脑脊液基质金属蛋白酶9水平和基质金属蛋白酶9/基质金属蛋白酶组织抑制剂1比值与结核性脑膜炎病情严重程度的相关性及对预后的预测价值研究

目的 探讨脑脊液基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平和MMP-9/基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)比值与结核性脑膜炎病情严重程度的相关性及对预后的预测价值。方法 选择2021年1月至2023年2月在湖南省胸科医院住院的结核性脑膜炎患者72例为观察组,以同期住院的非肿瘤非感染性头痛患者52例为对照组。比较2组患者脑脊液MMP-9水平和MMP-9/TIMP-1比值。根据改良的英国医学研究理事会结核性脑膜炎分期标准将观察组患者分为Ⅰ期组、Ⅱ期组、Ⅲ期组,比较3组患者MMP-9水平和MMP-9/TIMP-1比值。根据预后情况将观察组患者分为预后良好组和预后不良组,比较2组MMP-9水平和MMP-9/TIMP-1比值,并以受试者工作特征(ROC)曲线法评估各指标对结核性脑膜炎的预后预测价值。结果 观察组MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值均大于对照组[(96±21)μg/L比(50±12)μg/L、(1.21±0.33)比(0.67±0.15)](均P<0.05),但2组间TIMP-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同严重程度结核性脑膜炎患者MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值差异均有统计学意义,且均呈Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期(均P<0.05);不同严重程度结核性脑膜炎患者TIMP-1水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。相关性分析结果显示,结核性脑膜炎病情严重程度与MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值均呈正相关(r=0.861、P=0.012;r=0.731、P=0.008),与TIMP-1无相关性(r=0.220,P=0.063)。预后不良组患者MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值均高于预后良好组(均P<0.05),2组TIMP-1水平差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,MMP-9水平、MMP-9/TIMP-1比值预测结核性脑膜炎患者预后不良的截断值分别为112.04μg/L、1.41,曲线下面积分别为0.803、0.905(均P<0.05)。结论 结核性脑膜炎患者脑脊液MMP-9水平、MMP-9/TIMP-1比值明显升高,且MMP-9水平、MMP-9/TIMP-1比值与结核性脑膜炎的病情严重程度呈正相关,并可用于预测患者预后。

基质金属蛋白酶1、3,基质金属蛋白酶组织抑制剂1和miR-29在大鼠肺纤维化中及活性维生素D3处理后的表达与作用

目的:探讨大鼠肺纤维化发生发展中基质金属蛋白酶1(MMP1)、MMP3、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)及miR-29的表达和作用以及活性维生素D3[1,25(OH)_2D_3]处理对这些基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为预防组和治疗组。预防组分为对照组Ⅰ、模型组Ⅰ和给药组Ⅰ,治疗组分为对照组Ⅱ、模型组Ⅱ和给药组Ⅱ。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ经气管注入博莱霉素,对照组Ⅰ/Ⅱ经气管注入生理盐水。预防组和治疗组分别于术后第2和14天腹腔注射给药,给药组给予活性维生素D3,模型组给予活性维生素D3溶剂,对照组给予生理盐水。预防组的各组分别于术后第14、21、28天处死大鼠取材,治疗组的各组分别于术后第21和28天处死大鼠取材。实时定量PCR检测大鼠肺组织中miR-29a及TIMP1 mRNA表达水平,免疫组织化学检测组织中MMP1、MMP3和TIMP1的表达水平。结果:模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中的MMP1、MMP3和TIMP1的表达均明显高于相同时间点对照组Ⅰ/Ⅱ中的表达,而miR-29a的表达明显低于相应的对照组Ⅰ/Ⅱ;给药组Ⅰ/Ⅱ中MMP1、MMP3和TIMP1的表达均低于相应时间点的模型组Ⅰ/Ⅱ的表达,而给药组Ⅰ/Ⅱ中miR-29a的表达则高于模型组Ⅰ/Ⅱ中的表达。结论:MMP1、MMP3、TIMP1和miR-29在大鼠肺纤维化发生发展中具有重要作用,活性维生素D3可以促进miR-29表达,抑制MMP1、MMP3、TIMP1的表达;可能是通过miR-29调节包括MMP1、MMP3、TIMP1在内的多种靶基因来发挥抑制纤维化的作用。

