金属蛋白酶解离素28对人牙髓干细胞生物学功能的影响

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)基因对人牙髓干细胞(HDPSCs)增殖、分化、凋亡特性的影响和可能的作用机制。方法:体外分离培养、鉴定人牙髓干细胞(HDPSCs),应用基因重组构建ADAM28真核表达质粒并转染HDPSCs,应用四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28对HDPSCs生物学特性的影响。应用免疫细胞化学和图像分析技术检测ADAM28对HDPSCs表达牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨涎蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)的影响。采用SPSS13.0软件包的SNK检验进行统计学分析。结果:成功构建并转染ADAM28真核质粒,真核质粒转染组HDPSCs的增殖活性、增殖指数显著低于空载体组和未转染组,碱性磷酸酶(ALP)分泌水平及凋亡细胞百分比明显上升,差异显著(P<0.05);HDPSCs内DSPP的表达水平显著提高(P<0.05)。结论:ADAM28可显著抑制HDPSCs增殖,促进ALP的分泌活性和HDPSCs内DSPP的表达,显著诱导HDPSCs的凋亡。

金属蛋白酶解离素28对人牙乳头细胞生物学特性的影响

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)基因对人牙乳头细胞(HDPC)增殖、分化、凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法:应用细胞培养、基因转染、MTT、流式细胞术(FCM)和酶动力学等方法,探讨ADAM28基因对HDPC生物学特性的影响,采用SPSS12.0软件包中的SNK检验进行统计学分析。结果:成功转染ADAM28真核质粒,真核质粒转染组HDPC的增殖活性、增殖指数、碱性磷酸酶(ALP)分泌活性显著高于空载体组、未转染组,而凋亡细胞百分比显著低于两对照组,P<0.01。结论:ADAM28可显著促进HDPC的增殖和ALP的分泌,显著抑制HDPC的凋亡。

持续静压力对成骨细胞系MC3T3-E1金属蛋白酶解离素28表达的影响

目的:研究持续静压力对成骨细胞系MC3T3-E1金属蛋白酶解离素28(ADAM28)表达的影响。方法:通过自制的细胞体外加载装置,将MC3T3-E1成骨样细胞分别施加50、100、150kPa的持续静压力1h,再分别培养24h、48h后,观察细胞在形态上的相应变化,并用免疫组织化学染色的方法检测受力作用后ADAM28的染色情况。结果:细胞受力后,其ADAM28免疫组化染色强度随压力值的增大而明显降低;加压后细胞培养24h和48h两组染色强度无明显差异。结论:不同大小的静压力可以影响成骨细胞系MC3T3-E1上ADAM28金属蛋白酶解离素28表达强度,进而影响骨改建。

金属蛋白酶解离素28在牙齿发育中的研究进展

金属蛋白酶解离素28(adisintegrin and metallo2 proteinase28,ADAM28)是ADAM家族最近发现的一种分泌性糖蛋白,它同样具有ADAM家族的生理功能:参与细胞增殖,分化,胞外基质重建,裂解基质蛋白和细胞迁移等。研究显示,ADAM28基因参与了牙胚的发育过程,并在牙源性间充质细胞的增殖?分化和凋亡中发挥重要的调控作用。同时ADAM28基因具有金属蛋白酶活性,因而它对于细胞外基质的形成和蛋白的外功能区脱落有重要的调节作用。本文着重回顾了近年来国内外关于ADAM28生物学功能的研究及其在牙齿发育中的作用机制。

分化型甲状腺癌中ADAM9的表达及其与临床病理因素的关系

目的探讨分化型甲状腺癌中金属蛋白酶解离素9(ADAM9)的表达和临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SABC法,检测了42例分化型甲状腺癌组织中ADAM9的表达。结果分化型甲状腺癌中ADAM9的阳性率为64.3%。伴有颈淋巴结转移的甲状腺癌中ADAM9阳性率为80.0%,显著高于无颈淋巴结转移的甲状腺癌(50.0%),P<0.05;累及或超出甲状腺被膜的甲状腺癌中ADAM9阳性率为100.0%,明显高于肿块限于甲状腺内的甲状腺癌(57.1%),P<0.05;ADAM9表达与病理分型和TNM分期无关,P>0.05。结论 ADAM9在分化型甲状腺癌的侵袭转移中可能起着重要作用。ADAM9表达水平可以作为判定甲状腺癌侵袭转移的客观指标。

