金松双黄酮抑制JAK2/STAT3通路对脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的影响

目的探究金松双黄酮(SCI)调控酪氨酸激酶2/信号转导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)通路,对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的影响。方法①采用格里斯(Griess)试验试剂检测不同浓度SCI(1.25~40μmol·L^(-1))干预对经LPS刺激后BV2小胶质细胞培养液中亚硝酸盐含量的影响。②采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测不同浓度SCI(1.25~40μmol·L^(-1))干预的BV2小胶质细胞活性以此判断SCI对BV2小胶质细胞毒性作用。③将BV2小胶质细胞以2×10^(6)个/孔接种于6孔板中,并将其随机分为对照组(Ctrl组)、对照+SCI组(Ctrl+SCI组)、模型组(LPS组,100μg·L^(-1))、模型+SCI组(LPS+SCI组),各组进行相应干预。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测SCI对LPS刺激BV2细胞的促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白介素-6(IL-6)、TNF-α的蛋白水平;Western blot法检测JAK2/STAT3信号通路磷酸化酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)以及iNOS蛋白表达。结果①Greiss法结果显示,1.25~40μmol·L^(-1) SCI均显著降低LPS刺激的BV2小胶质细胞产生的亚硝酸盐(P<0.05)。②MTT法结果显示,1.25~20μmol·L^(-1)浓度的SCI对BV2小胶质细胞的活性没有影响。③RT-qPCR结果显示,与LPS组比较,LPS+SCI组中iNOS、TNF-αmRNA的表达量下降(P<0.05);ELISA法结果显示,与LPS组比较,LPS+SCI组中IL-6、TNF-α的蛋白表达量下降(P<0.05);Western blot结果显示,与LPS组比较,LPS+SCI组中p-JAK2、p-STAT3、iNOS蛋白表达降低(P<0.05)。结论SCI能够通过抑制JAK2/STAT3信号通路发挥对LPS刺激的BV2小胶质细胞的抗炎作用。

从银杏叶中制备金松双黄酮对照品的研究

目的:建立从银杏叶中制备金松双黄酮对照品的方法。方法:结合硅胶柱色谱和重结晶方法对银杏叶乙醇提取物进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据进行结构鉴定,利用TLC和HPLC进行纯度验证。结果:从银杏叶中制备得到的金松双黄酮对照品,其纯度质量分数为98.5%。结论:建立的制备方法简单,对照品质量分数高,可作为银杏叶药效物质基础研究和银杏叶药材质量控制的对照品。

银杏叶中金松双黄酮的核磁共振谱分析

通过对银杏叶中金松双黄酮(Sciadopitysin)的~1H-NMR,NOEDS,^(13)C-NMR,DEPT及~1H-~1H COSY,^(13)C-~1H COSY和Long-range ^(13)C-~1H COSY谱的综合分析,确定了其结构和信号归属,为这一类双黄酮化合物的结构鉴定提供了进一步的依据。

金松双黄酮的生物活性研究进展

金松双黄酮具有抗肿瘤、抗氧化、治疗骨质疏松症、糖尿性骨病、阿兹海默病等多种作用。对近年来研究的金松双黄酮的生物活性及其相关作用机制进行综述,为日后金松双黄酮的深入研究和药物研发提供理论依据和参考。

HPLC法测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ和金松双黄酮含量

建立HPLC法同时测定南方红豆杉药材中主成分10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ和金松双黄酮的含量。采用Inertsil ODS-3 C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长232 nm。研究表明10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ在0.8640~216.0μg·mL^(-1)(r=0.9999)范围内、金松双黄酮在0.8036~200.9μg·mL^(-1)(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.85%(RSD=0.72%)、99.35%(RSD=0.90%)。本方法简便、准确可靠,可用于南方红豆杉药材及中药饮片的质量控制。