基质金属蛋白酶9／组织金属蛋白酶抑制剂1在鼻致敏豚鼠模型鼻黏膜重塑中的作用

目的长期慢性炎症导致鼻黏膜重塑特征表现为基膜内胶原沉积。文中探讨与胶原沉积相关的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9/组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP)-1在鼻致敏豚鼠模型鼻黏膜重塑中的作用。方法 Hartley系豚鼠32只,随机分为4组,即实验2w组、6w组、12w组和对照组。卵清蛋白(ovalbumin,OVA)制备变应性鼻炎动物模型,抗原刺激分别持续2w、6w和12w。鼻黏膜组织切片,采用HE染色,计数鼻黏膜嗜酸性粒细胞数量。免疫组化法检测鼻黏膜Ⅰ型胶原、MMP-9和TIMP-1含量。结果①实验2w组、实验6w组、实验12w组和对照组下鼻甲嗜酸粒细胞计数分别为:50.75±11.75、56.63±7.46、66.13±8.72和8.00±3.91(个/高倍视野),与对照组比较,其他各组差异有统计学意义(P<0.01)。②与对照组比较,实验2w组、6w组、12w组鼻黏膜的Ⅰ型胶原、MMP-9和TIMP-1的吸光度随抗原刺激时间延长均有升高趋势;实验各组的MMP-9/TIMP-1吸光度比值与对照组比较有下降趋势,尤其在实验12w组,其差别有统计学意义(P<0.01)。结论随着抗原刺激延长,鼻黏膜慢性炎症导致与重塑有关的MMP-9和TIMP-1免疫活性增强,MMP-9/TIMP-1的失衡,从而使得细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中胶原蛋白沉积。

胶原酶/组织金属蛋白酶抑制剂-1免疫活性及其在慢性阻塞性肺疾病肺结构改变中的作用

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型支气管肺组织中胶原酶[间质胶原酶(MMP1)、多形核细胞胶原酶(MMP8)]及其天然抑制因子组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)的表达情况,探讨胶原酶在COPD发病中的作用。方法选用10周龄Wistar大鼠随机分为对照组及模型组,通过气道内注入脂多糖(LPS)结合烟熏法建立COPD大鼠模型。测定肺功能后,取肺组织石蜡切片HE染色,观察肺组织病理改变,免疫组织化学法检测MMP1、MMP8和TIMP1在肺泡和支气管的表达。结果模型组大鼠肺组织类似于人的COPD病理学改变;光镜下表现为小叶中央型肺气肿,单位面积肺泡数减少,肺泡面积增大。肺功能FEV03/FVC%降低、吸气相气道阻力(Ri)、呼气相气道阻力(Re)增加。(2)MMP1、MMP8和TIMP1在两组支气管和肺组织均有表达,表达细胞为上皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞及肺实质细胞;与对照组比较,模型组支气管中MMP1、MMP8和TIMP1表达增强,在肺组织中三种酶蛋白的表达亦增强(P<005)。肺泡面积和肺组织MMP1、MMP8免疫活性强度呈正相关,与TIMP1则无显著相关。MMP1和TIMP1的表达活性强度与支气管平滑肌层面积呈正相关,MMP8无显著相关性。结论COPD大鼠支气管和肺组织表达MMP1、MMP8和TIMP1增多,二者间表达可能不平衡,参与了COPD肺结构重塑的过程。