敲低阿霉素心肌病大鼠心肌细胞ADAM10后大鼠心功能的改善及机制

目的建立阿霉素心肌病动物模型,观察解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)小干涉RNA(siRNA)重组慢病毒对神经钙黏素(N-cadherin)加工水解途径的调控。方法 SD大鼠腹腔注射阿霉素,建立阿霉素心肌病大鼠模型。将ADAM10 siRNA重组慢病毒进行心内注射,分为模型组、重组慢病毒治疗组、空白载体组及正常对照组。分离原代心肌细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,确定感染效率。超声检测各组大鼠心功能,HE染色观察心肌组织病变情况,Western blot法检测心肌细胞N-cadherin在ADAM10水解后产生的C末端片段1(CTF1)的蛋白水平,免疫组织化学染色检测心肌组织N-cadherin的表达和分布。结果原代培养的感染后心肌细胞可见大量GFP表达,说明慢病毒成功感染心肌细胞;与阿霉素心肌病组相比,ADAM10 siRNA重组慢病毒治疗组死亡率下降,心功能及心肌组织形态明显改善,心肌细胞N-cadherin蛋白水平增加并主要定位于细胞表面、CTF1蛋白水平降低。结论敲低ADAM10水平,增加阿霉素心肌病大鼠心肌细胞N-cadherin的表达、降低CTF1的表达,改善心功能。

结直肠癌ADAMs表达谱及其ADAM-28的表达及意义

目的探讨金属蛋白酶解离素(ADAMs)家族成员ADAM-8、ADAM-9、ADAM-10、ADAM-12、ADAM-15、ADAM-17、ADAM-19、ADAM-28、ADAM-33在结直肠癌中的表达分布,并分析ADAM-28表达与结直肠癌临床病理特征的关系及其对预后的影响。方法实时荧光定量PCR(QPCR)检测6例新鲜结直肠癌组织和对应癌旁组织中ADAMs mRNA的表达,Western blotting检测ADAM-28蛋白在上述样本中的表达。免疫组化法检测ADAM-28在218例结直肠癌组织中的表达,分析ADAM-28表达与临床病理特征和预后的关系。结果 ADAM-8、ADAM-9、ADAM-17、ADAM-28和ADAM-33 mRNAs在结直肠癌组织中表达升高,ADAM-12表达下调,ADAM-10、ADAM-15和ADAM-19无明显变化。ADAM-28蛋白表达在结直肠癌组织中也升高。免疫组化检测显示,结直肠癌组织中ADAM-28的阳性表达率为68.8%(150/218),其表达与淋巴结转移(P=0.032)、TNM分期(P=0.032)和分化程度(P=0.019)有关。ADAM-28阳性表达者的中位总生存时间(OS)明显劣于ADAM阴性表达者(36.75个月vs.95.10个月),差异有统计学意义(P<0.001)。Cox多因素分析显示,ADAM-28是影响OS的独立因素(P<0.05)。结论 ADAM-28表达与结直肠癌的发生、发展密切相关,是潜在评估结直肠癌预后的预测因子。

金属蛋白酶解离素9在肿瘤中的研究进展

金属蛋白酶解离素9（ADAM9）是金属蛋白酶解离素家族中的一员，主要以其金属蛋白酶活性和与整合素结合的能力广泛参与人类多种疾病的发生发展，尤其是肿瘤性疾病。深入研究ADAM9在肿瘤发生发展中的作用有助于找到新的靶点，从而为肿瘤治疗提供新的方法。

ADAM28反义核酸对人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶的影响

目的:研究ADAM28反义核酸(AS-ODN)对人牙囊细胞(HDFCs)增殖和碱性磷酸酶(AKPase)活性的影响。方法:采用细胞培养、基因转染、四唑盐(MTT)比色法和酶动力学方法,检测ADAM28反义核酸对牙囊细胞增殖、分化和影响碱性磷酸酶活性的可能机制。实验数据采用单因素方差分析的q检验(SNK)进行统计学分析。结果:ADAM28反义核酸成功转染人牙囊细胞,MTT和AKPase活性检测显示:ADAM28AS-ODN组细胞增殖和AKPase活性均显著低于S-ODN组和空白对照组,其中MTT检测的组间P值分别为0.0002、0.0001,P均<0.01;AKPase检测的组间P值分别为0.0007、0.0003,P均<0.01,即ADAM28反义核酸可显著抑制HDFCs的增殖和AKPase的活性。结论:ADAM28可能通过参与Notch信号途径来促进牙囊细胞的增殖和分化。

ADAM28真核表达质粒的构建及转染人牙囊细胞后的表达分析

目的:构建金属蛋白酶解离素28(ADAM28)真核表达质粒,转染人牙囊细胞(HDFC)后检测ADAM28在HDFC中的表达分布。方法:采用基因重组技术构建ADAM28真核表达质粒,通过细胞培养、脂质体Lipofectamine2000介导转染HDFC后,应用免疫荧光、RT-PCR及Western印迹检测ADAM28在HDFC中的表达。结果:成功构建并鉴定ADAM28真核质粒,瞬时转染HDFC72h后,检测证实真核质粒转染组的HDFC表达ADAM28蛋白,而2个对照组均无表达。结论:ADAM28在HDFC内能被正确翻译和表达,为进一步探讨其在牙源性细胞中的生物学功能奠定了基础。

