金标免疫层析读数仪在棘球蚴病抗体检测中的应用

用金标免疫层析读数仪和肉眼两种方法判读采用金标免疫层析试纸条检测的159份棘球蚴病患者血清和80份其他肝脏疾病患者血清。结果显示,金标免疫层析读数仪检测抗细粒棘球蚴抗体的敏感性(95.6%,152/159)、特异性(93.7%,75/80)和准确性(95.0%,227/239)均高于肉眼判读结果 (92.4%、85.0%和89.9%),而假阴性率(4.4%,7/159)和假阳性率(6.3%,5/80)均低于肉眼判读结果 (7.5%和15.0%)。

金标免疫层析试条检测样品中黄曲霉毒素B_1的误差分析

为了扩大金标免疫层析试条(GICA)检测食品和饲料中黄曲霉毒素B1的应用范围,研究了样品基质对试剂条信号强度的影响,探讨了GICA测定饲料和各种发酵类食品样品时,提取液中NaCl、金属离子(Fe3+,Cu2+,Pb2+,As3+)和脂肪含量对检测结果的影响,并研究了消除影响的方法。结果表明,3种阴性样品(大米、玉米和小麦粉)均存在不同程度的非特异性干扰,大米的影响最小,其次为玉米和小麦粉,大米的最佳稀释倍数为10倍,玉米和小麦粉为30倍;随NaCl质量浓度增加,检测结果有偏向假阳性的趋势;4种金属离子对检测结果的影响程度依次为Fe3+>Cu2+>Pb2+>As3+;随着样品中油脂含量的增高,用GICA检测结果偏阳性的程度加剧。对粗提取液用氯仿法萃取后挥干再溶解,可将盐离子和重金属离子对测定的影响控制在允许范围之内;用石油醚脱脂,可使油脂对测定结果的影响降到最低。

金标免疫层析法检测黄曲霉毒素B_1的方法

应用金标免疫层析法(GICA)研制的金标免疫试纸条对食品中黄曲霉毒素B1的检测,来确立该方法的各项技术指标。结果表明:方法的最低检测限:2.5ng/mL;金标免疫试纸条在4℃环境下可稳定10个月以上;与类似毒素AFB2、AFG2的交叉反应率分别是7.14%、6.25%;检测时间小于15min;GICA与ELISA方法的符合率达90%以上。该方法简便、快速,有较高的灵敏度,重复性好,特异性强,能定性或半定量检测食品中的黄曲霉毒素B1含量。

金标免疫层析试验与酶联免疫吸附试验在肺炎支原体检测中的比较分析

肺炎支原体（M pneumoniae,MP）主要引起人类原发性非典型肺炎。约占非细菌性肺炎的50%左右-（[1]）。MP的感染者和携带者是主要的传染源,潜伏期就有传染性,得病初期传染性最强,可以由感染者的鼻咽喉及气管分泌物排出。MP可经直接接触或者经口、鼻咽分泌物及痰飞沫传播,人群普遍易感,特别是免疫力低下者和儿童更易感染。在美国MP肺炎每年的发病率为1/1 000,约200万人患病,

两种方法制备纳米金原位增敏金标免疫层析试验的比较

目的比较两种化学方法制备纳米金的增敏效果,找出相对合适的制备纳米金增敏金标免疫层析试验的方法。方法以金标免疫层析试验检测血浆绒毛膜促性腺激素(HCG)为基础,用盐酸羟胺和抗坏血酸还原氯金酸制备纳米金颗粒,判断纳米金原位所形成的纳米颗粒颜色,检测其灵敏度。结果盐酸羟胺还原法增敏血浆HCG金标免疫层析试验,相对增敏前检测灵敏度提高约16倍,且重复性较好。抗坏血酸还原法增敏血浆HCG金标免疫层析试验,相对增敏前检测灵敏度提高约4倍。结论盐酸羟胺还原法制备纳米金对血浆HCG金标免疫层析试验增敏倍数较高,重复性较好,试验结果可靠,可推广使用。