外周血组织金属蛋白酶抑制剂1癌胚抗原细胞角蛋白-19片段对周围型肺癌患者术后复发转移的预测价值

目的探讨外周血组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白-19片段(CYFRA21-1)对周围型肺癌患者术后复发转移的预测诊疗价值。方法选择2018年10月至2021年10月于河南省邓州市中心医院进行手术切除治疗且在术后1年内出现复发转移的周围型肺癌患者42例,将其作为复发转移组,选择同期在院内接受手术切除治疗且在1年内未出现复发转移的周围型肺癌患者65例,将其作为未复发转移组,另选择45名同期于院内进行健康体检的人群将其作为健康对照组。将3组研究对象基线资料进行对比,将3组研究对象术后TIMP-1、CEA、CYFRA21-1水平进行对比,采用多因素Logistic回归分析对周围型肺癌患者术后复发转移的危险因素进行分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线对TIMP-1、CEA、CYFRA21-1水平预测周围型肺癌患者术后复发转移的价值进行分析。结果复发转移组患者中有吸烟史、TNM分期为Ⅲ期的患者占比64%(27/42)、57%(24/42)相较于未复发转移组升高35%(23/65)、35%(23/65)(P均<0.05);复发转移组患者TIMP-1、CEA、CYFRA21-1水平(249±30)pg/ml、(16.0±4.8)ng/ml、(4.6±1.2)ng/ml均比未复发转移组和健康对照组(150±30)pg/ml、(3.4±1.5)ng/ml、(3.0±1.4)ng/ml和(141±19)pg/ml、(1.3±0.4)ng/ml、(1.3±0.3)ng/ml高(P均<0.05);多因素Logistic回归分析结果得出,周围型肺癌患者术后复发转移的危险因素为TIMP-1、CEA、CYFRA21-1(OR=1.904、2.020、1.775,P均<0.05);TIMP-1、CEA、CYFRA21-1水平预测周围型肺癌患者术后复发转移的AUC值分别为0.811、0.735、0.774,而将上述指标联合检测的AUC值为0.914,高于单独检测上述3项指标(P均<0.05)。结论周围型肺癌患者术后复发转移组患者TIMP-1、CEA、CYFRA21-1水平相较于未复发转移组患者升高,且周围型肺癌患者术后复发转移的危险因素为TIMP-1、CEA、CYFRA21-1,对3项指标联合检测应用于周围型肺癌患者术后复发转移的预测价值比单独检测的价值高。

他汀类药物对基质金属蛋白酶-1及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1的影响

目的观察阿托伐他汀(立普妥)、普伐他汀(普拉固)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响。方法培养的大鼠腹腔巨噬细胞中先加入10ng/ml的白介素-1β(IL-1β),促进MMP-1的分泌,24h后加入不同浓度的阿托伐他汀、普伐他汀(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L、1×10-5mmol/L、1×10-4mmol/L),继续孵育24h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测培养上清液中的MMP-1及TIMP-1的浓度;取阿托伐他汀10-5mmol/L浓度,分别在6h、24h、48h测培养上清液中的MMP-1的浓度。结果随着药物浓度的增加(1×10-7mmol/L、1×10-6mmol/L、1×10-5mmol/L、1×10-4mmol/L),阿托伐他汀对大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1的抑制作用逐渐增强(加药组MMP-1分泌较对照组分别减少17.36%、19.40%、26.54%、33.70%),与对照组有显著统计学差异,而不同浓度的普伐他汀虽使大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1略有降低,但与对照组比较无统计学差异,且各组间也无统计学差异;两组他汀使大鼠腹腔巨噬细胞TIMP-1的分泌均略有降低,但与对照组比较,均无统计学意义;随着药物作用时间的延长(6h、24h、48h),阿托伐他汀(1×10-5mmol/L)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1的抑制作用逐渐增强(加药组MMP-1分泌较对照组分别减少11.96%、26.54%、32.77%),与对照组有显著统计学差异。结论阿托伐他汀呈时间剂量依赖性抑制IL-1β介导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1,而对TIMP-1的分泌无影响;普伐他汀对IL-1β介导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1无影响,对TIMP-1的分泌也无影响。