高效液相法测定南方红豆杉中金松双黄酮的含量

建立高效液相色谱法测定南方红豆杉中金松双黄酮的含量。采用Acclaim TM 120 C 18色谱柱,以乙腈-0.2%冰醋酸(70:30)进行洗脱,柱温为30℃,流速为1 mL/min,检测波长为330 nm,对南方红豆杉中金松双黄酮进行含量测定。研究显示金松双黄酮在上述条件下分离度良好,线性良好,方法学考察的精密度、重复性、稳定性的RSD均小于3%,回收率为101.6%(RSD=4.5%)。结果表明该方法简便可行,测定准确,可用于南方红豆杉金松双黄酮含量的测定。

金松双黄酮联用紫杉醇对A549细胞凋亡的影响

目的探讨金松双黄酮联用紫杉醇对A549细胞caspase-3蛋白及Bcl-2、Bax mRNA表达的作用。方法实验分为对照组、紫杉醇组(浓度1μg·L-1)、金松双黄酮+紫杉醇组(浓度分别为0.5,1.0μg·L-1),在药物作用72 h后,用相差显微镜观察A549细胞形态学变化;逆转录-聚合酶链反应检测细胞中Bcl-2、Bax mRNA水平;蛋白免疫印迹法检测caspase-3蛋白的表达。结果与紫杉醇组相比,联用金松双黄酮组较多细胞出现细胞核浓缩、碎裂的凋亡特征,且caspase-3蛋白及Bax mRNA表达上调而Bcl-2mRNA表达下降。结论联用金松双黄酮可增强紫杉醇对A549细胞凋亡作用,可能与调节Bc1-2、Bax及caspase-3的表达水平有关。

金松双黄酮对尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶的抑制作用

借助体外代谢孵育体系考察了金松双黄酮(sciadopitysin,SP)对12种人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶(UGTs)的抑制作用,通过体外-体内外推(IV-IVE)预测体内药物-药物相互作用(DDI)的风险。以混合人肝微粒体(HLM)及重组表达的人UGTs作为酶源,选用4-甲基伞形酮(4-MU)、三氟拉嗪(TFP)、N-3-羧丙基-4-羟基-1,8-萘酰亚胺(NCHN)分别为UGTs酶的广谱探针底物、UGT1A4和UGT1A1的特异性探针底物,评估金松双黄酮对12种人UGT酶的抑制作用。通过非线性拟合求得半数最大抑制浓度IC50和抑制动力学常数Ki及抑制类型;并基于体外参数预测了金松双黄酮通过抑制UGT1A1引发的潜在DDI风险。体外抑制实验表明,金松双黄酮对UGT1A1、UGT1A3、UGT1A8和UGT1A10有较强的抑制作用,当终浓度为10μmol·L^(-1)时,UGT1A1、UGT1A3、UGT1A8和UGT1A10的残余活性均小于30%。金松双黄酮对UGT1A1、UGT1A3、UGT1A8和UGT1A10的半数最大抑制浓度IC50为0.20~1.34μmol·L^(-1),抑制动力学常数Ki为0.07~2.12μmol·L^(-1)。口服金松双黄酮240 mg·d^(-1)可导致UGT1A1底物的AUC增加19%~147%。金松双黄酮可竞争性的抑制UGT1A1、UGT1A3、UGT1A8和UGT1A10催化的4-MU-O-葡糖醛酸化反应及UGT1A1催化的NCHN-O-葡糖醛酸化反应。金松双黄酮对UGT1A1的强抑制作用有可能减缓UGT1A1底物的代谢,进而引发DDI风险。上述研究提示金松双黄酮与临床药物联合应用时,应该特别注意其通过抑制UGT酶而引发的DDI。

金松双黄酮联合紫杉醇对肺癌A549细胞生长及凋亡的影响

目的:研究金松双黄酮联合紫杉醇对肺癌A549细胞生长及凋亡的影响及其可能的机制。方法:取对数生长的肺癌A549细胞,分为对照组、紫杉醇组、金松双黄酮组、金松双黄酮联合紫杉醇组。采用MTT法研究金松双黄酮联合紫杉醇对肺癌A549细胞生长的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测A549细胞中Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:金松双黄酮联合紫杉醇对肺癌A549细胞的生长抑制率高达64.81%,显著强于单纯紫杉醇作用组(P<0.05),且两药合用可显著升高肺癌A549细胞的凋亡率(P<0.01),并抑制凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白的表达,上调Bax的表达。结论:金松双黄酮联合紫杉醇能够增强紫杉醇对肺癌A549细胞生长的抑制作用,促进细胞凋亡,其作用机制可能与调节凋亡基因Bc1-2、Bax的蛋白表达有关。

