血清基质金属蛋白酶-13联合血小板因子-4与miR-29检测在多发性骨髓瘤中的临床价值

目的探讨血清基质金属蛋白酶-13(MMP-13)联合血小板第4因子(PF4)、微小RNA-29(miR-29)在多发性骨髓瘤(MM)中的临床价值。方法收集2018年2月至2020年1月于本院确诊并治疗的MM患者80例作为病例组,另外选取同期本院体检健康者80例作为对照组。根据患者治疗后的效果,又将病例组患者分为难治组(32例)和缓解组(48例)。比较各组人群MMP-13、PF4和miR-29水平。利用受试者工作特征(ROC)曲线对三者单项及联合诊断MM的临床价值进行分析。结果病例组血清MMP-13和miR-29水平高于对照组,而病例组血清PF4水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,缓解组患者血清MMP-13和miR-29水平均低于难治组,缓解组患者血清PF4水平高于难治组,差异均有统计学意义(P<0.05)。缓解组治疗后血清MMP-13和miR-29水平较治疗前均降低,缓解组治疗后血清PF4水平较治疗前增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,缓解组患者血清MMP-13和miR-29水平均低于难治组,而缓解组患者血清PF4水平高于难治组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清MMP-13、PF4和miR-29联合检测用于区分MM患者与健康者的AUC为0.924(95%CI:0.868~0.979,P<0.001),灵敏度为82.5%,特异度为94.6%;血清MMP-13、PF4和miR-29联合检测用于区分缓解组与难治组的AUC为0.889(95%CI:0.822~0.971,P<0.001),灵敏度为90.7%,特异度为77.4%。结论血清MMP-13、PF4和miR-29在MM诊断及疗效评估中的具有一定价值。

miR-143调控基质金属蛋白酶-13表达对骨肉瘤细胞迁移及侵袭的影响

目的:探究miR-143对基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase,MMP-13)表达的调节作用及其对骨肉瘤细胞迁移及侵袭能力的影响。方法:采用96孔板培养小鼠骨肉瘤细胞系143B细胞,设立空白组、阴性组、阳性组、干预组。空白组不做特殊处理,阳性组加入50μg miR-143 mimic,阴性组加入等量mimic NC(miR-143 mimic的对照序列),干预组加入50μg miR-143 mimic及10μg MMP-13蛋白,继续培养3~6 h,最后吸出血清处理0.5 h。分别采用荧光定量PCR和Western-blot测定各组miR-143和MMP-13蛋白表达,采用Transwell、划痕实验测定细胞的侵袭与迁移能力。结果:阳性组及干预组MMP-13蛋白表达量明显低于空白组,阳性组低于干预组(P<0.05);空白组、阴性组、阳性组及干预组每个视野的侵袭细胞数均值分别为(1 000.01±44.77)、(959.25±46.32)、(245.04±4.33)、(634.06±33.78)个;阳性组及干预组划痕愈合率均明显低于空白组,阳性组低于干预组(P<0.05)。结论:MMP-13是miR-143作用的一个靶点,可以通过抑制MMP-13表达降低骨肉瘤细胞的迁移及侵袭能力。

电针对兔膝骨关节炎软骨细胞基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的:探讨电针对兔膝骨关节炎(KOA)模型软骨细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响。方法:30只新西兰大耳兔随机分为正常组、模型组及电针治疗组。正常组不造模,模型组和电针治疗组均采用左膝关节伸直位管型石膏固定法,建立KOA模型。喂养6周后,电针组电针治疗10d。各组均取股骨内侧髁软骨,观察软骨细胞及MMP-13的变化。结果:按Mankin评分比较软骨结构,各组间差异有显著性(P<0.05)。正常组MMP-13未检出,模型组MMP-13检出率较高,电针治疗组MMP-13检出率下降。MMP-13在KOA软骨细胞中的表达与正常组差异有显著性意义,电针治疗组与模型组差异有显著性意义(P<0.01)。结论:电针治疗促使兔骨关节炎模型软骨细胞重新排列,减少软骨细胞中MMP-13表达,对OA治疗有一定作用。

基质金属蛋白酶-13的测定在骨关节炎中作用的研究进展

骨关节炎是在复杂的生物学和力学因素共同作用下,软骨细胞、细胞外基质、软骨下骨三者合成与降解失衡的一种慢性、进行性疾病,其病因和病理机制目前尚未完全明确,但基质金属蛋白酶-13(MMP-13)对Ⅱ型胶原所组成三螺旋结构的降解和破坏被认为是OA发生发展的关键环节,MMP-13抑制剂的研究将会为OA的治疗提供新的思路和方法。

