、基质金属蛋白质-2(MMP-2)和基质金属蛋白质-9(MMP-9)的关系,为临床诊疗提供依据。方法选取2014年1月至2015年1月我院收治的老年颅脑损伤急性期患者150例,根据GCS评分将患者分为轻度组(57例)、中度组(51例)和重度组(42例),另选取同期健康体检者50例作为对照组,检测各组受检者的hs-CRP、MMP-2和MMP-9水平,应用Spearman秩相关性分析GCS评分与hs-CRP、MMP-2和MMP-9的关系。结果对照组受检者的hs-CRP、MMP-2和MMP-9水平分别为(2.09±0.62)ng/mL、(15.23±0.86)ng/mL、(13.09±1.59)ng/mL,均明显低于轻度组的(7.09±1.32)ng/mL、(87.08±5.34)ng/mL、(70.53±8.53)ng/mL以及中度组的(18.34±0.87)ng/mL、(103.64±6.62)ng/mL、(108.71±6.08)ng/mL和重度组的(28.13±0.63)ng/mL、(189.42±9.03)ng/mL、(189.42±2.64)ng/mL,轻度组hs-CRP、MMP-2和MMP-9水平均明显低于中度组和重度组,中度组hs-CRP、MMP-2和MMP-9水平明显低于重度组,差异均具有统计学意义(P<0.05);Spearman秩相关性分析显示,GCS评分与hs-CRP、MMP-2和MMP-9均呈负相关(P<0.05)。结论老年颅脑损伤急性期患者的hs-CRP、MMP-2和MMP-9水平均会升高,且GCS评分与hs-CRP、MMP-2和MMP-9水平呈负相关关系,临床上可通过测定血清hs-CRP、MMP-2和MMP-9水平来反映颅脑损伤程度。

先进核分析技术在金属蛋白质组学研究中的应用

金属蛋白质组学旨在研究生物体系内金属蛋白质的分布、组成、结构、特征、功能、金属结合环境及其在疾病诊断和药物开发中的应用。各种先进核分析技术在金属蛋白质组学研究中有着广泛的用途。本文评述了分子活化分析、同步辐射X荧光分析、同位素示踪等在金属蛋白质种态分析方面的应用,以及穆斯堡尔谱学、同步辐射X射线吸收光谱和中子散射等在金属蛋白结构表征方面的应用,对各种方法的特点和局限作了简单说明。基于大科学装置的中子散射和同步辐射技术的联用,有望在金属蛋白质组学中作出重要贡献。

老年颅脑损伤急性期患者GCS评分与血清中超敏C反应蛋白、基质金属蛋白质-2和-9的关系

CT对颅脑损伤的诊断有重要价值,但是其判断病变程度及预后仍局限。近来人们更倾向于研究患者血清中的表达,并证实了相关蛋白的表达意义。高敏C反应蛋白（hs-CRP）是急性时相蛋白,基质金属蛋白质（MMP）-2、-9是MMP家族的经典成员,对细胞外基质有明显的降解作用,近年来研究显示hs-CRP、MMP-2、-9在颅脑损伤患者中高表达,对疾病进展有一定促进作用。

血清解整合素-金属蛋白质酶12-S在异位妊娠早期诊断中的价值探讨

目的观察解整合素-金属蛋白质酶12-S(ADAM12-S)在异位妊娠及正常妊娠过程中的变化特点,探讨ADAM12-S在异位妊娠早期诊断中的临床价值。方法将146例异位妊娠患者设为异位妊娠组,263例正常孕妇为对照组,观察两组研究对象不同孕周的ADAM12-S检测情况,以及ADAM12-S与孕周相关性。结果异位妊娠组平均ADAM12-S对数值在不同孕周均低于同期正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组ADAM12-S对数值与孕周呈线性关系(r=0.926,P=0.000,P<0.01),回归方程Y=0.3147X-0.3099,ADAM12-S对数值随孕周增加而上升;异位妊娠组ADAM12-S对数值与孕周经直线相关回归性分析,无线性关系(r=-0.119,P=0.140,P>0.05)。结论 ADAM12-S在妊娠早期阶段能较好地反映胎盘功能情况,可作为异位妊娠诊断的辅助检查指标。