HPLC法测定云南红豆杉枝叶中金松双黄酮的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定云南红豆杉枝叶中金松双黄酮含量的方法。方法:色谱柱为Agilent Zorbax SB-C_(18) (250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(80:20),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为272 nm,柱温为40℃结果:金松双黄酮的进样量在0.88～4.40μg·mL^(-1)范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999);平均回收率为95.40%,RSD= 3.5%(n=6)。结论:本方法准确、可靠、稳定,可用于云南红豆杉的质量控制。

金松双黄酮联合CX-4945通过Notch1通路调控胶质母细胞瘤细胞增殖与凋亡的机制研究

目的探究金松双黄酮联合CK2抑制剂CX-4945对脑胶质母细胞瘤U87细胞增殖与凋亡的影响及作用机制。方法体外培养脑胶质母细胞瘤U87细胞,分别用0.01、0.10、1.00、10.00、100.00 μmol/L浓度的金松双黄酮处理U87细胞;用1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 μmol/L浓度的CX-4945处理U87细胞。将U87细胞分为对照组(不做任何处理)、金松双黄酮组(100.00 μmol/L金松双黄酮)、CX-4945组(5.00 μmol/L CX-4945)、金松双黄酮联合CX-4945组(100.00 μmol/L金松双黄酮+5.00 μmol/L CX-4945)。采用MTT法检测细胞存活率;Caspase3/7活力检测法和Annexin Ⅴ/ PI双染法检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测100.00 μmol/L金松双黄酮处理U87细胞后Notch1通路相关蛋白ICN1、HES1和DLL3表达情况。结果 0、0.01、0.10、1.00、10.00、100.00 μmol/L浓度的金松双黄酮处理U87细胞存活率分别为(100.00±6.30)%、(112.02±7.63)%、(140.84±6.73)%、(113.92±7.92)%、(102.60±7.12)%、(73.16±2.74)%,差异具有统计学意义(F=55.21,P<0.001);0 μmol/L与0.01、0.10、1.00、100.00 μmol/L浓度时的细胞存活率差异均具有统计学意义(P=0.009;P<0.001;P=0.003;P<0.001)。100.00 μmol/L浓度时的金松双黄酮可抑制U87细胞活性,而其他浓度则表现为U87细胞活性的增强或无明显作用。0、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 μmol/L浓度的CX-4945处理U87细胞存活率分别为(100.00±5.53)%、(108.70±10.24)%、(93.14±2.82)%、(81.46±4.92)%、(56.92±3.99)%、(31.24±2.67)%,差异具有统计学意义(F=135.18,P<0.001);0 μmol/L与1.25、5.00、10.00、20.00 μmol/L浓度时的差异均具有统计学意义(P=0.022;P<0.001;P<0.001;P<0.001)。低浓度(1.25 μmol/L)的CX-4945对U87细胞活性表现为增强,较高浓度(5.00、10.00、20.00 μmol/L)时表现为抑制。对照组、金松双黄酮组、CX-4945组及金松双黄酮联合CX-4945组U87细胞的存活率分别为(100.00±5.53)%、(71.96±2.10)%、(77.66±4.12)%、(42.56±4.22)%,差异具有统计学意义(F=160.56,P<0.001);对照组与各处理组间的差异均具有统计学意义(均P<0.001);金松双黄酮联合CX4945处理组与金松双黄酮组、CX-4945组差异均具有统计学意义(均P<0.001)。上述4组U87细胞的Caspase3/7活力分别为2.34±0.47、4.02±0.22、3.67±0.32、5.85±0.28,差异具有统计学意义(F=55.80,P<0.001);各组的细胞凋亡率分别为(0.40±0.10)%、(17.37±0.57)%、(3.00±0.66)%、(33.47±0.87)%,差异具有统计学意义(F=1 822.18,P<0.001);进一步两两比较发现,对照组与各处理组的Caspase3/7活力、细胞凋亡率差异均具有统计学意义(P<0.001,P=0.001,P<0.001;P<0.001,P=0.001,P<0.001);金松双黄酮联合CX4945组与金松双黄酮组、CX-4945组的Caspase3/7活力、细胞凋亡率差异均具有统计学意义(均P<0.001)。100.00 μmol/L金松双黄酮处理U87细胞后Notch1通路相关蛋白ICN1(0.55±0.07vs.1.01±0.09)、HES1(0.66±0.08vs.1.00±0.06)和DLL3(0.74±0.04vs.1.01±0.09)的蛋白相对表达量均降低,差异均具有统计学意义(t=5.94,P=0.004;t=5.15,P=0.007;t=4.00,P=0.016)。结论金松双黄酮可通过抑制Notch1信号通路,与CK2抑制剂CX-4945协同抑制胶质母细胞瘤U87细胞增殖,促进细胞凋亡。