青藤碱关节腔注射对膝骨关节炎兔软骨和滑膜组织形态学及基质金属蛋白酶-13和软骨寡聚基质蛋白的影响

目的观察青藤碱关节腔注射对膝骨关节炎模型兔关节软骨和滑膜组织形态学及血清和关节液中基质金属蛋白酶(MMP)-13和软骨寡聚基质蛋白(COMP)含量的影响,探讨青藤碱治疗膝骨关节炎的部分作用机制。方法 38只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组和青藤碱组。空白组不予任何处理,模型组、透明质酸钠组和青藤碱组通过木瓜蛋白酶关节腔注射法诱导膝骨关节炎模型后,分别用生理盐水、透明质酸钠和青藤碱干预。5周后取关节软骨及滑膜HE染色并进行组织学评分,ELISA检测血清及关节液中MMP-13和COMP的含量。结果模型组软骨Mankin's评分和滑膜组织病理学评分显著高于空白组,青藤碱组软骨Mankin's评分和滑膜组织病理学评分显著低于模型组(P<0.01);模型组血清及关节液中MMP-13和COMP含量较空白组显著升高(P<0.01);青藤碱组血清、关节液中MMP-13含量较模型组显著降低,关节液中COMP含量较模型组降低(P<0.05,P<0.01)。结论青藤碱具有改善滑膜炎症、延缓关节软骨退变进程的作用。

应用蛋白质芯片检测骨性关节炎患者基质金属蛋白酶-13的初步研究

目的:探讨应用蛋白质芯片技术检测骨性关节炎(OA)患者关节液和血清中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的方法。方法:应用低密度蛋白质芯片方法同时检测32例OA患者关节液和血清中MMP-13表达水平,24例正常关节作为对照组,进行蛋白质芯片荧光强度的对比研究。结果:OA患者关节液和血清中的MMP-13在蛋白质芯片上的荧光强度明显高于对照组关节液的荧光强度(P<0.001)。OA患者关节液中MMP-13在蛋白质芯片上的荧光强度明显高于其血清的荧光强度(P<0.001)。结论:OA患者关节液和血清中MMP-13表达明显高于对照组。应用低密度的蛋白质芯片技术检测OA患者关节液及血清中MMP-13的水平具有一定临床应用价值。

去卵巢对兔膝关节软骨及基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的探讨去卵巢对兔膝关节软骨及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达的影响。方法将20只新西兰大白兔随机分为去势组和正常对照组,每组10只。去势组新西兰大白兔行双侧卵巢切除,正常对照组新西兰大白兔不作任何处理。去除卵巢10 w后,取血检测血清雌二醇水平;取左股骨髁关节软骨切片观察软骨形态,进行Mankin评分,免疫组化检测MMP-13蛋白的表达;取右股骨髁关节软骨进行RT-PCR检测MMP-13mRNA的表达。结果去势组大白兔血清雌二醇水平较正常对照组显著下降(P<0.01);去势组大白兔关节软骨出现明显的退变;去势组Mankin评分比正常对照组显著增高(P<0.01);去势组的MMP-13蛋白表达比正常对照组显著增高(P<0.01),去势组MMP-13 mRNA表达比正常对照组增高。结论去卵巢兔血清雌二醇水平明显降低,膝关节软骨退变,关节软骨中MMP-13表达增高。

骨痹汤对膝骨关节炎大鼠软骨中基质金属蛋白酶-13及转化生长因子-β_(1)的影响

目的:探讨骨痹汤对膝骨关节炎大鼠软骨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))的影响。方法:选择健康SD大鼠40只,建立膝骨关节炎模型,随机分为对照组和观察组,每组20只。对照组造模术后不予治疗,观察组自造模成功后,给予骨痹汤熏蒸治疗,疗程4个周。治疗后,比较每组大鼠痛阈、膝关节周径及膝关节活动度情况。采用免疫组织化学法检测各组大鼠关节软骨中MMP-13及TGF-β_(1)表达变化情况。结果:治疗后,观察组痛阈、膝关节周径及膝关节活动范围比对照组明显改善(P<0.05);治疗后,观察组MMP-13表达水平明显下降,且明显低于对照组(P<0.05);治疗后,观察组TGF-β_(1)表达水平明显升高,且明显高于对照组(P<0.05)。结论:骨痹汤可改善膝骨关节炎的疼痛,减少软骨中MMP-13的表达,延缓骨性关节炎的发展,并明显上调TGF-β_(1)的表达,促进软骨修复。