血清解整合素-金属蛋白质酶12在异位妊娠早期诊断中的价值

目的探讨血清解整合素-金属蛋白质酶12（ADAM12）在异位妊娠早期诊断中的价值。方法选择2012年9月至2014年9月荆州市第二人民医院收治的40例异位妊娠孕妇作为研究组，孕周5～10周，另外选取同期产检的50例正常孕妇作为对照组，孕周5—10周。采用荧光免疫分析法检测两组孕妇各孕周血清ADAM12-S水平，并分析血清ADAM12-S水平与孕周的相关性。结果研究组各孕周血清ADAM12-S水平显著低于对照组（P〈0．05）。对照组孕妇血清ADAM12-S水平随孕周增加而显著增加（r=0．589，P=0．021）；研究组孕妇血清ADAM12-S水平随孕周变化无明显线性关系（r=0．088，P=0．567）。结论异位妊娠孕妇血清ADAM12-S水平显著低于正常妊娠妇女，检测血清ADAM12-S水平有助于异位妊娠的诊断，为患者治疗赢得宝贵时间。

金属组学和金属蛋白质组学技术于生物医药研究的应用

金属是生命过程中必不可少的辅助因子,是许多关键细胞进程中的必需元素。金属组学作为一门新兴的研究领域,旨在了解并揭示基于金属的生命过程的分子机制及金属的生物活性,相关研究在近年来得以蓬勃发展并受到广泛关注。本文详述了金属组学的概念及相关研究技术,重点介绍金属组学的一个重要研究分支——金属蛋白质组学,并对该领域应用于生物医药研究取得的进展进行综述,内容涵盖金属/金属药物在单细胞层面的摄取研究,组织和器官中的金属/金属药物分布研究、及其在细胞内结合靶点蛋白的鉴定及表征,金属蛋白的生物信息学分析等方面。基于以上研究现状,进一步探讨了金属组学技术在生物医药研究中所面临的挑战及发展前景。

血清解整合素-金属蛋白质酶12-S在异位妊娠早期诊断中的价值探讨

目的:观察解整合素-金属蛋白质酶12-S(ADAM12-S)在异位妊娠及正常妊娠过程中的变化特点,探讨ADAM12-S在异位妊娠早期诊断中的临床应用价值。方法:146例异位妊娠患者作为异位妊娠组,263例正常孕妇作为对照组,观察两组研究对象ADAM12-S的检测情况。结果:异位妊娠组平均ADAM12-S对数值在不同孕周均低于同期正常妊娠组(P<0.05);263例正常对照组妊娠妇女ADAM12-S对数值与孕周呈线性关系(r=0.926,P=0.000),回归方程y=0.3147x-0.3099,ADAM12-S对数值随孕周增加而上升;146例异位妊娠ADAM12-S对数值与孕周无明显线性关系(r=-0.119,P=0.140)。结论:ADAM12-S在妊娠早期阶段能较好地反映胎盘功能情况,异位妊娠胎盘功能低下,ADAM12-S可作为异位妊娠诊断的辅助检查手段。

用核磁共振方法研究金属离子与蛋白质的相互作用

许多蛋白质含有金属离子,金属离子对蛋白质发挥生物学功能起着很大的作用.金属离子与蛋白质的相互作用以及参与蛋白质功能调节的方式各种各样:有些金属离子高度专一性地与蛋白质紧密结合,对蛋白质发挥生物学功能起着关键性的作用;有些金属离子只是作为蛋白质发挥功能的辅助因子而瞬态地与蛋白质松散结合.本文简要介绍目前国际上用NMR方法研究抗磁金属离子和顺磁金属离子与蛋白质相互作用的进展,并具体介绍了NMR方法在钙调蛋白、锌指蛋白、朊病毒蛋白等金属离子蛋白研究上的应用.

