金标免疫斑点渗滤试验在肺结核诊断中的应用

肺结核病的诊断主要是根据临床表现、胸部X线检查及痰涂片检查.胸部X线检查缺乏特异性,痰菌检查的阳性率又较低,痰培养虽可提高诊断的阳性率,但费时较长(6～8周),且阳性率仍较低(50%).因此,探测更为简便的结核病诊断方法已引起人们普遍关注.近年来兴起的抗结核分支杆菌抗体的血清学诊断方法日益受到重视.

金标免疫斑点试验快速检测轮状病毒抗原的临床应用

轮状病毒(rotavirus,RV)是婴幼儿秋冬季腹泻的主要病原。近年来通过免疫电镜、乳胶凝集试验、酶联免疫吸附试验等技术开展,检出率逐步提高。但采用金标免疫斑点法快速检测RV,国内鲜有报道。今采用本法对156例秋冬季腹泻患儿的粪便标本进行RV检测,总结应用体会及结果如下。

金标免疫渗滤斑点试验在TORCH筛查中的应用

金标免疫渗滤斑点试验(Dot Immunogold Filtration Assay,DIGFA),是将免疫斑点渗滤试验与胶体金免疫标记相结合的方法.20世纪90年代初我国已开展了DIGFA的应用研究,并获得成功.由于其操作简单、快速、不需仪器设备,可单人份使用而被广泛采用 .本院于1999年1月至2001年4月共完成500例血清抗体检测,现报道如下.

全血金标免疫渗滤法快速检测棘球蚴病的现场应用

目的建立一种检测全血标本的棘球蚴病现场快速诊断方法。方法制备检测棘球蚴病抗体的全血金标免疫渗滤法(DIGFA)快速诊断试剂盒,以土豆凝集素与全血混合达到快速凝血的目的,并对1678名流行区健康体检者、38例棘球蚴病患者、52名非流行区健康体检者、40例其他肝肺占位患者做棘球蚴病全血现场诊断试验,评价其作为初筛棘球蚴病普查手段的实际应用价值。结果全血DIGFA对1678份流行区体检者阳性检出率为8.46%,其中肝脏B超及胸部透视阳性检出率为3.04%,对比免疫学检查142例阳性结果和影像学检查51例阳性结果:影像学检查阳性51例中有43例全血DIGFA为阳性,对其余8例影像学检查阳性而全血DIGFA阴性体检者进行16个月随访,经CT检查或病理学检查证实为肝棘球蚴坏死(3例)、肝钙化(2例)、肝囊肿(2例)、肝癌(1例)。而免疫学检查阳性的142例体检者中43例B超为阳性,对其余99例全血DIGFA阳性而影像学检查阴性的体检者进行16个月随访,发现肺部棘球蚴3例(随访仍在继续,数据统计截止到2003年6月)。对临床手术和病理检查确诊的38例棘球蚴病患者的阳性检出率为89.5%,对52份非流行区无狗羊接触史的健康体检者全血血样阳性检出率为0,与40例其他非棘球蚴性肝肺占位疾病(肝囊肿10例、肝血管瘤10例、肝癌10例、肺结核6例、肺癌4例)全血血样无交叉反应。随机抽取各组全血标本190例分别提取全血和血清标本,进行全血DIGFA、血清DIGFA和血清ELISA单盲法检测,三者检测结果差异无显著性(P>0.05)。结论棘球蚴病全血快速诊断试剂盒操作简便和快速,适合普查和流行病学调查。

用金标免疫渗滤法检测血吸虫循环抗原

浙江省医学科学院寄生虫病研究所沈丽英等,用金标免疫渗滤法(DIGFA)对血吸虫循环抗原进行了检测试验,同时与ELISA作了对比试验。1.方法:在已建立的检测血吸虫抗体的DIGFA基础上。

金标法结核抗体快速诊断药盒(TB—DOT)——临床应用简介

90年代初,Chun等提出用胶体金代替酶作为标记物,用于斑点金免疫渗滤试验,成功地应用于临床诊断。由于胶体金本身显红色,可代替显色系统,阳性反应即出现红色斑点,且不需37℃孵育步骤,检测仅2分钟,敏感性接近于Elisa方法,因此被称为“浓缩”的Elisa。 近年来全球结核病呈迅速上升趋势,传统的微生物学方法检测(涂片、培养)耗时长,阳性率低,现代分子生物学技术(PCR、DNA探针)