纳米金增敏cTnI金标免疫层析试验研究

目的：研究一种纳米金增强心肌肌钙蛋白I（cTnI）金标免疫层析试验灵敏度的试验方法。方法以血清cTnI金标免疫层析试验为基础，以改性溶液做预处理，盐酸羟胺还原氯金酸制备纳米金颗粒，使金标抗原抗体反应复合物的颗粒增大，金标处颜色加深，显色信号增强，提高检测灵敏度，并以此做批内和日间重复性检测。结果盐酸羟胺还原氯金酸增敏cTnI金标免疫层析试验，较增敏前检测灵敏度提高16倍，在10～15 min内可完成，批内和日间重复性较好，试验结果快速、稳定、可靠。结论盐酸羟胺还原氯金酸制备纳米金颗粒在一定改性溶液环境下，对人血清cTnI金标免疫层析试验有一定增敏效果，重复性较好，结果稳定可靠，可为适时、快速、灵敏的现场检测方法提供一定技术支持。

金标免疫层析法与间接血凝法在鼠疫诊断中的比较

目的了解胶体金快速检测试剂盒检测鼠疫Fl抗体的应用。方法按鼠疫胶体金快速检测试剂盒的使用说明进行,并用间接血凝法(IHA)进行比较。结果检测了采集于青海鼠疫疫源地内及非疫源地血清共3 079份,检出阳性血清268份,对照组血清14份,结果均为阴性,与IHA结果基本一致。结论胶体金快速检测试剂盒诊断鼠疫简便、快速、特异、敏感,最适宜现场鼠疫检测。

金标免疫层析法的全面质量保证

为了建立金标免疫层析法的全面质量保证体系。我们结合检验医学一般质量保证原则和金标免疫层析法检验质量保证特殊性，仔细分析金标免疫层析法全部检验过程中各个环节的影响因素，提出措施，建立金标免疫层析法全部检验过程的全面质量保证体系。分别针对金标免疫层析法全程检验过程分析前、中、后三大部分17个方面，尤其是在试剂、标本采集、质控、结果判定、带现象、假阴性和假阳性结果等主要具有特殊性方面，提出质量保证措施，以建立金标免疫层析法的全面质量保证体系。

金标免疫层析法检验粪便轮状病毒对婴幼儿腹泻的临床价值

目的通过在腹泻婴幼儿中应用金标免疫层析法对粪便轮状病毒实施检验,同时,采用RT-PCR法对检验结果实施验证,分析临床的诊断准确性。方法选取2018年2月至2019年3月本院收治的75例腹泻婴幼儿作为研究对象,采用金标免疫层析法检验粪便轮状病毒。分析研究对象的年龄与季节分布情况,同时,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法实施检验,探究腺病毒、诺如病毒以及星状病毒的感染情况。结果婴幼儿在1岁以下的情况较为常见,共29例,占比为38.67%;冬季与秋季为轮状病毒导致婴幼儿腹泻的高发季节;本研究选取轮状病毒75例,腹泻婴幼儿60例RT-PCR法检验结果为阳性,分别有10、5、13例合并感染星状病毒、诺如病毒、腺病毒,占比分别为16.67%、8.33%、21.67%;其中55例通过金标免疫层析法检测结果呈阳性,与RT-PCR法检验结果比较,检验准确性为91.67%。结论在腹泻婴幼儿中应用金标免疫层析法检验效果显著,可有效、快速的检查粪便轮状病毒,同时,通过金标免疫层析法发现,星状病毒、诺如病毒、腺病毒感染同样属于诱发婴幼儿腹泻的重要病原体,适用于基层医院。

金标免疫层析法测定人巨细胞病毒IgM抗体方法的建立

目的 建立金标免疫层析法检测人巨细胞病毒IgM抗体的方法。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金 ,用胶体金标记抗人 IgM单克隆抗体 ,金标免疫层析法与EIA法检测 392份临床标本 ,2种方法进行比较。结果 EIA法阳性率 2 .5 5 % ,金标免疫层析法阳性率 2 .5 5 % ,两者的符合率 10 0 % ,两者间无显著性差异。结论 金标免疫层析法是一种具有灵敏、快速、准确、稳定等特点的方法 ,适合基层医疗机构使用。