盐酸氨基葡萄糖联合氟比洛芬对增生性膝骨关节炎患者高迁移率族蛋白B1人类成纤维生长因子-2组织金属蛋白酶抑制剂-1水平的影响

目的 探讨盐酸氨基葡萄糖联合氟比洛芬对增生性膝骨关节炎患者高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、人类成纤维生长因子-2(FGF-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响。方法 选取2021年6月至2023年1月陆军第七十二集团军医院确诊增生性膝骨关节炎患者100例,采用随机数字表法分为对照组和观察组各50例,对照组接受盐酸氨基葡萄糖治疗,观察组联合应用氟比洛芬治疗,2组连续治疗6周。比较2组临床疗效,比较2组视觉模拟评分法(VAS)、Lysholm膝关节评分系统(LKSS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评分、HMGB1、FGF-2、TIMP-1水平、不良反应发生率。结果 与对照组(74%)比较,观察组临床总有效率(90%)升高(P<0.05);与治疗前比较,治疗后2组VAS、WOMAC评分降低,LKSS评分升高,并且观察组VAS、WOMAC评分低于对照组,LKSS评分高于对照组(P<0.05);治疗后2组HMGB1水平比治疗前降低,FGF-2、TIMP-1水平升高,并且观察组HMGB1低于对照组,FGF-2、TIMP-1水平高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 盐酸氨基葡萄糖联合氟比洛芬能够有效治疗增生性膝骨关节炎,同时还能降低HMGB1水平,升高FGF-2、TIMP-1水平,且不良反应少,具有较高的临床参考价值。

金属蛋白酶组织抑制剂1在抗纤复方Ⅰ号防治酒精性肝病中的作用

目的:研究抗纤复方Ⅰ号对酒精性肝病大鼠的预防及治疗作用及金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)的动态变化及表达。方法:用灌胃的方法制备大鼠酒精性肝病的动物模型;在大鼠灌胃4,8,12,16周分别麻醉处死大鼠,留取标本进行HE染色、Masson胶原染色,应用免疫组织化学技术、免疫电镜技术及流式细胞术检测TIMP-1的动态变化和表达。结果:抗纤复方Ⅰ号预防及治疗组的肝组织胶原含量明显低于酒精性肝病组(P<0.05),TIMP-1水平也低于酒精性肝病组(P<0.05)。免疫组化可见酒精肝病组TIMP-1主要位于血管内皮细胞、窦内皮细胞及肝窦细胞的胞浆。结论:抗纤复方Ⅰ号可以有效地预防及治疗酒精性肝病,其机制可能与抑制TIMP-1的表达有关。

基质金属蛋白酶9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2在子宫剖宫产疤痕中的表达和相关性

目的研究基质金属蛋白酶9（MMPs-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂1，2（TIMP-1，2）在子宫剖宫产疤痕愈合中的影响。方法收集2009年8月～2011年11月在我院收治的有严重并发症的疤痕子宫妊娠病人22例（子宫刮宫产疤痕早期8例妊娠（CSP）、因胎盘粘连或植人而行子宫切除术的疤痕子宫足月妊娠病例14例）；选择同期孕期检查正常无并发症疤痕子宫足月妊娠病人38例作为对照1组；同期孕期检查正常、无任何并发症因社会因素要求剖宫产的足月妊娠病人32例作为对照2组。采用免疫组织化学EnVision二步法检测3组中MMPs-9和TIMP—1，2的表达，并对其表达进行相关性分析。结果MMPs-9、TIMP-1在3组间的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。TIMP-2在3组间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。Spearman等级相关分析显示，在疤痕组织中MMPs-9的表达随疤痕愈合不良呈正相关，相关系数分别是0．309、0．643。随着疤痕愈合不良程度加重，MMPs-9的表达逐渐增强，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论子宫疤痕愈合不良、CSP可能和损伤修复中MMPs-9、TIMP—1的表达失衡有关。

辛伐他汀、丙丁酚和卡托普利在动脉粥样硬化斑块消退中的作用及与金属蛋白酶1和组织抑制物1基因表达的关系

观察药物消退和稳定动脉粥样硬化的作用并探讨基质金属蛋白酶 1及基质金属蛋白酶组织抑制物 1的表达。对实验性动脉粥样硬化兔 ,分别给予辛伐他汀、丙丁酚和卡托普利治疗 12周。结果发现 ,3种药物均可显著降低血脂 ,以丙丁酚和辛伐他汀效果较强 ;在停止喂胆固醇后 ,自然消退组内中膜进一步增厚 ,3种药物均可显著消退动脉粥样硬化 ;药物治疗组的胶原Ⅰ、基质金属蛋白酶 1及基质金属蛋白酶组织抑制物 1的mRNA表达水平均下降 ,其中丙丁酚组金属蛋白酶 1的表达下降有统计学意义。 3种药物均有消退动脉粥样硬化的作用 ,以辛伐他汀最佳 ;而药物通过减少基质金属蛋白酶 1表达 ,相对减少基质金属蛋白酶 1/基质金属蛋白酶组织抑制物 1的表达比例 ,起到稳定斑块的作用。

凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

目的:探讨中药凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿的作用及其机制。方法:采用自体血纹状体注射方法制备大鼠脑出血模型。实验大鼠分为假手术组、模型组和凉血通瘀方组。凉血通瘀方组给予凉血通瘀煎剂灌胃,余两组给予生理盐水灌胃,每日1次。脑出血后24、48、72和120 h观察大鼠脑水肿情况,明胶酶谱法检测脑血肿周围组织内基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)活性,荧光定量实时聚合酶链式反应法检测MMP-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissueinhibitor ofmetalloproteinase-1,TIMP-1)的表达水平。结果:凉血通瘀方组大鼠脑水肿程度在各时间点均显著低于模型组(P<0.01),仅在72 h其脑组织含水量高于假手术组(P<0.01)。与模型组相比,凉血通瘀方组的MMP-9酶原水平及活性均显著降低,其mRNA水平亦在脑出血后48、72、120 h低于模型组(P<0.01),而TIMP-1 mRNA水平在各时间点均显著升高(P<0.01)。结论:凉血通瘀方可能通过上调TIMP-1表达来抑制MMP-9水平,从而减轻脑出血大鼠脑水肿。

肺纤方对博莱霉素大鼠肺纤维化模型基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2的影响

目的:观察肺纤方抗大鼠肺纤维化肺基质重建的作用。方法:气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1、2的变化。结果:肺纤方可以显著降低血清基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2。结论:肺纤方具有抗大鼠肺纤维化基质重建作用。

中青年脑梗死患者颈动脉粥样硬化及其血清基质金属蛋白酶-9、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1、超敏C反应蛋白水平的改变

目的研究中青年脑梗死患者颈动脉粥样硬化及其血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的改变。方法应用彩色多普勒超声仪探测42例急性脑梗死患者(ACI组)、29例无症状颈动脉硬化患者(ACA组)及17名健康体检者(NC组)的双侧颈动脉粥样硬化的情况。采用酶联免疫吸附法检测各组血清MMP-9和TIMP-1水平,免疫散射比浊法检测血清hs-CRP水平。结果 NC组均未检出颈动脉粥样硬化斑块。ACI组易损斑块的比例(69.2%)及检出率(47.6%)均明显高于ACA组(46.4%,20.7%)(均P<0.05)。ACI组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平及MMP-9/TIMP-1比值均明显高于ACA组(均P<0.05);ACA组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平均明显高于NC组(均P<0.05)。ACI组中,易损斑块亚组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平及MMP-9/TIMP-1比值均明显高于稳定斑块亚组(均P<0.05);稳定斑块亚组血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP水平均明显高于无斑块亚组(均P<0.05)。结论血清MMP-9、TIMP-1、hs-CRP可作为反映颈动脉粥样硬化及斑块稳定性的血清学指标。MMP-9/TIMP-1比值增高及颈动脉易损斑块可能提示中青年脑梗死的风险。

体外压力刺激对大鼠“足三里”穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E_2和胰岛素样生长因子1的影响

背景:腧穴筋膜结缔组织成纤维细胞是针推治疗操作过程中的主要受力组织细胞之一,细胞生物学行为的调整对腧穴发挥治疗作用的功能关系密切。目的:通过体外实验观察压力刺激对大鼠"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E2和胰岛素样生长因子1的影响。方法:体外培养大鼠"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞,随机分为空白对照组和压力刺激组。压力刺激组对细胞实施50kPa压力刺激,每次加力2h,每8h1次,共6次;空白对照组不加压。检测细胞外培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E2和胰岛素样生长因子1含量的变化,并计算基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的变化。结果与结论:"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞压力作用后,培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E2含量均增加(P<0.05或0.01),基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值增大(P<0.05),胰岛素样生长因子1变化无显著性意义。结果证实,压力刺激对腧穴筋膜组织成纤维细胞基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E2合成释放的调节,以及对基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的提高,可能是腧穴接受针灸推拿治疗后发挥"疏经通脉"作用的细胞生物力学原理之一。

二巯丙磺钠对百草枯急性中毒大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9 mRNA及其金属蛋白酶组织抑制剂-1 mRNA表达的影响