ADAM9在分化型甲状腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨分化型甲状腺癌中金属蛋白酶解离素9(ADAM9)的表达及临床意义。方法采用免疫组化SABC法检测52例分化型甲状腺癌组织中ADAM9的表达。结果分化型甲状腺癌中ADAM9的阳性率为64.3%。伴有颈淋巴结转移的甲状腺癌中ADAM9阳性率为80.0%,显著高于无颈淋巴结转移的甲状腺癌(50.0%)(P<0.05);累及或超出甲状腺被膜的甲状腺癌中ADAM9阳性率为100.0%,明显高于肿块限于甲状腺内的甲状腺癌(57.1%)(P<0.05);ADAM9表达与病理分型和TNM分期无关。结论 ADAM9在分化型甲状腺癌的侵袭转移中可能起着重要作用,ADAM9表达水平可以作为判定甲状腺癌侵袭转移的客观指标。

ADAM28反义核酸对人牙龈成纤维细胞生物学功能的影响

目的:研究金属蛋白酶解离素28(a disintegrin and metalloproteinase 28,ADAM28)反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)增殖、分化、凋亡的影响,并分析可能的作用机制。方法:采用细胞培养、基因转染、四甲基唑蓝(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28反义核酸转染HGFs后对细胞生物学特性的影响。采用SPSS16.0软件包中的SNK检验对数据进行统计学分析。结果:ADAM28 AS-ODN组HGFs的增殖活性显著降低。AS-ODN组HGFs处于S期的细胞百分比显著低于SODN组和未转染组,G2+M期的细胞百分比显著低于未转染组,AS-ODN组的细胞增殖指数(PI=S+G2M)显著低于其他2组,差异显著。AS-ODN组碱性磷酸酶(ALP)分泌活性、凋亡细胞百分比显著升高。结论:ADAM28反义核酸可显著抑制HGFs的增殖,并影响细胞周期的变化,促进其分化,显著诱导HGFs的凋亡。

ADAM28反义核酸对人牙周膜干细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)对人牙周膜干细胞(HPDLSC)增殖、分化、凋亡特性的影响和可能的作用机制。方法:体外分离培养、鉴定HPDLSC,将设计合成的ADAM28反义核酸和正义对照(S-ODN)分别转染HPDLSC,应用四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28反义核酸对HPDLSC生物学特性的影响。采用SPSS13.0软件包中的SNK检验进行统计学分析。结果:ADAM28 AS-ODN组HPDLSC的增殖活性、增殖指数显著低于S-ODN组和未转染组,碱性磷酸酶(ALP)分泌水平及凋亡细胞百分比明显上升,差异显著(P<0.01)。结论:ADAM28 AS-ODN可显著抑制HPDLSC的增殖并影响细胞周期的变化,促进ALP的分泌活性,显著诱导HPDLSC的凋亡。

ADAM28反义核酸对人牙乳头细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的研究金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)对人牙乳头细胞(HDPC)增殖、分化、凋亡等生物学特性的影响并分析可能的作用机制。方法采用细胞培养、基因转染、四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)检测ADAM28反义核酸转染HDPC后对细胞生物学特性的影响。结果ADAM28AS-ODN组HDPC的增殖活性、增殖指数、碱性磷酸酶(ALP)分泌活性显著降低,凋亡细胞百分比明显上升。结论ADAM28反义核酸可显著抑制HDPC的增殖和ALP的活性,显著诱导HDPC的凋亡并影响细胞周期的变化。

牙齿发育相关基因ADAM28在人牙乳头细胞中的定位分布研究

目的探讨牙齿发育相关基因金属蛋白酶解离素28(a disintegrin and metalloproteinase28,ADAM28)在人牙乳头细胞(human dental papilla cells,HDPC)中的定位分布及作用。方法应用基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ADAM28,通过细胞培养、基因转染HDPC后,采用免疫荧光、RT-PCR及Western blot检测ADAM28在HDPC中的表达分布。结果成功构建并鉴定ADAM28真核质粒,瞬时转染HDPC72h后,HDPC的胞质和胞膜上均表达ADAM28蛋白,而两对照组均无表达。结论ADAM28在HDPC内能被正确地翻译、表达,可能作为一种胞质蛋白调控着牙源性间充质细胞的增殖和分化。