HMGB1促进类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞表达基质金属蛋白酶-13

目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)能否激活类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)表达基质金属蛋白酶-13(MMP-13)。方法:HMGB1与RASF共孵育后,采用流式细胞术、实时RT-PCR、ELISA分别检测细胞周期和MMP-13的基因表达量以及蛋白表达水平。结果:1μg/ml HMGB1刺激滑膜成纤维细胞3小时,MMP-13 mRNA的表达明显增加;HMGB1刺激滑膜成纤维细胞48小时后MMP-13蛋白分泌增高,并且滑膜成纤维细胞增殖周期速度加快。结论:HMGB1可以激活滑膜成纤维细胞,使其增殖周期速度加快,MMP-13表达增加,提示HMGB1通过作用于滑膜成纤维细胞表达MMP-13加强关节结构破坏。

基质金属蛋白酶-13的研究进展

基质金属蛋白酶-13是人体内最重要的蛋白酶之一,属于基质金属蛋白酶超家族成员中胶原酶的一种。其主要功能是分解细胞外基质,参与人体多种生理和病理过程。该因子在人体内较多细胞中都能表达,其表达又受细胞生长因子、激素和基质金属蛋白酶组织抑制剂等因子的调节。基质金属蛋白酶-13与成人慢性牙周炎的发生发展密切相关,且作用底物主要是Ⅰ～Ⅲ型胶原。

高体积分数氧致慢性肺疾病新生大鼠肺组织基质金属蛋白酶-13和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的意义

目的观察高体积分数氧(高氧)致慢性肺疾病(CLD)新生大鼠肺组织基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的动态变化,探讨CLD发病与MMPs的关系。方法将新生大鼠于出生24h内随机分为高氧组和对照组,每组各40只;于出生第1、3、7、14、21天处死,留取其肺组织,苏木素-伊红(HE)、Masson染色,酶联免疫吸附法检测其Ⅰ型胶原(ColⅠ)表达;免疫组织化学法检测其肺组织MMP-13和TIMP-1的表达。结果随高氧暴露时间的延长,新生大鼠肺组织光镜下表现为次级隔数目和肺泡数目减少,终末气腔扩张,肺泡间隔增宽。随高氧暴露时间的延长,肺组织ColⅠ型胶原蛋白沉积在第14天较对照组显著增加(P<0.01),第21天差异更为显著(P<0.001)。MMP-13和TIMP-1主要在上皮细胞、内皮细胞、间质细胞、肺泡巨噬细胞等细胞胞质中表达;第21天高氧组肺组织MMP-13表达与对照组比较明显下降(P<0.05),其余时间点二组比较无明显差异(Pa>0.05),TIMP-1表达随高氧暴露时间延长逐渐增加,高氧组第14、21天较对照组表达均显著增加(Pa<0.01)。结论高氧致CLD新生大鼠肺组织存在MMP-13/TIMP-1表达失衡,是高氧后期以ColⅠ为代表细胞外基质异常沉积的关键。

基质金属蛋白酶-13、白细胞介素-1在大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、白细胞介素-l（IL-1）在去势大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及临床意义。方法将30只3月龄Sprague-Dawley（SD）大鼠，随机均分为基础对照组（BL组）、去卵巢手术组（OVX组）、假手术组（sham组），每组各10只；BL组在手术开始前处死大鼠，其余两组术后3个月处死大鼠，并与处死前10d和4d分别给予显色双荧光标记；L2-4椎体进行骨密度及硬组织切片分析，k4-5，进行HE常规染色、VG特殊染色及免疫组化检测MMP-13、IL-1的表达，观察椎间盘的病理学改变并据评分标准对腰椎间盘的退变程度（LVD）进行评分。结果大鼠腰椎骨量的下降及椎间盘的退化，OVX组较Sham组严重（P〈0．05）：免疫组化结果显示。OVX组与sham组比较，大鼠椎间盘中MMP-13、IL-1表达明显升高（P〈0．05）。结论MMP-13、IL-1表达量的增加是腰椎间盘退变形成和发展的重要因素。

灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的探讨灵仙通络方对C518大鼠膝关节退变软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响。方法选取C518大鼠膝关节软骨细胞株,随机分为中药组(灵仙通络方)、西药组(氨糖美辛)和对照组(氯化钠溶液),进行培养、诱导退变等处理,于给药后第1、2、3 d,分别检测中药组、西药组和对照组不同浓度下对软骨细胞增殖、COL-Ⅱ及MMP-13表达的影响。结果同一时间点的中药组、西药组不同浓度之间噻唑蓝(MTT)值差异有统计学意义(P<0.01)。对照组不同浓度氯化钠溶液的MTT值差异不具有统计学意义(P>0.05)。在COL-Ⅱ免疫组化染色中,中药组与西药组和对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),且中药组优于西药组(染色指数χ2=16.26,df=2,P<0.01)。在MMP-13免疫组化染色中,对照组较中药组、西药组差异有统计学意义(P<0.01),且中药组优于西药组(染色指数χ2=54.31,df=2,P<0.01)。结论 C518大鼠膝关节退变软骨细胞经灵仙通络方干预后能够促进其增殖,调节COL-Ⅱ、MMP-13的表达,延缓膝关节骨性关节炎疾病的发展进程。

过敏性紫癜患儿血清基质金属蛋白酶-13、白细胞介素-9和肿瘤坏死因子-α表达水平变化及意义

目的:探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-9(IL-9)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平变化及临床意义。方法:选取HSP患儿96例为HSP组,选择同期进行健康体检的儿童96例为对照组。检测两组血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平。给予HSP患儿药物综合治疗后,比较不同疗效患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平。采用Spearsman法分析HSP患儿预后与上述指标水平的相关性。采用Logistic回归模型分析影响HSP患儿预后的因素。结果:HSP组血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平高于对照组(均P<0.05)。在HSP组中,治疗后痊愈54例,显效36例,无效6例,有效率为93.75%。有效患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平低于无效患儿(均P<0.05)。Spearsman相关性分析显示,HSP患儿预后与血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平呈正相关(r=0.722、0.542、0.443,均P<0.05)。Logistic回归分析显示,血清MMP-13、IL-9和TNF-α表达水平均为患儿预后的影响因素(均P<0.05)。结论:HSP患儿血清MMP-13、IL-9和TNF-α呈现高表达状况,与患儿预后存在相关性,也是影响患儿预后的重要因素。

软骨损伤患者关节镜手术及关节腔内注射玻璃酸钠后关节液中基质金属蛋白酶-13表达水平变化的研究

目的探讨行关节镜手术并关节腔内注射玻璃酸钠后的软骨损伤患者关节液中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达水平的变化。方法对42例经Outerbridge软骨损伤评分法分组的软骨损伤患者,应用低密度蛋白质芯片方法检测各组患者行关节镜手术前的关节液及术后1、2、3、4周注射玻璃酸钠后的关节液中MMP-13的荧光强度。结果软骨损伤严重组(Ⅳ度、Ⅲ度)的行关节镜手术及玻璃酸钠治疗后的第2周,关节液内MMP-13表达水平开始显著下降,并持续到第5周。软骨损伤较轻组(0度、Ⅰ度)的关节液中MMP-13表达水平在第4、5周与术前的比较有统计学差异(P<0.05)。在第5周时,软骨损伤严重组(Ⅳ度、Ⅲ度)关节液内MMP-13表达水平高于软骨损伤较轻组(0度、Ⅰ度)。结论经关节镜手术、关节腔内注射玻璃酸钠治疗后软骨损伤严重的患者关节液内MMP-13表达水平下降较软骨损伤轻的更明显,MMP-13表达水平下降的意义对软骨代谢水平评价及临床疗效判定有一定的指导价值。

慢性肝病患者转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶-13表达与临床价值

目的:分析慢性肝病患者转化生长因子(TGF)-β1、肿瘤坏死因子(TNF)-α及基质金属蛋白酶(MMP)-13的表达水平及其相互关系。方法:采用双抗体“夹芯”酶联免疫吸附法,对慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者及正常对照血TGF-β1、TNF-α及MMP-13进行检测,并分析其表达特点与临床价值。结果:慢性肝病患者血TGF-β1、TNF-α及MMP-13表达水平均高于正常对照组;肝癌患者组血清TGF-β1和TNF-α表达水平均明显高于肝硬化组和慢性肝病组(P<0.01);肝硬化组与肝癌患者组血MMP-13水平显著高于慢性肝炎组(P<0.01);慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者的血清中TNF-α和TGF-β1表达水平呈显著相关性,但MMP-13水平与TNF-α、TGF-β1间无明显相关性。结论:TGF-β1、TNF-α和MMP-13在肝癌发展过程中过度表达,动态分析有助于肝癌的诊断和鉴别。