金标免疫层析试验与酶联免疫吸附试验在肺炎支原体检测中的作用分析

目的探讨金标免疫层析试验与酶联免疫吸附试验在肺炎支原体检测中的作用。方法选取2018年6~9月诊治的疑似肺炎支原体感染患者91例作为研究对象,应用金标免疫层析试验、酶联免疫吸附试验方法检测本组患者的肺炎支原体IgM抗体,比较两种检验方法的诊断准确度、特异度和敏感度差异。结果金标免疫层析试验的诊断准确度为92.31%(84/91),敏感度为94.94%(75/79),特异度为75.00%(9/12);酶联免疫吸附试验的诊断准确度为94.51%(86/91),敏感度为98.73%(78/79),特异度为66.67%(8/12);酶联免疫吸附试验的诊断准确度、敏感度均高于金标免疫层析试验,而诊断特异度低于金标免疫层析试验,差异无统计学意义(P>0.05)。结论酶联免疫吸附试验在肺炎支原体检测中敏感性较高,但操作繁琐、耗时久,不适宜单人份检测,而金标免疫层析试验具有操作简单、快速等优势,适用于肺炎支原体感染诊断中,值得借鉴。

使用金标免疫层析法检测儿童腹泻粪便标本轮状病毒的结果分析

目的使用金标免疫层析法检测儿童腹泻粪便标本,将其轮状病毒的结果进行分析汇总。方法选取本院2020年1月-2021年1月收治的86例儿童腹泻者,根据金标免疫层析法的检测方式,将检测结果为阳性者的轮状病毒粪便标本进行回顾性分析。将86例阳性者的轮状病毒粪便标本送往我市疾控中心,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行检测,分析对比检测情况。结果86例儿童腹泻感染经金标免疫检测为阳性者80例,阳性率为93.02%,同时将86例粪便标本送往本市疾控中心采用RT-PCR检测验证70例阳性,轮状病毒阳性率为81.39%,两种检测方法相比,金标免疫检测结果其准确度更高;80例阳性者中,1岁以下的婴幼儿为31例,占38.75%,较为多见,其次为1岁、2岁的儿童,各占23.75%、25.00%。季节性以秋季和冬季为轮状病毒的高发期,11-12月份36例,占45.00%,1-2月、9-10月18例、16例,占22.50%、20.00%;男女性别比中2组阳性率比较,经统计学分析无明显差异性(χ^(2)=2.500,P>0.05)。结论轮状病毒多以5岁以下的婴幼儿为主,秋冬季节较为常见,采取金标免疫层析法的检测方式,来检测儿童的粪便标本,其操作简单,可快速准确地检测出轮状病毒,且该方法具有一定的临床诊断价值,值得推广应用。

金标免疫层析法检测恙虫病抗体的效果测评

目的对新开发的恙虫病金标试剂做特异性和敏感性的效果测评。方法采用微量间接免疫荧光试验(IFA)检测发热患者血清的恙虫病IgG抗体,然后选取阴性及强阳性血清共242份,用3种金标免疫层析试剂条检测恙虫病东方体IgM、IgG和总抗体。在对照成立的情况下,观察检测线的反应情况,以出现红色条带判为阳性,再用统计学方法进行分析。结果金标免疫层析法检测恙虫病IgM、IgG和总抗体的敏感性分别为62.25%、30.12%和93.98%,特异性分别为98.11%、98.74%和96.23%,与IFA比较的统计学结果分别为P<0.05、P<0.05和P>0.05。结论 IgG和IgM抗体试剂条的检测结果与IFA检测结果差异有统计学意义;总抗体试剂条的检测结果与IFA检测结果差异无统计学意义,可替代IFA检测恙虫病抗体。

金标免疫层析法检测抗环瓜氨酸肽抗体的诊断价值评价

目的:评价金标免疫层析法检测抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,抗CCP抗体)的诊断价值,比较与其它三种试剂检测结果的一致性。方法:检测140例类风湿性关节炎(RA)患者和146例对照血清的抗CCP抗体,比较4种不同试剂检测结果间的一致程度。结果:金标免疫层析试剂检测的敏感性为83.6%,特异性为93.2%,与其余3种试剂检测结果一致性极强。结论:金标免疫层析试剂诊断类风湿性关节炎的敏感性和特异性满足临床要求,与其他试剂的检测结果一致性极强,值得临床推广应用。