ADAM28反义核酸对人牙髓干细胞生物学特性的影响

目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸(AS-ODN)对人牙髓干细胞(HDPSCs)增殖、分化、凋亡特性的影响并分析可能的作用机制。方法:体外分离培养、鉴定HDPSCs,将FITC荧光标记的ADAM28反义核酸(AS-ODN)和正义对照(S-ODN)分别转染HDPSCs,用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Westernblot)检测ADAM28AS-ODN转染48h后的封闭效率,应用四唑盐(MTT)比色法、酶动力学法和流式细胞术(FCM)分别检测实验各组HDPSCs的增殖活性、碱性磷酸酶(AKP)的分泌活性以及细胞周期分布和凋亡百分比。采用SPSS13.0软件包的SNK检验进行统计学分析。结果:AS-ODN转染组ADAM28mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(P<0.05),细胞增殖活性、增殖指数明显降低(P<0.05),碱性磷酸酶(AKP)分泌水平和细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。结论:ADAM28AS-ODN可显著抑制HDPSCs的增殖并影响细胞周期的变化,促进AKP的分泌活性并诱导HDPSCs的凋亡。

ADAM28反义核酸对体外培养小鼠牙胚发育的影响

目的探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸对体外培养的小鼠牙胚发育的影响。方法建立Balb/c小鼠牙胚体外培养模型,利用ADAM28 AS-ODN抑制小鼠牙胚中ADAM28 mRNA的翻译,采用组织学和Western blot检测该抑制反应对牙胚发育的影响。结果AS-ODN组部分成牙本质细胞出现坏死崩解、排列紊乱,髓腔内胶原纤维分泌较少,牙胚组织中ADAM28的表达明显减弱。结论ADAM28反义核酸可显著抑制发育牙胚的间充质细胞的增殖、成熟与分化,有效封闭牙胚组织中ADAM28的表达。

ADAM28反义核酸对人牙囊细胞内ADAM28表达的影响

目的探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸对人牙囊细胞(HDFC)内ADAM28蛋白表达的影响。方法应用反义核酸技术,设计并合成与ADAM28 mRNA特异序列互补的AS-ODN和正义对照S-ODN转染HDFC后,通过免疫细胞化学、RT-PCR和Western blot检测细胞中ADAM28的表达差异。结果ADAM28 AS-ODN转染HDFC后,在转录、翻译和蛋白水平细胞内ADAM28的表达均明显减弱,统计学分析有显著性差异(P<0.01)。结论ADAM28 AS-ODN可有效封闭HDFC内ADAM28的表达。

miR-134-3p通过靶向调节ADAM9/EGFR/AKT抑制结肠癌细胞的活性和迁移

目的探究miR-134-3p是否通过靶向调控ADAM9/EGFR/AKT通路影响结肠癌细胞的存活和迁移。方法实时定量PCR检测正常结肠上皮细胞NCM460和结肠癌细胞SW480,HCT116和RKO中miR-134-3p的表达,Western免疫印迹检测上述细胞中ADAM9、EGFR和AKT的蛋白表达;miR-134-3p mimic/miR-134-3p inhibitor转染SW480细胞后,CCK-8试剂盒、流式细胞术和Transwell迁移分析法分别用来检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移能力;Western免疫印迹检测各组细胞ADAM9/EGFR/AKT通路蛋白表达和其磷酸化水平;荧光素酶报告分析实验用于验证miR-134-3p和ADAM9的靶向关系。结果与NCM460细胞系相比,miR-134-3p在3种人结肠癌细胞系中低表达,差异具有统计学意义(P<0.05),而ADAM9、EGFR和AKT在结肠癌细胞系中表达升高2~3倍(P<0.05)。miR-134-3p mimic转染后SW480细胞的增殖能力降低,迁移细胞数目减少。miR-134-3p mimic转染后细胞凋亡率升高至(15.0±1.1)%,与对照组(9.0±1.7)%相比差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-134-3p mimic转染后ADAM9、p-EGFR/EGFR和p-AKT/AKT的水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。荧光素酶报告实验证实miR-134-3p可靶向结合ADAM9mRNA而抑制其表达;而SW480细胞转染miR-134-3p inhibitor则与miR-134-3p mimic作用相反。结论 miR-134-3p通过靶向调控ADAM9的表达而抑制EGFR/AKT通路,从而抑制结肠癌细胞的存活和迁移。

血管去整合素-金属蛋白酶17作为一种新的治疗靶点,可调节血管紧张素Ⅱ诱导的心血管肥厚及周围纤维化

已知血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）在高血压及其并发症中均发挥重要作用。有证据表明,由AngⅡ诱导升高血压和增强心血管重塑及损害的机制可能是不同的。然而,AngⅡ特异性启动心血管重塑,如肥大和纤维化的信号传导通路仍不够清楚。