基质金属蛋白酶13在靶向治疗骨关节炎的研究进展

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一类常见的慢性退行性疾病,可导致关节软骨、滑膜、软骨下骨等多组织损伤。目前,该疾病的发病机制尚未完全阐明。研究发现基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)与该疾病的发病过程相关,特别是MMP13,其在机体内的表达水平与OA关系密切。近年来,针对MMP13在该疾病发生发展中的作用,靶向MMP13治疗OA具有诸多进展,选择性MMP13抑制剂较广谱MMPs抑制剂具有选择性强、毒副作用低、效能高等优点,但需要频繁给药以维持药物在体内的有效浓度;将与MMP13 mRNA具有选择性互补的小干扰RNA注射入关节腔可有效降低体内MMP13蛋白产生并抑制多种炎症因子表达,且单次注射可较长时间维持药物效果;利用CRISPR⁃Cas9基因编辑技术靶向消融MMP13基因以减弱软骨细胞外基质蛋白的降解从而治疗OA的方式在动物体内外模型中均具有较好效果,但该技术在人体内长期应用的安全性也引发人们的思考。靶向MMP13治疗OA是医学界及科研领域的重要研究方向,未来结合更前沿的生物医学技术将为探索治疗OA提供新的策略。

基质金属蛋白酶13在骨关节炎中的研究进展

骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是最常见的关节炎形式,通常以关节疼痛和功能障碍为主要表现,严重影响患者的生活质量。OA主要是退行性病变,多发于60岁以上的老年人,随着我国逐步进入老龄化社会,骨关节炎越来越受到关注。已有大量实验证明基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)可以强有力的降解软骨基质的主要成分—II型胶原,除此之外,MMP-13还可降解软骨基质中的蛋白多糖、IV型和IX型胶原蛋白、骨粘连蛋白及软骨基底膜聚糖,在OA的发生发展中起到重要作用,近几年许多关于MMP-13抑制剂的研究给OA的治疗带来了新希望。本综述将近几年MMP-13及其在骨关节炎方面的研究进展进行总结,希望能对此方面的研究人员起到参考作用。

软骨中硫化氢含量及其对白介素1β诱导的软骨细胞基质金属蛋白酶13表达的抑制作用

目的:研究关节液及关节软骨中硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)及其合成酶的含量和变化,以及H2S对白介素1β(interlukin-1β,IL-1β)诱导的软骨细胞人基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)表达的影响。方法:收集在北京大学第一医院行膝关节手术(关节镜手术或膝关节置换术)患者的关节液及废弃的关节软骨,用亚甲基蓝法检测关节液H2S的含量;从废弃的关节软骨中分离出相对正常的软骨细胞,用H2S分子探针方法检测软骨细胞中的内源性H2S,用免疫细胞化学方法检测软骨细胞中H2S合成酶胱硫醚-β-合成酶(cystathionine beta-synthase,CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine gamma-lyase,CSE)、巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST);用Western blot法检测H2S合成酶CBS、CSE、MPST在不同退变程度的软骨组织中的含量。培养相对正常的人软骨细胞至第三代,分为4组:(1)对照组:不加任何药物;(2)IL-β组:单加5μg/L的IL-1β;(3)IL-1β+H2S组:提前0.5 h加200μmol/L的Na HS,再加5μg/L的IL-1β;(4)H2S组:单加200μmol/L的Na HS。Western blot法检测各组细胞MMP-13蛋白、总核因子κB p65(nuclear factorκB p65,NF-κB p65)及磷酸化NF-κB p65蛋白的含量,Real-time PCR检测各组细胞MMP-13基因的转录情况。结果:退变膝关节的关节液中H2S含量为(14.3±3.3)μmol/L,Outerbridge分级3级软骨组织中CSE表达量显著高于Outerbridge分级1级软骨组织中的表达量(1.67±0.09 vs.1.26±0.11,P<0.01),而CBS与MPST的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。IL-1β组MMP-13的表达较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义(1.87±0.67 vs.0.22±0.10,P<0.05),IL-1β+H2S组MMP-13的表达较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义(0.55±0.11 vs.1.87±0.67,P<0.05),H2S组MMP-13的表达较正常对照组差异无统计学意义。Real-time PCR方法测量了药物干预实验中各组细胞MMP-13基因转录情况,结果显示IL-1β组MMP-13基因转录较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义(31.40±0.31 vs.1.00±0.00,P<0.05),IL-1β+H2S组MMP-13基因转录较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义(24.41±1.28 vs.31.40±0.31,P<0.05),H2S组MMP-13基因转录较正常对照组无显著性变化。IL-1β组总p65含量较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义(2.13±0.08 vs.0.73±0.08,P<0.05),IL-1β+H2S组总p65含量较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义(1.24±0.13 vs.2.13±0.08,P<0.05),H2S组总p65含量较正常对照组无显著性变化;IL-1β组磷酸化p65含量较正常对照组明显升高,且差异具有统计学意义(1.30±0.13 vs.0.19±0.04,P<0.05),IL-1β+H2S组磷酸化p65含量较IL-1β组明显降低,且差异具有统计学意义(0.92±0.26 vs.1.30±0.13,P<0.05),H2S组磷酸化p65含量较正常对照组无显著性变化。结论:H2S参与了软骨退变,起到部分抑制细胞外基质降解酶MMP-13的作用,从而实现对软骨细胞外基质的保护。