目的探讨二巯丙磺钠(DMPS)救治百草枯(PQ)急性中毒大鼠作用机制。方法120只雄性SD大鼠随机分为正常对照组,DMPS(200mg.kg-1,ip)对照组,PQ急性中毒(20mg.kg-1,ip)1,3,7,14和28d组以及DMPS干预(先给DMPS,15min后再给PQ)1,3,7,14和28d组。应用RT-PCR技术检测PQ急性中毒组大鼠及DMPS干预组大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA和金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)mRNA的表达。结果PQ急性中毒组早期肺组织毛细血管扩张充血,炎症细胞浸润,后期出现较大范围慢性炎症病灶,纤维组织增生。与正常对照组比,MMP-9mRNA明显升高,分别为1.13±0.06,1.32±0.04和1.10±0.06,0.85±0.06和0.75±0.05,TIMP-1mRNA明显升高,分别为1.14±0.08,1.29±0.05,1.61±0.09,1.83±0.13和1.73±0.08;7,14和28d MMP-9mRNA/TIMP-1mRNA比值明显低于正常对照,分别为0.68±0.03,0.46±0.04和0.43±0.06;DMPS干预后,MMP-9mRNA1,3和7d和TIMP-1mRNA1,3,7,14和24d表达低于PQ中毒组,MMP-9mRNA分别为1.05±0.03,1.17±0.05和0.93±0.09;TIMP-1mRNA分别为10.0±0.07,1.15±0.09,1.09±0.06,1.16±0.08和1.23±0.09;MMP-9mRNA/TIMP-1mRNA比值略低于DMPS对照组,但高于PQ中毒组,分别为0.85±0.05,0.63±0.04和0.58±0.02(均P<0.05)。结论DMPS可能通过下调大鼠肺组织MMP-9mRNA和TIMP-1mRNA表达,上调肺组织MMP-9mRNA/TIMP-1mRNA比值发挥救治PQ中毒作用。

参龙煎剂对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶2与金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响(英文)

目的:观察博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metallo proteinase-1,TIMP-1)mRNA的表达,探讨中药复方参龙煎剂防治大鼠肺纤维化的作用机制。方法:230只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组和参龙煎剂低、中、高剂量组,采用气管内注入博来霉素的方法建立Wistar大鼠肺纤维化模型。正常对照组和模型组大鼠第2日起每日予生理盐水灌胃,其余各组大鼠按配好的参龙煎剂以等容药品灌胃。苏木素-伊红染色和Masson染色观察不同时间点大鼠肺组织病理变化,以评价模型是否成功。逆转录聚合酶链反应检测大鼠肺组织MMP-2和TIMP-1mRNA的表达水平。结果:各组大鼠肺组织在各个时间点均有MMP-2和TIMP-1mRNA表达。与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠在第7天时MMP-2和TIMP-1mRNA基因转录水平均显著增高,尤以MMP-2mRNA增加明显,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在第14天时,MMP-2和TIMP-1mRNA的基因转录表达继续增高,但TIMP-1mRNA增加更显著,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);第28天时,MMP-2已有所下降,但TIMP-1mRNA表达仍持续性增高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组大鼠比较,治疗组大鼠第7天MMP-2和TIMP-1mRNA基因转录水平降低,尤其是MMP-2的表达降低更明显,第28天时这种降低作用仍持续存在,以参龙煎剂中剂量组大鼠表现最明显,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:参龙煎剂可能是通过上调TIMP-1mRNA的表达来抑制MMP-2mRNA表达水平,从而起到延缓肺纤维化的作用。