生物体内含锰活性中心蛋白质结构和性质

生物体内含锰活性中心蛋白质结构和性质刘泽菊，钮谓钧，朱岩（杭州大学化学系，杭州３１００２８）锰是生物体内一种必需的微量元素。尽管锰元素在人体（７５公斤重）中的正常含量只有１０～２０ｍｇ，但人体缺锰却会表现出生长紊乱、骨胳畸变、细胞膜形成不正常以及结缔...

基于类不平衡学习的蛋白质与金属离子交互位点预测

为了提高蛋白质与金属离子的交互位点(PMIIS)预测的准确率,从解决数据分布不平衡问题出发,提出了1种结合下采样与上采样方法的类不平衡学习算法。同时对多数类样本与少数类样本进行采样,在补充少数类样本信息的同时,减少多数类样本的冗余信息。基于该文类不平衡学习算法与支持向量机(SVM),设计了1种基于序列信息的预测方法。为了客观评价PMIIS的预测性能,构建了领域内较为完备的、含有蛋白质与Zn^(2+)、Ca^(2+)与Fe^(3+)交互位点的标准数据集。在此数据集上的实验结果表明,该文预测方法在蛋白质与Zn^(2+)、Ca^(2+)与Fe^(3+)交互位点预测问题上的平均马氏相关系数(MCC)为0.646,优于TargetS与IonCom。

水稻籽实中蛋白质-Cd、Pb结合体及其稳定性

通过凝胶层析方法 ,对水稻籽实中的蛋白质 Cd、Pb结合形态特征及其稳定性进行了研究 .结果表明 :水稻籽实Tris HCl提取液经SephadexG 75分离 ,洗脱液得到 3个紫外吸收峰 ,在第 1、3峰处出现了Cd、Pb浓度峰 ,其蛋白质 Cd、Pb结合体的表观分子量为 5 4.5KD和 5 .5KD .在蒸煮加热处理后 ,水稻籽实中蛋白质 Cd、Pb结合体发生变性 ,使分子量为 5 4.5KD的蛋白质 Cd、Pb结合体完全破坏 ,分子量为 5 .5KD的结合体也部分地被破坏 ,与蛋白质结合的Cd、Pb被释放出来 .胃蛋白酶和胰蛋白酶消化处理后 ,也能够破坏蛋白质 Cd、Pb结合体的形态 ,洗脱液中Cd、Pb的浓度分布也发生了变化 ,在第 1、3紫外吸收峰处的Cd、Pb浓度也明显降低 .另外 ,在第 3峰以后的洗脱液中也检测到Cd。

电喷雾质谱的非共价键蛋白质复合物研究

电喷雾质谱(ESI-MS)已经成为检测和研究生物分子弱相互作用,即非共价键作用的一个重要分析手段。ESI-MS除了具有快速、灵敏、专属的特点以外,还有能够直接得出复合物的分子量和化学计量比的优点。本文通过蛋白质与蛋白质、配体、金属离子的非共价复合物的例子阐述了ESI-MS技术的主要特性,综述了ESI-MS在非共价键蛋白质复合物方面的早期和近期应用研究成果。引用文献34篇。

泛素连接酶E4B介导PM20D2、PABPC1和TACO1蛋白质的泛素化验证

泛素连接酶E4B通过U-box基序可将经泛素活化酶(Ubiquitin-activating enzyme, E1)和泛素结合酶(Ubiquitin-conjugating enzyme, E2)传递的泛素(Ubiquitin, UB)标记至底物蛋白质。探究3个蛋白质:金属蛋白酶M20家族蛋白质2(Peptidase M20 domain-containing protein 2,PM20D2)、多腺苷酸结合蛋白质1(Polyadenylate-binding protein 1,PABPC1)、细胞色素C氧化酶Ⅰ翻译激活剂(Translational activator of cytochrome C oxidase Ⅰ,TACO1)是否可被E4B介导泛素化。从HEK293细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以其为模板调取底物基因并构建重组质粒,利用大肠杆菌表达系统表达并纯化泛素化过程所需的各个相关蛋白质,通过蛋白质体外泛素化实验,对3个蛋白质进行泛素化验证。结果表明3个蛋白质均可以在蛋白质水平被E4B泛素化,证明3个蛋白质都是E4B的底物,为进一步在细胞中研究其泛素化的机理奠定基础。