中药补肾方干预骨性关节炎软骨中基质金属蛋白酶13的表达

背景:单独的基质金属蛋白酶13基因表达可引起关节的退行性改变,而导致骨关节炎。中药治疗骨关节炎可能与抑制基质金属蛋白酶13基因表达有关。目的:观察基质金属蛋白酶13在骨性关节炎发病过程中的表达及中药对其的影响。方法:SD雌性大鼠18只,随机分为3组:空白组、模型组、中药组。切断右膝前交叉韧带、内侧副韧带,建立大鼠膝骨关节炎模型。造模4周后,中药组每日1次灌服中药补肾方0.72g/kg,连续灌服3个月。造模后第8,12,16周,分别采用实时荧光定量PCR检测大鼠软骨细胞的基质金属蛋白酶13mRNA表达。结果与结论:正常大鼠未见明显基质金属蛋白酶13mRNA的表达。膝骨关节炎大鼠关节中基质金属蛋白酶13mRNA表达随时间的延长而逐渐增强(P<0.05)。经补肾方治疗的大鼠,关节中基质金属蛋白酶13mRNA的表达逐渐降低(P<0.05)。因此,认为基质金属蛋白酶13在骨关节炎发生中表达明显,中药或可通过对基质金属蛋白酶13上游信号的激活,抑制基质金属蛋白酶13表达。

白细胞介素1β对软骨细胞miR-27b和基质金属蛋白酶13蛋白表达的影响

背景:基质金属蛋白酶13对软骨细胞外基质中的Ⅱ型胶原蛋白的降解能力最为活跃,白细胞介素1β被认为是基质金属蛋白酶的诱导剂,参与关节软骨的降解和退变。目的:分析白细胞介素1β对大鼠软骨细胞miR-27b和基质金属蛋白酶13蛋白表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠7只,体外分离培养软骨细胞,并分组为白细胞介素1β刺激组及对照组。对照组不采取任何刺激;白细胞介素1β刺激组采用10μg/L白细胞介素1β的无血清培养基培养大鼠软骨细胞,于第0,24,48小时分别采用倒置显微镜观察细胞生长情况,并收集细胞,提取RNA检测软骨细胞基质金属蛋白酶13表达以及不同的miR NAs的表达变化。结果与结论:(1)白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞0,24,48 h时基质金属蛋白酶13相对表达量逐渐增加(P<0.05);(2)白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞24,48 h时miR-27b、miR-31表达均逐渐下降(P<0.05);mi R-26a、miR-26b、miR-23和miR-204表达均逐渐加强(P<0.05),白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞48 h后,mi R-27b表达的降低最为显著(P<0.05);(3)结果说明白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞,miR-27b表达显著下降,靶定调控基质金属蛋白酶13的能力降低,导致软骨细胞的损伤,加剧了骨性关节炎的发病及进展。

