金标免疫层析法检测黄曲霉毒素B_1的方法

应用金标免疫层析法(GICA)研制的金标免疫试纸条对食品中黄曲霉毒素B1的检测,来确立该方法的各项技术指标。结果表明:方法的最低检测限:2.5ng/mL;金标免疫试纸条在4℃环境下可稳定10个月以上;与类似毒素AFB2、AFG2的交叉反应率分别是7.14%、6.25%;检测时间小于15min;GICA与ELISA方法的符合率达90%以上。该方法简便、快速,有较高的灵敏度,重复性好,特异性强,能定性或半定量检测食品中的黄曲霉毒素B1含量。

金标免疫层析法与间接血凝法在鼠疫诊断中的比较

目的了解胶体金快速检测试剂盒检测鼠疫Fl抗体的应用。方法按鼠疫胶体金快速检测试剂盒的使用说明进行,并用间接血凝法(IHA)进行比较。结果检测了采集于青海鼠疫疫源地内及非疫源地血清共3 079份,检出阳性血清268份,对照组血清14份,结果均为阴性,与IHA结果基本一致。结论胶体金快速检测试剂盒诊断鼠疫简便、快速、特异、敏感,最适宜现场鼠疫检测。

金标免疫层析法的全面质量保证

为了建立金标免疫层析法的全面质量保证体系。我们结合检验医学一般质量保证原则和金标免疫层析法检验质量保证特殊性，仔细分析金标免疫层析法全部检验过程中各个环节的影响因素，提出措施，建立金标免疫层析法全部检验过程的全面质量保证体系。分别针对金标免疫层析法全程检验过程分析前、中、后三大部分17个方面，尤其是在试剂、标本采集、质控、结果判定、带现象、假阴性和假阳性结果等主要具有特殊性方面，提出质量保证措施，以建立金标免疫层析法的全面质量保证体系。

金标免疫层析法检验粪便轮状病毒对婴幼儿腹泻的临床价值

目的通过在腹泻婴幼儿中应用金标免疫层析法对粪便轮状病毒实施检验,同时,采用RT-PCR法对检验结果实施验证,分析临床的诊断准确性。方法选取2018年2月至2019年3月本院收治的75例腹泻婴幼儿作为研究对象,采用金标免疫层析法检验粪便轮状病毒。分析研究对象的年龄与季节分布情况,同时,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法实施检验,探究腺病毒、诺如病毒以及星状病毒的感染情况。结果婴幼儿在1岁以下的情况较为常见,共29例,占比为38.67%;冬季与秋季为轮状病毒导致婴幼儿腹泻的高发季节;本研究选取轮状病毒75例,腹泻婴幼儿60例RT-PCR法检验结果为阳性,分别有10、5、13例合并感染星状病毒、诺如病毒、腺病毒,占比分别为16.67%、8.33%、21.67%;其中55例通过金标免疫层析法检测结果呈阳性,与RT-PCR法检验结果比较,检验准确性为91.67%。结论在腹泻婴幼儿中应用金标免疫层析法检验效果显著,可有效、快速的检查粪便轮状病毒,同时,通过金标免疫层析法发现,星状病毒、诺如病毒、腺病毒感染同样属于诱发婴幼儿腹泻的重要病原体,适用于基层医院。

使用金标免疫层析法检测儿童腹泻粪便标本轮状病毒的结果分析

目的使用金标免疫层析法检测儿童腹泻粪便标本,将其轮状病毒的结果进行分析汇总。方法选取本院2020年1月-2021年1月收治的86例儿童腹泻者,根据金标免疫层析法的检测方式,将检测结果为阳性者的轮状病毒粪便标本进行回顾性分析。将86例阳性者的轮状病毒粪便标本送往我市疾控中心,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行检测,分析对比检测情况。结果86例儿童腹泻感染经金标免疫检测为阳性者80例,阳性率为93.02%,同时将86例粪便标本送往本市疾控中心采用RT-PCR检测验证70例阳性,轮状病毒阳性率为81.39%,两种检测方法相比,金标免疫检测结果其准确度更高;80例阳性者中,1岁以下的婴幼儿为31例,占38.75%,较为多见,其次为1岁、2岁的儿童,各占23.75%、25.00%。季节性以秋季和冬季为轮状病毒的高发期,11-12月份36例,占45.00%,1-2月、9-10月18例、16例,占22.50%、20.00%;男女性别比中2组阳性率比较,经统计学分析无明显差异性(χ^(2)=2.500,P>0.05)。结论轮状病毒多以5岁以下的婴幼儿为主,秋冬季节较为常见,采取金标免疫层析法的检测方式,来检测儿童的粪便标本,其操作简单,可快速准确地检测出轮状病毒,且该方法具有一定的临床诊断价值,值得推广应用。