夹心ELISA法快速检测肝病患者血清中金属蛋白酶组织抑制剂-1

目的建立一种快速检测肝病患者血清基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的双抗体夹心ELISA,了解血清TIMP-1的水平与肝纤维化病程进展程度的关系。方法以不同浓度的抗人TIMP-1单克隆抗体(mAb)为包被抗体,加入待测抗原以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TIMP-1mAb作为标记抗体进行方阵滴定,建立双抗体夹心ELISA,并用于临床检测408例肝病患者血清TIMP-1的水平。结果方阵滴定的结果表明包被抗体浓度为1mg/L,血清稀释倍数1∶100,HRP标记mAb的最佳工作浓度为1∶400。以此条件建立的夹心ELISA法具有良好的可重复性,中和抑制率在85%以上,稳定性良好,与国外检测TIMP-1的ELISA试剂盒进行对比试验,具有良好的相关性(r=0.988)。用于临床快速检测肝硬化的检出阳性率为76.4%,明显高于慢性肝炎(40.2%)和急性肝炎(19.5%,P<0.005),并随着患者肝纤维化程度的加重而升高(P<0.001)。结论血清TIMP-1水平的变化可作为诊断肝纤维化良好指标。本法简便、快速,敏感性高、特异性强,用于肝纤维化的人血清学快速诊断。尤其适于医院及基层医疗单位应用。

肾衰冲剂抑制残余肾转化生长因子-β1与组织金属蛋白酶抑制剂-1mRNA的表达

目的 :研究肾衰冲剂对大鼠残余肾转化生长因子 β1(TGF β1)、组织金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)mRNA过度表达的抑制作用。方法 :制作大鼠 5 / 6肾切除肾衰模型 ,分别予肾衰冲剂及党参、丹参、制大黄灌胃治疗 1个月后取各组大鼠残余肾。用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)法检测残余肾TGF β1、TIMP 1mRNA的表达。结果 :大鼠慢性肾衰模型组表现为TGF β1、TIMP 1mRNA的过度表达 ;经肾衰冲剂治疗后TGF β1、TIMP 1mRNA的表达降低 (P <0 0 1)。其组成单味药丹参、制大黄则有不同程度的作用 ,党参作用不明显。结论 :肾衰冲剂减轻残余肾纤维化的病变与其抑制残余肾组织TGF β1、TIMP 1mRNA的过度表达有关。

烟雾病患者血清基质金属蛋白酶-9和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达以及与颅内出血的关系

目的探讨烟雾病(MMD)患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达以及与颅内出血的关系。方法检测26例有颅内出血的MMD的患者(出血组)、21例无出血的MMD患者(无出血组)及25名健康对照者(正常对照组)的血清MMP-9、TIMP-1水平,并进行比较。结果与正常对照组比较,出血组与无出血组患者血清MMP-9及TIMP-1水平显著升高(均P<0.01)。与无出血组比较,出血组MMP-9/TIMP-1显著增高(P<0.05),MMP-9与TIMP-1水平差异无统计学意义。出血组及无出血组血清TIMP-1与MMP-9水平均呈正相关(r=0.626,r=0.645;均P<0.01)。结论 MMP-9及TIMP-1在MMD患者血清中表达显著升高。MMP-9与TIMP-1比例失衡可能是引起MMD患者颅内出血的重要机制。

脑出血大鼠血肿周围脑组织含水量与基质金属蛋白酶-9、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1及谷氨酸表达水平的关系

目的探讨脑出血大鼠血肿周围脑组织含水量与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)及谷氨酸表达水平的关系。方法雄性Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组(n=8)、假手术组(n=8)、脑出血组(n=32),脑出血组又分为脑出血后12 h、24 h、72 h、7 d 4个亚组,每亚组8只大鼠。采用自体血尾状核注入法制备脑出血模型。采用干湿重法测定脑含水量,免疫组化法检测血肿周围脑组织MMP-9、TIMP-1及谷氨酸的表达。结果脑出血组各时间点亚组大鼠血肿周围脑组织含水量与MMP-9、TIMP-1及谷氨酸表达水平均显著高于正常对照组和假手术组(均P<0.01)。脑出血组中,72 h亚组大鼠脑组织含水量及MMP-9、TIMP-1表达水平最高(P<0.01);24 h亚组大鼠脑组织谷氨酸表达水平最高(P<0.01)。多重线性回归分析结果显示,脑组织含水量(Y)与脑组织MMP-9(X1)及谷氨酸(X3)表达水平呈直线关系,多元回归方程为Y=68.894+0.281X1-0.052X3。结论脑出血后血肿周围组织含水量及MMP-9、TIMP-1、谷氨酸的表达水平明显增高,MMP-9、谷氨酸在脑出血后血肿周围组织水肿的发生发展中具有重要作用。