运动手法配合疏肝补肾中药对膝关节骨性关节炎患者关节功能及关节液中基质金属蛋白酶13的影响

目的观察运动手法配合疏肝补肾中药对膝关节骨性关节炎患者关节功能及关节液中基质金属蛋白酶13(MMP-13)的影响。方法将88例膝关节骨性关节炎患者随机分为2组,试验组44例给予运动手法+疏肝补肾中药治疗,对照组44例给予运动手法+复方七叶皂苷钠凝胶治疗,2组均以2周为1个疗程,观察2组治疗前后KOOS评分、膝关节屈伸角度和关节液中MMP-13水平变化情况。结果 2组治疗后KOOS评分、膝关节屈伸角度、关节液中MMP-13水平均明显改善(P均<0.05),且试验组上述指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05)。结论运动手法配合疏肝补肾中药能够明显改善膝关节骨性关节炎患者的关节功能,降低关节液中MMP-13水平,保护关节软骨,值得推广应用。

低强度脉冲超声干预膝关节炎模型兔软骨细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13的表达

背景:低强度脉冲超声安全无创、穿透性强,近年来,越来越多的研究表明,低强度脉冲超声在促进损伤关节软骨修复方面具有重要的作用。目的:观察低强度脉冲超声对膝关节炎模型兔软骨细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13表达的影响。方法:纳入20只新西兰白兔,均建立膝关节炎模型,建模后随机分为对照组和实验组,每组10只。实验组动物右侧膝关节利用超声波骨折愈合仪进行低强度脉冲超声治疗,对照组动物予以右侧膝关节假低强度脉冲超声治疗。干预后8周,取胫骨内侧端以及膝关节股骨内侧端软骨组织,经常规处理后,进行甲苯胺蓝染色,并置于显微镜下进行病理学观察,利用q RT-PCR法软骨细胞基质金属蛋白酶13和Ⅱ型胶原表达量检测。观察实验动物一般情况和关节软骨病理形态,以及基质金属蛋白酶13、Ⅱ型胶原的q RT-PCR检测结果。结果与结论:1甲苯胺蓝染色和病理学观察:治疗8周后,对照组关节软骨出现明显的裂隙,并从表面延伸至深层,且存在严重的染色缺失现象;实验组可观察到关节软骨表面形成裂隙,存在中度染色缺失现象;2q RT-PCR检测:软骨细胞培养5,10 d后,实验组和对照组相同时间点基质金属蛋白酶13和Ⅱ型胶原基因表达差异均有显著性意义(P<0.05);3结果证实:低强度脉冲超声可调节膝关节炎模型兔软骨细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13基因的表达。

基质金属蛋白酶13和转化生长因子β1在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中的表达

背景:与瘢痕疙瘩和增生性瘢痕发生机制相关的基质金属蛋白酶13和转化生长因子β1信号传递通路研究多集中在体外成纤维细胞的培养上,而在组织中的相关研究少见报道。目的:观察瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中基质金属蛋白酶13和转化生长因子β1蛋白的表达。方法:取自2004/2008唐山市工人医院烧伤整形科手术患者,瘢痕疙瘩54例,增生性瘢痕42例。选取同期45例因非感染手术切除的正常瘢痕组织作为对照组,选取同期45例正常皮肤组织作为正常对照组。应用流式细胞仪检测4组中基质金属蛋白酶13和转化生长因子β1的表达,分析两者的相关性。结果与结论:瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中转化生长因子β1的表达明显高于正常瘢痕组织和正常皮肤组织;正常瘢痕组织中转化生长因子β1的表达明显则高于正常皮肤组织,而基质金属蛋白酶13的表达与之相反。瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常瘢痕组织中基质金属蛋白酶13和转化生长因子β1表达呈负相关。由此推测基质金属蛋白酶13和转化生长因子β1在瘢痕组织中异常表达,二者可能具有协同负向作用,共同参与病理性瘢痕的发生发展。