金松双黄酮对砷致大鼠海马神经细胞衰老的干预效应

[背景]长期砷暴露人群除表现出典型的皮肤损害体征外,往往还伴随神经行为异常症状和体征。[目的]探讨金松双黄酮对亚砷酸钠致大鼠神经细胞衰老的干预效应以及细胞周期相关转录因子E2F1在其中可能的介导作用。[方法]采用4μmol·L亚砷酸钠作用于SH-SY5Y细胞24 h,并分别使用50μg·mL^(-1)银杏叶提取物EGb761及四种主要银杏叶双黄酮(异银杏双黄酮、7-去甲基银杏双黄酮、金松双黄酮和银杏双黄酮)干预24 h,采用CCK-8法测定细胞活性。将32只180~200 g SPF级大鼠随机分为对照组、染砷组(10 mg·kg^(-1))、银杏叶提取物干预组(10 mg·kg^(-1))和金松双黄酮干预组(10 mg·kg^(-1)),每组8只,雌雄各半。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒3个月;干预在染毒2个月后进行,采用灌胃的方式进行给药,干预1个月。采用HE染色法检测大鼠海马结构的改变,采用尼氏染色法检测海马形态及神经细胞数量的改变。此外,分别采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法和Western blotting法检测海马神经细胞的衰老情况及E2F1的表达水平。[结果]与染砷组相比,银杏叶提取物和四种主要的银杏叶双黄酮均有不同程度的细胞活性恢复作用(均P <0.05),其中金松双黄酮相对于银杏叶提取物在拮抗亚砷酸钠神经细胞毒性方面具有更好的活性恢复作用(P <0.05)。HE染色和尼氏染色结果表明:与对照组相比,染砷组大鼠海马神经细胞明显减少且突触结构异常,细胞发生肿胀、核皱缩,出现空泡现象;与染砷组大鼠比较,银杏叶提取物干预组和金松双黄酮干预组大鼠海马神经细胞明显增多且突触结构较正常。SA-β-gal染色结果表明:与对照组(2.88±0.84)相比,染砷组(15.75±3.01)的衰老细胞数量明显增加(P <0.05);与染砷组相比,银杏叶提取物干预组(9.38±1.92)和金松双黄酮干预组(7.75±2.38)衰老细胞数量明显下降(均P <0.05)。Western blotting结果表明:与对照组(1.00±0.17)相比,染砷组(0.65±0.19)海马中E2F1蛋白表达明显降低(P <0.05);与染砷组相比,金松双黄酮干预组(0.89±0.18)海马中E2F1蛋白表达水平明显恢复(P <0.05);与银杏叶提取物干预组(0.68±0.19)相比,金松双黄酮(0.89±0.18)对E2F1表达水平的恢复效果较好(P <0.05)。相关性分析结果表明,E2F1蛋白表达水平与海马神经细胞SA-β-gal染色阳性率呈负相关(r=-0.518,P <0.05)。[结论]金松双黄酮是银杏叶提取物的有效活性成分,其可有效抑制亚砷酸钠诱导的海马神经细胞衰老,E2F1可能在其中发挥重要的介导作用。