血红蛋白在壳聚糖／石墨烯修饰膜上的直接电化学研究

金属蛋白质的直接电化学是研究工作者一直非常感兴趣的领域，然而由于诸多原因，在裸电极上实现直接电化学是很困难的。为了促进蛋白质和电极的电子传递，稳定而且具有优良电子传导速率和良好生物兼容性的无机材料成为此领域研究的热点。2004年英国曼彻斯特大学的安德烈·K·海姆（Andre K．Geim）等人制备出的石墨烯引起了全世界的研究热潮，它不仅是己知材料中最薄的一种，还非常稳定坚硬；作为单质，它在室温下传递电子的速度比已知导体都快。石墨烯的这些特点引起了我们将其应用在蛋白质直接电化学方面的兴趔。

金属卟啉蛋白质结合体的结构与功能

在生命活动中起重要作用的蛋白质和金属卟啉是典型的生物高分子和金属配合物,而且绝大部分蛋白质与金属卟啉是通过形成结合体共同发生作用的,因此,研究天然金属卟啉蛋白质结合体的结构与功能并进行人工模拟受到关注并取得了很大进展。本文在对蛋白质与金属卟啉的结构与类型进行简单介绍的基础上,综述了金属卟啉与蛋白质的天然结合体,如细胞色素P450、过氧化物酶、血红蛋白、肌红蛋白及脑红蛋白等。总结了金属卟啉与蛋白的人工结合体,如原卟啉、血卟啉及其衍生物与血清白蛋白的结合体;合成水溶性与不溶性金属卟啉与白蛋白的结合体。介绍了人工合成蛋白,即基因重组蛋白与合成金属卟啉的结合体,如用作人工合成血液的栏式铁卟啉白蛋白结合体。到目前为止,不但金属卟啉可以合成,而且白蛋白、血红蛋白也可以通过基因重组进行人工合成。金属卟啉蛋白质结合体已应用于制备人工血液、疾病检测、治疗,及光解水产氢等多个领域。

美国利用金属简化抗体药物合成

美国莱斯大学科学家开发出一种“通用盒”以简化癌症药物设计，这种方法能够对将药物运送到靶细胞的天然抗体进行修饰，其关键在于添加金属元素。研究人员发现稀有过渡金属铑可以作为设计和制备抗体药物共轭物的有效元素，而抗体药物共轭物已成为靶向给药的标准工具，用于化学治疗剂等多个方面。他们开发出一种类似酶的多金属蛋白质，用于催化多种抗体。这一简单过程将帮助实验室人员测试各种抗体来源和抗原靶标的相对功能，以筛选出对抗肿瘤细胞最有效的。

ACK1在子痫前期孕妇胎盘中的表达及其对滋养细胞侵袭功能的调控

目的:研究活化的Cdc42结合激酶(activated Cdc42 associated kinase,ACK1)在正常足月孕妇胎盘与子痫前期(preeclampsia,PE)孕妇胎盘组织中的表达差异及其对滋养细胞功能的调控作用,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2015年10月至2016年10月在重庆医科大学附属第一院产科行计划性剖宫产手术的23例正常足月孕妇胎盘和23例PE孕妇胎盘组织,使用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测胎盘组织中ACK1的表达及差异情况。滋养细胞株(HTR8/SVneo)分为3组:常氧对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)及ACK1基因序列慢病毒敲降组(ACK1 shRNA组),使用Transwell实验分析检测各组细胞的侵袭情况,采用流式细胞仪检测各处理组细胞凋亡率。使用Western blot检测各组细胞中ACK1蛋白,金属蛋白质酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9及其特异性抑制因子(the tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-2的蛋白表达差异。结果:与正常足月孕妇胎盘比较,ACK1在人类子痫前期胎盘中表达明显降低(t=3.890,P=0.018)。细胞学实验中,与N组比较,ACK1 shRNA组和H/R组ACK1蛋白表达明显降低(t=12.260,P=0.000;t=10.740,P=0.000),ACK1 shRNA组和H/R组MMP9蛋白表达均明显降低(t=8.071,P=0.000;t=7.745,P=0.001),TIMP1蛋白表达显著升高(t=10.690,P=0.000;t=14.330,P=0.000)。ACK1 shRNA组和H/R组细胞迁移至下室的细胞数明显减少(t=12.260,P=0.000;t=11.320,P=0.000),H/R组细胞凋亡率显著升高(t=2.260,P=0.000),但ACK1 shRNA组细凋亡率无明显改变(t=8.317,P=0.088)。结论:ACK1的表达下调可抑制滋养细胞的侵袭,可能在子痫前期发病机制中有重要的作用。