创伤性关节炎软骨中基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1的表达

背景:关节软骨损伤后继发性退变机制仍不十分清楚。近年研究发现关节软骨细胞外基质合成与降解失衡是造成软骨变性的重要原因之一,其中基质金属蛋白酶可能起决定性的作用。目的:观察基质金属蛋白酶13及其组织特异性抑制剂1在创伤性关节炎中的表达及与软骨退变的关系。方法:将新西兰兔分别用骨水泥制作的模具从1.33kg,46cm高度和0.43kg,20cm高度进行自由落体撞击制备轻型和重型撞击创伤性关节炎兔模型。结果与结论:苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色结果显示,基质金属蛋白酶13和组织特异性抑制剂1在两组均增高(P<0.05)。组织特异性抑制剂1在重型撞击创伤性关节炎模型兔软骨组织中的分泌明显高于轻型撞击组(P<0.05)。说明关节软骨在创伤后,基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1表达上调,共同作用促进了关节软骨退变,其中组织特异性抑制剂1的过量表达可能是造成关节软骨进一步损害的原因之一。

转化生长因子β对人透明软骨细胞基质金属蛋白酶13基因表达的调节作用及意义

目的探讨转化生长因子β(transforminggrowthfactorβ,TGF-β)对人透明软骨细胞基质金属蛋白酶13(matrixmetalloproteinase13,MMP-13)基因表达的作用,了解骨关节炎软骨损伤的机制。方法将体外培养的人软骨细胞随机分为7组:第1组为正常对照组,第2、3、4组分别加入1、10和100ng/mlTGF-β,第5、6、7组分别加入前3种不同浓度TGF-β后再加入10ng/ml白介素1β(interleukin1β,IL-1β)作为联合作用组。每组均作用12h,应用逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)及实时荧光定量PCR,检测不同因子作用下传代培养人透明软骨细胞中MMP-13mRNA的含量。结果第1组透明软骨细胞仅见MMP-13mRNA扩增产物;第2、3和4组,MMP-13mRNA表达逐渐增强;第5、6、7组,随着TGF-β浓度的升高,MMP-13mRNA表达逐渐降低,且各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论MMP-13在骨关节炎的发生与发展中有一定的作用,TGF-β可调节软骨细胞MMP-13mRNA基因的表达。

白藜芦醇干预小鼠软骨细胞固醇调节元件结合蛋白2及基质金属蛋白酶13的表达

背景:新近研究表明,固醇调节元件结合蛋白2及基质金属蛋白酶13在骨关节炎软骨细胞中表达上调。白藜芦醇对于骨关节炎的防治作用被认为与其可以减少软骨细胞凋亡及滑膜炎症有关。目的:进一步分析白藜芦醇对软骨细胞固醇调节元件结合蛋白2及基质金属蛋白酶13表达的影响。方法:体外分离培养小鼠膝关节软骨细胞,采用Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞。根据加入物的不同分为3组:空白对照组、脂多糖干预组(1 mg/L)和白藜芦醇干预组(100μmol/L白藜芦醇+1 mg/L脂多糖)。采用Westernblot检测软骨细胞中基质金属蛋白酶13的蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组软骨细胞固醇调节元件结合蛋白2的表达量。结果与结论:(1)荧光显微镜下显示Ⅱ型胶原染色阳性细胞数占95%以上,证实所培养细胞为软骨细胞;(2)脂多糖组固醇调节元件结合蛋白2、基质金属蛋白酶13表达量较空白组明显升高,白藜芦醇组固醇调节元件结合蛋白2、基质金属蛋白酶13表达量较脂多糖组下降,但仍高于空白组;(3)结果表明,表明白藜芦醇可抑制小鼠软骨细胞固醇调节元件结合蛋白2和基质金属蛋白酶13的表达。