曼地亚红豆杉双黄酮结构表征和Taxol定量

目的：对曼地亚红豆杉黄酮类成分进行研究，对其不同药用部位紫杉醇含量进行测定。方法：采用反复硅胶柱层析进行分离纯化，根据理化性质、光谱特征鉴定其结构。采用HPLC法测定曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根三种药用部位中紫杉醇的含量，色谱柱为C18ODS（150mm×4．6mm，5μm），流动相：甲醇-水（3：1），流速0．8ml／min，检测波长228nm。结果：从曼地亚红豆杉中分离得到三个双黄酮类化合物并进行结构鉴定为金松双黄酮（Ⅰ）、银杏黄素（Ⅱ）、7，7″，4＇-Tri—O—Methylamentoflavone（Ⅲ）。曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根中紫杉醇含量依次为：0．0308、0．02191、0．01983mg／g。结论：化合物Ⅰ～Ⅲ为首次从该种植物中得到；曼地亚红豆杉中除树皮外的药用部位枝叶的含量最高，主根次之，须根含量最低。

星点设计-效应面法优化杉木枝叶中双黄酮的提取工艺

采用星点设计-效应面法优化杉木枝叶中穗花杉双黄酮和金松双黄酮的提取工艺。以乙醇体积分数、料液比、提取时间为自变量,穗花杉双黄酮和金松双黄酮转移率的归一化值为因变量,通过对自变量与因变量的二次多项式拟合,采用效应面法选取较优的工艺条件,并进行预测分析。最终确定穗花杉双黄酮和金松双黄酮的最佳提取工艺为:乙醇体积分数为50%,料液比为1∶13,超声提取3次,每次提取60 min,最佳工艺验证结果与模型预测值相差-2.55%。结果表明:星点设计-效应面法优选的穗花杉双黄酮和金松双黄酮的提取工艺,方法简便、可靠。

紫杉中紫杉烷和双黄酮类成分的薄层色谱鉴别

目的:建立紫杉药材中紫杉烷类和双黄酮类成分的薄层色谱鉴别法。方法:以紫杉宁为对照品,石油醚-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(8∶2∶2∶1)为展开剂系统,用硅胶G板鉴别紫杉烷类成分;以金松双黄酮和银杏双黄酮为对照品,石油醚-乙酸乙酯-甲醇(4∶1∶1)为展开剂系统,用聚酰胺薄膜鉴别双黄酮类成分。结果:本方法斑点清晰,重复性好,并可将紫杉区别于一些松、杉、柏类植物的枝叶。结论:本方法简便,快速,可用于紫杉药材的质量控制。

银杏双黄酮高效液相色谱定量分析方法研究

建立HPLC法同时测定银杏植物中阿曼托黄素、白果素、银杏黄素异构体、金松双黄酮含量。银杏叶、外种皮、白果提取液的分析采用Elite Hypersil ODS2(4.0 mm×200 mm,5μm),以甲醇-有机酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,检测波长330 nm,柱温35℃。4种成分在各自范围内均呈良好的线性关系(r≥0.9993),平均加样回收率98.3%~101.0%,RSD为1.74%~2.23%。银杏叶和外种皮中均含有4种单组分双黄酮,其中白果中双黄酮总量最低,银杏叶中最高。方法准确稳定、重复性好,可用于银杏中双黄酮类成分含量的测定。