急性冠状动脉综合征患者炎性因子的变化及苯那普利的干预作用

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清炎性因子变化及苯那普利稳定动脉粥样硬化斑块的可能机制。方法入选70例ACS患者为ACS组,并随机分为苯那普利治疗组40例和常规治疗组30例;同时又分稳定性心绞痛(SAP)组22例,对照组32例。比较各组Toll样受体4(TLR4)、TNF-α、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达差异及其相关性。结果 ACS组TLR4、TNF-α和MMP-9含量显著高于SAP组和对照组(P<0.01)。治疗4周后,苯那普利治疗组TLR4、TNF-α和MMP-9含量明显低于常规治疗组(P<0.05)。结论血管紧张素转换酶抑制剂苯那普利可能通过抑制ACS患者TLR4过度表达及其下游炎性细胞因子TNF-α和MMP-9分泌,稳定ACS易损斑块,改善其预后。

miR-155反义寡核苷酸转染对甲状腺癌细胞迁移、侵袭和MMP-13表达的影响

目的:探讨miR-155表达对人甲状腺癌细胞增殖及侵袭力的影响。方法:构建针对miR-155的反义寡核苷酸(antisense miR-155,AS-miR-155),同时设立空白对照组和无义寡核苷酸(oligodeoxyribonucleotides,ODN)组。人甲状腺癌BCPAP细胞经转染处理后,采用荧光实时定量PCR检测3组细胞中miR-155 mRNA表达水平,划痕试验检测癌细胞迁移能力,Transwell方法检测细胞的侵袭能力。采用ELISA方法检测各组癌细胞上清液基质金属蛋白质酶(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)含量。结果:与对照组和无义ODN组比较,转染AS-miR-155组BCPAP细胞miR-155表达水平降低,细胞迁移速度变慢,穿膜细胞数较少,细胞中MMP-13蛋白水平亦明显减低(P<0.05)。结论:采用寡核苷酸下调miR-155高表达可抑制甲状腺癌细胞增殖及侵袭力,下调MMP-13表达是其重要机制。

VEGF、MMP-2、MMP-9在卵巢原发性与转移性癌中表达的研究

目的 :探讨VEGF、MMP 2、MMP 9在卵巢原发上皮癌、库肯勃氏瘤中的表达差异及临床病理意义。方法 :采用免疫组化S P染色技术对 83例卵巢癌 (卵巢原发癌 4 5例、库肯勃氏瘤 38例 )进行分析 ,观察VEGF、MMP 2、MMP 9在卵巢癌中的表达。结果 :VEGF在卵巢原发癌和库肯勃氏瘤组织中的表达显著高于正常卵巢组织 (P <0 .0 5 ) ;MMP 2、MMP 9在正常卵巢组织中表达缺如 ;VEGF、MMP 2、MMP 9在卵巢原发癌与库肯勃氏瘤中表达均有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;VEGF、MMP 2、MMP 9在库肯勃氏瘤中及卵巢原发癌中 ,任意两指标阳性表达均有正相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF、MMP 2、MMP 9在库肯勃氏瘤的形成机制中起重要作用 ,与肿瘤的浸润转移密切相关 。