应用组织芯片研究基质金属蛋白酶-13在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)在乳腺癌发生、发展过程中的临床意义。方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学SP法检测MMP-13在97例乳腺癌和39例乳腺纤维腺瘤中的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果:乳腺癌中MMP-13的表达(65.98%)显著高于乳腺纤维腺瘤(23.08%),其表达与腋窝淋巴结转移、临床分期有关,而与患者年龄、肿瘤大小无关。结论:MMP-13与乳腺癌的发生、发展有着密切关系,可作为评估乳腺癌转移和预后的重要生物学指标。

基质金属蛋白酶-13过表达抑制大鼠肝星状细胞中I型胶原表达

目的肝纤维化的主要病理变化是细胞外基质的沉积与降解障碍,本研究旨在观察大鼠肝星状细胞过表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)后肝纤维化相关指标的变化。方法构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒,并转染大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),荧光定量PCR与Western blotting方法分别检测MMP-13、CollagenI基因与蛋白水平的表达。结果成功构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒dl6-95-MMP-13;dl6-95-MMP-13转染大鼠HSC细胞7d后,荧光定量PCR结果显示,MMP-13基因转录水平明显增加,而CollagenI在基因转录水平有轻度增加;Western blotting结果显示转染7d后,酶原及活化形式的MMP-13表达明显增加,尤其是活化形式的MMP-13;转染后的大鼠HSC中CollagenI蛋白表达明显下降。结论大鼠HSC高表达MMP-13后显著抑制CollagenI蛋白的表达,其机制主要通过发挥其酶活性降解CollagenI蛋白,而对CollagenI在基因水平的表达无显著影响。

骨性关节炎中白介素-7及基质金属蛋白酶-13的表达

目的探讨细胞因子白介素-7(IL-7)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在骨性关节炎发生发展中的作用及意义。方法应用免疫组织化学技术及酶联免疫吸附方法对骨性关节炎29例、半月板及交叉韧带损伤患者17例(对照组)检测IL-7及MMP-13在滑膜组织中的表达情况及关节滑液中的蛋白含量,分析检测结果。结果IL-7及MMP-13在骨性关节炎滑膜组织中表达强度及滑液中蛋白含量高于对照组(P<0.01),IL-7及MMP-13在滑液中的蛋白含量显著相关(r=0.511,P<0.01),且两者与年龄也有相关性(r=0.454;r=0.583,P<0.01)。结论IL-7及MMP-13与骨性关节炎的发生发展有关,IL-7可能通过刺激滑膜细胞分泌MMP-13发挥关节破坏作用。

热疗对人Tca8113细胞侵袭能力及基质金属蛋白酶-13和钙离子结合蛋白S100A4表达的抑制作用

目的研究热疗对Tca8113细胞的侵袭能力及侵袭转移相关蛋白——基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及钙离子结合蛋白S100A4(S100A4)表达的影响。方法 Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,用体外侵袭实验评价各组细胞的侵袭能力;Tca8113细胞爬片经43℃分别加热0、40、80、120 min,用免疫细胞化学染色法检测各组细胞MMP-13及S100A4的表达变化;Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,Western blot法检测各组细胞MMP-13及S100A4的表达变化。结果随加热时间延长或加热温度升高,Tca8113细胞侵袭率(即侵袭细胞数占全部细胞的百分比)依次递减,除43℃加热40、80 min组之间及41、43℃加热80 min组之间的差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05);随着加热时间延长,Tca8113细胞的细胞浆内MMP-13及S100A4的表达强度呈现递减趋势;随着加热时间延长或加热温度升高,Tca8113细胞的MMP-13及S100A4含量逐渐降低,除43℃加热40、80 min组之间及41、43℃加热80 min组之间外,其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论热疗能抑制Tca8113细胞的侵袭能力,其机制可能与热疗抑制了细胞内MMP-13及S100A4的表达有关。