金标法结核抗体快速诊断药盒(TB—DOT)——临床应用简介

90年代初,Chun等提出用胶体金代替酶作为标记物,用于斑点金免疫渗滤试验,成功地应用于临床诊断。由于胶体金本身显红色,可代替显色系统,阳性反应即出现红色斑点,且不需37℃孵育步骤,检测仅2分钟,敏感性接近于Elisa方法,因此被称为“浓缩”的Elisa。 近年来全球结核病呈迅速上升趋势,传统的微生物学方法检测(涂片、培养)耗时长,阳性率低,现代分子生物学技术(PCR、DNA探针)特异性低,不能保证质量。

二种酶标记免疫技术检测抗精子抗体的比较

目的：用金标免疫斑点试验与酶联免疫吸附试验检测血清、宫颈粘液中抗精子抗体的比较。方法：199例男性不育患者的血清，139例女性不孕患者的宫颈粘液用2种不同检测方法后结果比较。结论：金标免疫斑点试验特异，敏感、简便、快速更具推广价值。

胸腔积液中联检对结核性胸膜炎的诊断价值

目的评价胸腔积液结核抗体(TB-Ab)和TB-DNA联检,对结核性胸膜炎的诊断价值。方法以胸腔积液为标本,用金标免疫斑点渗滤试验检测结核抗体,用荧光探针PCR(Taq Man PCR)技术检测TBDNA,同时对其离心沉淀物进行涂片抗酸染色、酸性罗氏培养。结果 358例结核性胸腔积液TB-Ab阳性率为60.90%、TB-DNA阳性率为63.12%,TB-Ab阳性或TB-DNA阳性共280例,阳性率为78.21%。涂片抗酸染色阳性率为1.12%,罗氏培养阳性率为1.68%。30例非结核性胸腔积液,TB-Ab阳性率为6.67%,TaqMan PCR、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性。结论 TB-Ab和TB-DNA均是诊断结核性胸膜炎的较好指标,两者联合检测可进一步提高检测敏感性。

二种检测肺炎支原体的方法学比较

肺炎支原体为原核微生物,常常引发急性呼吸道感染和不典型性肺炎。通过对肺炎支原体的检测,协助临床早期诊断肺炎支原体感染。检测方法有分离培养、金标免疫斑点法、冷凝集试验(CAT)法,我们用后两种方法检测268例标本,结果显示两者有协同作用。

3种免疫学方法联合检测用于高原山区血吸虫病流行病学调查的研究

目的研究检测抗体的间接血球凝集试验(IHA)、金标免疫渗滤法(DIGFA)、检测循环抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)3种方法联合检测试验应用于云南高原山区血吸虫病流行病学调查的效果比较。方法对血吸虫病未控制、传播控制、传播阻断3类村庄及非流行区人群血清样本分别进行三种方法检测,计算各方法的阳性率及3阳联合检测的阳性率,比较不同人群的检测结果差别,及与粪检结果的符合率。结果 3种方法在不同层次流行村检出阳性率均有差别,疫情未控制村高于其他村。在非血吸虫病疫区,单独用其中1种方法检测结果均有假阳性,但用3种方法联合检测系列判定阳性率均为0。在未控制与传播控制地区,3阳联合判定的阳性率与粪检阳性率无区别,用3阳阳性率推算的感染率与粪检阳性率确定的感染率亦无区别。结论 IHA、DIGFA、ELISA在流行区和非流行区均有不同程度的假阳性,在传播控制地区用3阳联合检测系列判定的阳性率推算的感染率与粪检阳性率相似,似可应用于传播控制标准达标考核及疫情类别调整,以及确定化疗靶人群。

两种常用的检测肺炎支原体方法的应用体会

目的支原体(MP)肺炎由MP感染而发病,本研究对两种常用的检测MP的方法及检测结果进行比较。方法采集我院儿科确诊为MP感染患儿的血液标本51份,用金标免疫斑点法(MP-IgM)与冷凝集试验法(CAT法)同时检测标本。结果 MP-IgM法检出阳性24例,阳性率为47.1%;CAT法检出阳性10例,阳性率为19.6%。MP-IgM法高于CAT法,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MP-IgM法较CAT法检出率高,快捷及时,可作为MP急性期感染诊断的早期检测指标。

两种常用检测肺炎支原体方法的应用体会

目的支原体(MP)肺炎由MP感染而发病,本研究对两种常用的检测MP的方法及检测结果进行比较。方法采集我院儿科确诊为MP感染患儿的血液标本51份,用金标免疫斑点法(MP-IgM)与冷凝集试验法(CAT法)同时检测标本。结果 MP-IgM法检出阳性24例,阳性率为47.1%;CAT法检出阳性10例,阳性率为19.6%。MP-IgM法高于CAT法,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MP-IgM法较CAT法检出率高,快捷及时,可作为MP急性期感染诊断的早期检测指标。