金标免疫层析法检测儿童腹泻粪便标本轮状病毒及结果分析

目的使用金标免疫层析法检测了解儿童腹泻粪便标本轮状病毒,并采用RT-PCR法对检测结果进行验证,判断检测结果的可靠性寻找其流行病学特征,为应用轮状病毒疫苗提供研究数据。方法对124例轮状病毒金标免疫层析法检测阳性的儿童腹泻患者粪便标本进行回顾性分析,对124例儿童腹泻患者粪便标本进行回顾性分析,采用金标免疫层析法检测轮状病毒呈阳性。分析标本的年龄分布与季节分布;采用RT-PCR法对标本的轮状病毒进行验证,并检测标本的星状病毒、诺如病毒和腺病毒感染情况。结果 124例患儿的平均年龄(1.2±0.3)岁,年龄为0岁者的例数最多,占41.13%(51/124);随着年龄的升高,标本数越来越少。124例标本中,12月、1月、11月、2月、10月的例数较多;轮状病毒导致的儿童腹泻多发于冬季和秋季,少发于夏季和春季。RTPCR法检出轮状病毒阳性者120例,金标免疫层析法与RT-PCR法检测结果的相符率为96.77%。124例腹泻患儿中合并星状病毒感染者20例,占16.13%;合并诺如病毒者9例,占7.26%;合并腺病毒者27例,占21.77%。结论金标免疫层析法操作简便,可快速准确实现对儿童腹泻粪便标本的轮状病毒检测。星状病毒、诺如病毒和腺病毒也是导致儿童腹泻的病原体。

解脲支原体金标免疫层析检测试剂盒的研制

目的研制一种解脲支原体(Uu)胶体金免疫层析试剂盒,用于临床快速检测、流行病学调查。方法原核表达解脲支原体MB(Uu-MB)蛋白,制备Uu-MB单抗后胶体金标记,采用双抗体夹心法制备试剂盒,评价试剂盒的特异性、敏感性、稳定性及符合率。结果对Uu阳性培养物和Uu-MB具有良好特异性;37℃放置12d质量稳定;试剂盒与(Uu)支原体分离鉴别管的检测阳性率分别为29.59%和71.42%;Uu金标检测试剂盒与Uu分离鉴别管的阳性、阴性符合率为41.28%、100.0%;Uu分离鉴别管培养物经PCR鉴定,两者的阳性、阴性符合率为100%、75.65%。结论研制的试剂盒操作简便,具有特异性强、敏感性高等特点,是一种适宜普及推广的Uu感染检测产品。

猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。

氯噻啉胶体金增强免疫层析分析方法的建立

利用生物素-链霉亲和素的高亲和作用,研制了一种简便、快速、高灵敏的氯噻啉胶体金增强免疫层析分析方法(Gold immunochromatographic assay,GICA)。将氯噻啉抗体和生物素化DNA与13 nm胶体金双标记,将链霉亲和素与41 nm胶体金标记,制备了氯噻啉胶体金增强免疫层析试纸条。系统优化了试纸条的工作条件,并通过交叉反应、添加回收和高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)验证评价GICA的敏感性、特异性、精确性和准确性。在最优条件下,试纸条可在10 min内实现可视化判读,检出限(LOD)为25 ng/m L,除与吡虫啉有较大交叉反应外,与其它类似化合物无交叉反应。氯噻啉在河水、大米、黄瓜、番茄、梨、甘蓝和苹果样品中的添加浓度为0.05,0.5和5μg/g时,GICA的检测结果均符合添加水平。在未知浓度河水和梨样品的检测中,GICA的检测结果与HPLC方法相符。

快速诊断家畜日本血吸虫病免疫层析试纸条的研制与初步应用

目的开发研制敏感、简便、快速、经济的日本血吸虫病诊断试纸条。方法利用双抗原夹心法,以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)为检测抗原,以胶体金标记SEA为探针,采用自行设计的免疫层析试纸条装置,检测家畜血清中血吸虫特异性IgG抗体,并用ELISA方法进行比较。结果用该试纸条检测107份人工感染血吸虫病羊血清,其检出率为91.6%;检测80份健康绵羊血清,阴性符合率为87.5%;检测20份粪检阳性水牛血清及15份粪检阴性血清,其阳性符合率为100.0%,阴性符合率为86.7%;检测24份肝片形吸虫病羊血清,交叉反应率为12.5%,与锥虫病牛血清未见交叉反应;与ELISA检测结果比较,两种方法具有良好的一致性。结论应用试纸条诊断家畜日本血吸虫病敏感性高、特异性强,且操作简便、快速,不需特殊仪器设备,适合于基层使用。