兔前交叉韧带切断后外侧半月板退变中基质金属蛋白酶13的作用

背景:研究证明,膝关节前交叉韧带切断后,基质金属蛋白酶13在关节软骨细胞外基质降解中起重要作用,然而基质金属蛋白酶13在外侧半月板退变中有何作用,作者尚未查及到文献报道。目的:探讨兔前交叉韧带切断后外侧半月板中基质金属蛋白酶13阳性表达率的变化和意义。方法:48只新西兰兔膝关节配对为实验侧和对照侧造模,造模后第1,3,6,8周各随机处死12只,通过大体观察和苏木精-伊红染色对外侧半月板退变进行评分,免疫组织化学检测基质金属蛋白酶13表达。结果与结论:随时间延长,与对照组比较,实验组外侧半月板退变评分逐渐增高(P<0.05)。各时间点实验组基质金属蛋白酶13阳性表达率均较对照组增高(P<0.05)。实验组基质金属蛋白酶13阳性表达率在3,6周显著高于1,8周(P<0.05),8周显著高于1周(P<0.05),3,6周差异无显著性意义(P>0.05)。结果提示基质金属蛋白酶13参与了外侧半月板组织的退变;基质金属蛋白酶13阳性表达率降低并不表示外侧半月板组织退变结束。

补肾益气行血法对人软骨细胞基质金属蛋白酶13表达的影响

目的:观察补肾益气行血中药复方含药血清对MMP-13、Ⅱ型胶原表达的调控作用及相关意义。方法:将体外培养的人软骨细胞随机分为5组:对照组(正常血清)、低剂量IL-1组(10μg/ml IL-1β)、高剂量IL-1组(100μg/ml IL-1β)、低剂量IL-1加中药组(10μg/ml IL-1β加含药血清)、高剂量IL-1加中药组(100μg/ml IL-1β加含药血清),应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR,比较补肾益气行血中药复方含药血清在不同剂量IL-1β作用下对MMP-13、Ⅱ型胶原表达的调控作用。结果:中药含药血清组均有抑制MMP-13的表达作用,对照组表达阳性强度高于中药组,中药组Ⅱ型胶原表达阳性强度高于对照组,统计学均有明显差异。不同剂量IL-1组均能促进MMP-13的表达,对照组阳性强度低于IL-1组,IL-1组Ⅱ型胶原表达低于对照组,统计学均有明显差异。结论:体外条件下,补肾益气行血中药含药血清能够抑制炎性因子IL-1诱导的MMP-13表达;能对抗MMP-13抑制软骨细胞Ⅱ型胶原合成,具有保护软骨细胞的作用。

基质金属蛋白酶13在软骨重塑和关节炎中的研究进展

关节炎是一种常见的慢性疾病,其主要特征是关节软骨的破坏和周围组织的慢性炎症。关节炎的发病机制比较复杂,受多种因素影响。近年来研究发现,关节软骨中基质金属蛋白酶(MMPs)的增加,是造成软骨细胞外基质(ECM)降解,从而引起软骨退化的重要原因。其中,MMP-13是促使其降解的主要酶,它能不可逆地降解Ⅱ型胶原,从而造成关节软骨的破坏。MMP-13可受到多种因素的影响,如IL-1β、TNF-α、Runx2可以诱导MMP-13的表达。MMP-13启动子区域的低甲基化也会诱导其表达,但可以通过抑制组蛋白乙酰化来降低其表达。除此之外,微小RNA也可以通过基因调控来降低MMP-13的表达。MMP-13的上调会导致软骨的退化,进而促进关节炎的进程。综上所述,MMP-13可作为关节炎中重要的治疗靶点,该文将对MMP-13在关节炎中的作用及其调节机制作一综述。