金标免疫层析法检测恙虫病抗体的效果测评

目的对新开发的恙虫病金标试剂做特异性和敏感性的效果测评。方法采用微量间接免疫荧光试验(IFA)检测发热患者血清的恙虫病IgG抗体,然后选取阴性及强阳性血清共242份,用3种金标免疫层析试剂条检测恙虫病东方体IgM、IgG和总抗体。在对照成立的情况下,观察检测线的反应情况,以出现红色条带判为阳性,再用统计学方法进行分析。结果金标免疫层析法检测恙虫病IgM、IgG和总抗体的敏感性分别为62.25%、30.12%和93.98%,特异性分别为98.11%、98.74%和96.23%,与IFA比较的统计学结果分别为P<0.05、P<0.05和P>0.05。结论 IgG和IgM抗体试剂条的检测结果与IFA检测结果差异有统计学意义;总抗体试剂条的检测结果与IFA检测结果差异无统计学意义,可替代IFA检测恙虫病抗体。

金标免疫层析法检测抗环瓜氨酸肽抗体的诊断价值评价

目的:评价金标免疫层析法检测抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,抗CCP抗体)的诊断价值,比较与其它三种试剂检测结果的一致性。方法:检测140例类风湿性关节炎(RA)患者和146例对照血清的抗CCP抗体,比较4种不同试剂检测结果间的一致程度。结果:金标免疫层析试剂检测的敏感性为83.6%,特异性为93.2%,与其余3种试剂检测结果一致性极强。结论:金标免疫层析试剂诊断类风湿性关节炎的敏感性和特异性满足临床要求,与其他试剂的检测结果一致性极强,值得临床推广应用。

金标免疫层析法检测儿童腹泻粪便标本轮状病毒及结果分析

目的使用金标免疫层析法检测了解儿童腹泻粪便标本轮状病毒,并采用RT-PCR法对检测结果进行验证,判断检测结果的可靠性寻找其流行病学特征,为应用轮状病毒疫苗提供研究数据。方法对124例轮状病毒金标免疫层析法检测阳性的儿童腹泻患者粪便标本进行回顾性分析,对124例儿童腹泻患者粪便标本进行回顾性分析,采用金标免疫层析法检测轮状病毒呈阳性。分析标本的年龄分布与季节分布;采用RT-PCR法对标本的轮状病毒进行验证,并检测标本的星状病毒、诺如病毒和腺病毒感染情况。结果 124例患儿的平均年龄(1.2±0.3)岁,年龄为0岁者的例数最多,占41.13%(51/124);随着年龄的升高,标本数越来越少。124例标本中,12月、1月、11月、2月、10月的例数较多;轮状病毒导致的儿童腹泻多发于冬季和秋季,少发于夏季和春季。RTPCR法检出轮状病毒阳性者120例,金标免疫层析法与RT-PCR法检测结果的相符率为96.77%。124例腹泻患儿中合并星状病毒感染者20例,占16.13%;合并诺如病毒者9例,占7.26%;合并腺病毒者27例,占21.77%。结论金标免疫层析法操作简便,可快速准确实现对儿童腹泻粪便标本的轮状病毒检测。星状病毒、诺如病毒和腺病毒也是导致儿童腹泻的病原体。

猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。

快速诊断家畜日本血吸虫病免疫层析试纸条的研制与初步应用

目的开发研制敏感、简便、快速、经济的日本血吸虫病诊断试纸条。方法利用双抗原夹心法,以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)为检测抗原,以胶体金标记SEA为探针,采用自行设计的免疫层析试纸条装置,检测家畜血清中血吸虫特异性IgG抗体,并用ELISA方法进行比较。结果用该试纸条检测107份人工感染血吸虫病羊血清,其检出率为91.6%;检测80份健康绵羊血清,阴性符合率为87.5%;检测20份粪检阳性水牛血清及15份粪检阴性血清,其阳性符合率为100.0%,阴性符合率为86.7%;检测24份肝片形吸虫病羊血清,交叉反应率为12.5%,与锥虫病牛血清未见交叉反应;与ELISA检测结果比较,两种方法具有良好的一致性。结论应用试纸条诊断家畜日本血吸虫病敏感性高、特异性强,且操作简便、快速,不需特殊仪器设备,适合于基层使用。