银杏叶中双黄酮成分的提取与测定

目的分离纯化银杏Ginkgo biloba叶中的双黄酮类成分,考察银杏叶变黄前后黄酮类成分质量分数的变化。方法从自然脱落的银杏叶中提取分离双黄酮类成分,对其乙醇提取物的二氯甲烷部位进行了分离,通过硅胶柱色谱和半制备液相方法对目标成分进行制备,采用HPLC法对银杏叶中的双黄酮进行了测定。结果分离的4个化合物分别为去甲银杏双黄酮、银杏双黄酮、异银杏双黄酮和金松双黄酮。对变黄前后银杏叶中4种双黄酮进行测定,结果表明,自然黄叶前3周内,银杏叶中双黄酮量逐渐降低,质量分数差别达30%左右。结论 HPLC法可用作银杏叶中双黄酮的测定,方法简便、可靠,能用于银杏叶的质量控制。同时,制备条件可对快速制备双黄酮对照品提供依据。

曼地亚红豆杉酒炙工艺及质量标准研究

目的:优选曼地亚红豆杉最佳酒炙工艺并建立酒炙曼地亚红豆杉饮片质量标准。方法:采用HPLC法测定紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮含量;运用AHP-熵权法结合Box-Behnken设计-响应面法考察加酒量、闷润时间、炮制时间和炮制温度对酒炙曼地亚红豆杉饮片质量的影响,优选曼地亚红豆杉酒炙工艺参数,观察酒炙曼地亚红豆杉饮片性状及粉末显微特征,并通过10批样品中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物及紫杉烷类和黄酮类成分的分析,建立酒炙曼地亚红豆杉饮片的质量标准。结果:优化所得最优酒炙工艺参数为加酒量14.91%,闷93.60 min后,在102.89℃温度下炒16.06 min;测得炮制品浸出物的含量为34.10%~36.44%,紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮含量分别增加了17.29%、16.78%和73.02%。结论:优选的曼地亚红豆杉酒炙工艺稳定、合理,质量标准可控性强,可为酒炙曼地亚红豆杉饮片的规范化生产及应用提供参考。

基于指纹图谱结合化学模式识别对不同发酵程度曼地亚红豆杉曲的质量评价

目的建立曼地亚红豆杉Taxus×media曲指纹图谱,对曼地亚红豆杉曲质量控制和资源开发提供科学依据。方法采用HPLC法建立45批曼地亚红豆杉曲的指纹图谱,通过对照品比对,对共有峰进行指认,确定并建立7种有效成分含量的测定方法。在指纹图谱基础上,结合聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法-判别分析等筛选出不同发酵程度曼地亚红豆杉曲间差异性标志物。结果45批曼地亚红豆杉共有32个共有峰,指认了18种成分,相似度均大于0.9。通过聚类分析将不同发酵程度曼地亚红豆杉曲分为5类,主成分分析提取了4个主成分;综合分析筛选10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱、紫杉醇、7-表紫杉醇、银杏双黄酮、金松双黄酮作为曼地亚红豆杉曲的质控成分,质量分数范围分别为0.0715~0.1237、0.1245~0.1171、0.1135~0.1261、0.1225~0.1627、0.0710~0.0893、0.8091~1.1102、1.0031~1.9948 mg/g。结论建立的指纹图谱及多成分含量测定方法专属性强,稳定,可靠,为曼地亚红豆杉曲的质量控制及资源开发提供参考。

湖北钟祥南方红豆杉中5种黄酮全年含量变化分析

目的:建立南方红豆杉枝叶中芦丁、槲皮素、异银杏双黄酮、穗花杉双黄酮、金松双黄酮的含量测定方法,并测定湖北钟祥地区南方红豆杉中5黄酮全年含量变化,考察其相关性。方法:采用ZORBAX Eclipse plus C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇和水梯度洗脱,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为1.00 mL·min^(-1),进样量为10μL,理论塔板数不低于2 500。结果:5种黄酮年平均含量从高到低依次为芦丁、异银杏双黄酮、金松双黄酮、槲皮素和穗花杉双黄酮;5种黄酮含量随季节性变化明显,含量最高的是在1-3月,含量最低的是6月;芦丁、异银杏双黄酮、金松双黄酮含量相互间有影响,槲皮素、穗花杉双黄酮含量与其他3种黄酮含量相互不影响。结论:该测定方法简便、准确、重复性好,可用于南方红豆杉枝叶中黄酮含量的定量测定。