大鼠舌鳞癌诱变过程中基质金属蛋白酶13表达变化的研究

目的探讨基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinases 13,MMP-13)在大鼠舌鳞癌诱变过程中转录水平表达变化及其临床意义。方法 50只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组,给予正常饮食。另40只每天喂养0.002%4-硝基喹啉-1-氧化物,于16周时处死20只,选取处于上皮异常增生的8个标本为上皮异常增生组;24周时处死另外20只,选取发生舌鳞癌的8个标本为鳞癌组。各组利用定量逆转录聚合酶链反应检测MMP-13在不同病变时期舌组织中转录水平的表达变化。结果大鼠诱癌16周时重度上皮异常增生发生率为75.0%(15/20),大鼠诱癌24周时舌鳞癌发生率为94.8%(18/19)。转录水平的检测显示MMP-13上皮异常增生组的表达较正常组上调,但差异无统计学意义(t=-1.759,P=0.129);舌鳞癌组与正常组(t=-6.579,P=0.001)和上皮异常增生组(t=-6.376,P=0.001)比较MMP-13的表达均有统计学意义的上调。结论 MMP-13随癌变的发生表达显著,可能在舌鳞癌的发生过程中起着重要作用。

骨关节炎滑膜组织中β-catenin和基质金属蛋白酶13的临床意义

背景:Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎病程中的作用已被大量动物实验和人标本试验验证。Wnt/β-catenin信号通路和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinases,MMP-13)在骨关节炎的病理过程中都发挥重要作用,两者之间可能有某种潜在的联系。目的:检测β-catenin和MMP-13在骨关节炎滑膜中的表达水平,探讨它们在骨关节炎发病过程中的相关性。方法:骨关节炎组取自行人工膝关节置换术或膝关节镜诊治术骨关节炎患者的关节滑膜组织,共54例;非骨关节炎组取创伤后行截肢术健康青年患者自愿捐赠的正常膝关节滑膜组织,共12例。根据改良的Mankin关节软骨病理评分标准分为非骨关节炎组及轻度、中度、重度骨关节炎组。采用免疫组化检测β-catenin和MMP-13在骨关节炎患者滑膜组织中的表达,并进行相关性分析。结果与结论:(1)MMP-13免疫组化染色结果:非骨关节炎组全部为阴性;轻度骨关节炎组5例阳性、阳性率50%,中度骨关节炎组11例阳性、阳性率65%,重度骨关节炎组23例阳性、阳性率85%;(2)β-catenin免疫组化染色结果:非骨关节炎组1例染色阳性,阳性率为8%;轻度骨关节炎组7例阳性,阳性率70%;中度骨关节炎组14例阳性,阳性率82%;重度骨关节炎组25例阳性,阳性率93%;(3)β-catenin与MMP-13在骨关节炎患者滑膜中的含量呈现明显的正相关关系(r=0.806,P<0.001),其含量亦随着关节退变程度的加重而增加;(4)结果提示,MMP-13和β-catenin在骨关节炎组滑膜组织中均表现为高表达状态,两者在骨关节炎与非骨关节炎组表达差异有显著性意义,并且共同在骨关节炎病程中发挥作用。骨关节炎病变过程中β-catenin和MMP-13均发挥着重要的调控作用,并且MMP-13与β-catenin在参与骨关节炎软骨退变和滑膜炎症反应等病理变化过程中密切相关,这为骨关节炎的靶向基因治疗提供了新的理论方向和实验依据。

c-fos及基质金属蛋白酶13在人口腔鳞状细胞癌发生中的表达及病理意义

目的:检测c-fos和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP13)在OSCC、癌旁组织和正常口腔上皮中的表达,探讨其与OSCC发生发展的关系。方法:免疫组化法检测和统计学分析。结果:c-fos表达在胞核内,MMP13表达在胞浆中,二者在OSCC中的阳性表达分别为67.3%及63.3%。c-fos和MMP13在有、无颈淋巴结转移组的阳性表达率分别为65.2%、69.2%(P(0.05)和78.3%、50%(P(0.05)。结论:c-fos表达与OS-CC病理分级相关,但与颈淋巴结转移无关。MMP13表达与OSCC病理分级和颈淋巴结转移均相关。