重组汉坦病毒核衣壳蛋白抗原用于胶体金标记免疫层析法检测肾综合征出血热抗体

目的 制备高表达量、高活性的HVNP重组抗原，以此为基础建立一个可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体的快速胶体金标记诊断试剂盒。方法 从TA-A537中扩增出截短的HV S基因片段p6-119，定向克隆至原核表达载体pET-30a中进行原核表达，采用亲和层析法纯化重组蛋白。以胶体金标记重组抗原，应用金标快速免疫层析法同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体。结果 金标快速免疫层析法可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体，与WA比较，IgG抗体检测的敏感性和特异性分别为94．9％、100％。与ELISA比较，IgM抗体检测的敏感性和特异性均为100％。结论 截短的重组汉坦病毒NP蛋白表达量高且具有良好的抗原性。以此为基础建立的金标快速免疫层析法显示出很高的敏感性和特异性，且具有简便、快速等优点，非常适用于各种层次尤其是缺乏实验条件和专业人员的基层医疗单位对HFRS疑似患者作出早期诊断。

婴幼儿轮状病毒两种检测方法的比较

目的:比较轮状病毒(RV)金标免疫层析法(GICA)和电镜法(EM),为实验室合理选择检测方法提供依据。方法:采用GICA和EM法对120例婴幼儿腹泻标本和100例正常婴幼儿粪便标本进行检测,计算阳性率,并对其检测结果进行统计学分析与比较。结果:EM法的阳性率37.5%(45/120)高于(GICA)法的阳性率33.3%(40/120),差异有统计学意义(Kappa=0.392,χ2=19.64,P<0.01)。两种方法对正常对照组进行检测,结果均为阴性。结论:GICA法和EM法检测婴幼儿粪便中轮状病毒,结果有明显差异。EM法阳性率高,而GICA法低,并且两种方法的假阳性率几乎不存在。

食品中黄曲霉毒素B_1检测方法的发展

黄曲霉毒素是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌代谢产生的致癌、致畸、剧毒化合物,广泛分布于农作物的生长、收获、储运等各个阶段,是一类由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的剧毒代谢产物,主要有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,以及另外两种代谢产物M1、M2。黄曲霉毒素B1污染的食物主要是花生、玉米、稻谷、小麦、花生油等粮油食品,且以南方高温。

取材方法对男性不育患者衣原体检测的影响

目的:探讨男性不育患者CT感染更好的临床检测方法。方法:分别采用精液法、尿道拭子法、尿道拭子加尿沉渣法三种方法,运用用金标斑点免疫层析法进行CT抗原检测。结果:精液法阳性率为7.5%;尿道拭子法为5.0%;尿道拭子加尿沉渣法为25.0%。结论:尿道拭子加尿沉渣法检测的阳性率最高,可作为男性泌尿生殖道CT感染检测的首选方法。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性在产前筛查前的性能验证

目的:亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性检测是产前筛查的一个重要项目,有助于指导临床,避免新生儿缺陷有重要意义,需确保结果的准确性。方法:选取门诊进行产前筛查的孕妇样本(覆盖MTHFR三种基因型),对西安金磁纳米生物技术有限公司的MTHFR C677T基因检测试剂盒进行检测下限、符合率、精密度三方面的性能验证。结果:MTHFR C677T基因检测试剂盒具有高精密度和符合率,在临床应用中的安全性和有效性均能保证。结论:MTHFR C677T基因快速层析检测系统实验快速简便,在短时间内就可观察到结果,基本满足对产妇进行产前筛查的要求,可以应用于临床检测。

广州市海珠区723例疑似登革热病例血清学检测分析

目的分析疑似登革热病例实验室Ig M抗体检测结果,为有效控制登革热流行提供科学依据。方法收集临床医生报告的疑似登革热病例血清样本,随机采用金标免疫层析法（ICT）或捕捉酶联免疫吸附试验（Mac-ELISA）进行病毒特异性Ig M抗体检测,统计学比较两种检测方法的差异,分析区域内登革热流行特征。结果共检测样本723例,其中ICT法检测样本345例,检出阳性100例,阳性检出率为28.99%;Mac-ELISA法累计检测样本486例,阳性检出120例,阳性检出率24.69%,两种方法的阳性检出率差异无统计学意义（χ2=1.911,P〉0.05）。全区18条街道均有阳性病例发生,发病高峰期为10月,20~49岁年龄段为主要发病人群,男女性别比为1：1.12。结论区域内登革热发病集中在人口密集及卫生环境相对较差的区域,阳性病例集中出现在8~11月,中青年为主要发病人群,应适时防控,严防暴发流行;实验室检测结果与采样时间密切相关,ICT检测方法可以作为登革热流行期间早期筛查,及时采集患者血清进行Ig M抗体检测对疫情防控具有重要意义。