少阳生骨方调节C518大鼠膝关节退变软骨细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13的表达

背景:少阳生骨方有很好的治疗骨关节炎的作用,但其作用机制仍不清楚,可能与软骨退变的调节有关。目的:探讨少阳生骨方对C518细胞Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13表达的影响。方法:选用C518大鼠膝关节退变软骨细胞,并用苏木精-伊红染色观察C518细胞形态;然后将C518细胞分为:少阳生骨方组、盐酸氨基葡萄糖组、生理盐水组,每组给予相应的干预后,再用RT-q PCR和Western blot检测Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13基因和蛋白的表达水平。结果与结论:(1)RT-q PCR和Western blot检测结果显示,相较于生理盐水组,少阳生骨方组和盐酸氨基葡萄糖组Ⅱ型胶原的m RNA和蛋白表达量均上调(P<0.05),基质金属蛋白酶13的m RNA和蛋白表达量均下调(P<0.05);且相比盐酸氨基葡萄糖组,少阳生骨方组Ⅱ型胶原的m RNA和蛋白表达量显著上调(P<0.05),基质金属蛋白酶13 m RNA和蛋白表达量显著下调(P<0.05);(2)结果说明,少阳生骨方能调节C518大鼠膝关节退变软骨细胞中Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶13的m RNA和蛋白的表达水平,从而延缓退变的发展。

乳腺癌基质金属蛋白酶13蛋白的表达及其与预后的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶13(MMP-13)在乳腺癌中的表达情况及其与临床预后的关系。方法:采用组织芯片及免疫组化SP法检测了183例乳腺癌组织中MMP-13的表达水平,分析乳腺癌组织中MMP-13的表达情况与临床病理因素之间的相关性,并结合完整的10年随访资料探讨MMP-13与乳腺癌预后的关系。结果:乳腺癌组织中MMP-13的阳性表达率(54.1%)显著高于良性乳腺疾病(13.3%,P<0.01)。MMP-13的表达与临床TNM分期、淋巴结转移状态、组织学分级密切相关(P<0.01),而与肿瘤大小、年龄、月经状态、病理类型以及雌孕激素受体状态无关。MMP-13高表达组10年生存率低于低表达组(P<0.01)。结论:MMP-13在乳腺癌中表达水平升高,其高表达预示预后不良。

白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶13在骨性关节炎中的表达及相关性

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在骨性关节炎中的表达及相关性。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及酶联免疫吸附(ELSIA)法检测72例骨性关节炎患者及32例正常对照者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13的表达,对骨性关节炎患者病情严重程度进行美国纽约特种外科医院(HSS)评分,采用Pearson相关分析法分析骨性关节炎患者IL-1β、TNF-α与MMP-13的相关性以及它们与HSS评分之间的相关性。结果骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13基因及蛋白表达水平均高于正常对照者(P<0.01),骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13蛋白水平均与骨性关节炎严重程度呈正相关,IL-1β和TNF-α均与MMP-13蛋白水平呈正相关。结论 IL-1β、TNF-α及MMP-13与骨性关节炎发生、发展有密切关系,并且与病情严重程度相关,关节液中MMP-13的高表达可能是通过IL-1β及TNF-α等炎性细胞因子激活、上调。测定骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13水平对骨性关节炎的诊断、病情判断和治疗具有重要意义。