理气舒心片中染色剂金胺O检测方法研究

目的:建立理气舒心片中染色剂金胺O的检测方法。方法:色谱柱为OMNI-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.033 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(30∶70),流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为436 nm。结果:金胺O在0.967~8.703μg·mL^(-1)范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9995),加样回收率为95.01%(RSD=2.3%,n=6),精密度、重复性和溶液稳定性良好,方法检出限为0.092μg·g^(-1)。6家生产企业共38批样品中发现有1家企业的5批样品中检出金胺O,含量在1.06~4.63μg·g^(-1)。结论:该方法操作简便、灵敏度好、准确度高,可用于理气舒心片中金胺O的检测。

黄柏片中金胺O及重金属检查

目的建立黄柏片中金胺O的检查方法,同时考察该制剂中重金属残留水平。方法金胺O采用超高液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)进行分析,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-6 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱离子源为电喷雾离子源(ESI),数据采集模式为多反应离子监测(MRM);重金属以汞、铅、铜、镉、砷、铬6种元素为分析指标,运用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对其含量进行测定。结果所有样品未检出金胺O;铅、汞、镉、砷、铜5种元素的含量低于标准要求,但有1批样品铬含量超过儿童服用拟定限量值。结论所建立的UPLC-MS/MS法可有效甄别黄柏片中是否存在金胺O,对重金属残留量的考察有助于评估其安全性。

EDTA修复后金胺O染色提高石蜡组织切片结核分枝杆菌的检出率

结核病组织切片采用Ziehl-Neelsen抗酸染色,结核分枝杆菌阳性率为31%～50．1%[1-3],金胺 O 荧光染色为40．5%～65．7%[4,5],荧光定量 PCR 检测法为50%～75．8%[6-8]。虽然荧光定量 PCR检测法阳性率较高,但抗酸染色和金胺O染色法更简便易行,结果直观可靠,因此仍常用于日常诊断工作中[9]。有学者指出,10%中性福尔马林固定会降低组织切片中结核分枝杆菌的检出率,可能与福尔马林固定导致组织中蛋白交联有关[10,11]。已知抗原修复法能打开福尔马林固定的组织蛋白交联,显著提高免疫组化染色的阳性率[12]。作者设想,采用抗原修复法也许能提高组织切片中抗酸染色或金胺O染色的结核分枝杆菌检出率。为检验这一设想的可行性,本实验采用EDTA预修复后再行金胺O染色（简称EDTA-金胺O染色）,对福尔马林固定、石蜡包埋的结核病组织切片进行染色,并将其阳性率与传统金胺O染色法和抗酸染色进行对比。

金胺O荧光染色在结核病病理诊断中的应用价值

近年来结核病的发病率呈上升趋势，临床上结核病的诊断主要依靠病理组织学结果及抗酸染色法（Ziehl—Neelsen染色法）加以确诊。抗酸染色法是一种特异性高且长期用于结核病病原学诊断的经典方法，但其镜检时间较长，敏感性低，无法满足目前临床诊断的需求。为了提供结核抗酸杆菌感染的证据，福建医科大学附属漳州市医院病理科采用金胺O荧光染色法应用于病理组织切片，并以抗酸染色以及血清学结核抗体金标法为对照。

金胺O荧光染色检测石蜡切片中偶发分枝杆菌的体会

非结核分枝杆菌（non-tuberculous mycobacteria,NTM）是指结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌,多存在于环境中,为条件致病菌,可引起结核样病变。目前已知100余种致病性非结核分枝杆菌,常见的有20种左右,如胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、戈登分枝杆菌等。

金胺O荧光染色在石蜡组织切片麻风病诊断中的应用

目的为了验证金胺O荧光染色法应用于石蜡组织切片麻风杆菌检测的可行性。方法用金胺O荧光法对6例确诊为麻风病的病理组织切片进行染色,并与抗酸染色结果进行对比。结果荧光染色法6例结果均为阳性,在暗背景下麻风杆菌显示明亮淡绿色荧光;在菌量较少荧光染色片中寻找单根麻风杆菌,较抗酸染色片更为容易。结论金胺O荧光染色法可用于石蜡组织切片麻风病的诊断,麻风杆菌单根散在时比抗酸染色法有一定优势。

LC-MS/PAD法测定非法染色的中药蒲黄和黄芩饮片中金胺O

目的:建立快速、准确、高灵敏度的中药饮片中非法用金胺O染色的专属性检测方法。方法:采用LC-MS/PAD法,离子源为ESI源,正离子检测,通过相对分子质量、二级质谱碎片信息、液相色谱保留时间和PAD图谱4方面信息,对蒲黄、黄芩片中金胺O进行定性检测。结果:10批受试中药饮片中均检测到金胺O。结论:该方法选择性强、灵敏度高,可作为判断中药饮片是否经金胺O进行染色处理的有效检测方法。

黄连上清丸中金胺O的检测方法研究

目的建立定性、定量测定黄连上清丸中可能掺入的化工染料金胺O的高效液相色谱法。方法采用高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)法、高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法,对黄连上清丸样品进行定性、定量分析。结果经检测,9批市售品中有1批检出金胺O,其含量为13μg/g。结论所建立的检测方法,经方法学验证,可满足定性定量检测的要求。

HPLC法筛查骨刺片中的金胺O

目的:筛查骨刺片中金胺O。方法:采用HPLC法筛查骨刺片中金胺O。色谱柱:Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.025 mol·L-1磷酸二氢钾(含0.2%三乙胺,并用磷酸调节p H至3.0)(35∶65);流速:0.8 ml·min-1;检测波长:432 nm;柱温:35℃;进样量:10μl。结果:金胺O的检测限为0.5 ng。经检测的45批市售品,有7批含有金胺O。结论:该方法简便、快速、准确,为保证该制剂的用药安全提供了依据。

PVA/NCC-金胺O/PVA复合荧光膜的制备和表征

以金胺O为荧光染色剂,纳米纤维素(NCC)为增强相,氢键为驱动力,层层自组装PVA/NCC-金胺O/PVA复合荧光膜。NCC的性能表征结果为NCC为纤维素Ⅰ型,结晶度为65.55%,平均尺寸为477.2nm,呈棒状。PVA/NCC-金胺O/PVA复合荧光膜的性能表征结果为PVA/NCC-金胺O/PVA复合荧光膜具有优良的拉伸强度,其拉伸强度较纯PVA膜相比,横向拉伸增加了66.8%,纵向拉伸增加了230.9%。PVA/NCC-金胺O/PVA复合荧光膜具有良好的荧光效应,且PVA/NCC-金胺O/PVA复合荧光膜的荧光发射波长为520nm。

金胺O荧光染色法在病理特殊染色中的应用

目的探讨金胺O荧光染色法应用在病理特殊染色上的可行性。方法采用金胺O配制成的荧光染色液，用于考虑为结核的病理活检组织中，并以经典的抗酸染色法为对照。结果在荧光镜下，金胺O荧光染色法将结核杆菌染成金黄色。结论金胺O荧光染色法在病理特殊染色工作中有一定价值。

金胺O荧光染色与抗酸染色用于石蜡包埋组织结核杆菌检测的对比分析

目的比较金胺O荧光染色法与抗酸染色法在石蜡包埋组织中结核杆菌检测的差异。方法收集病理诊断为结核病或符合结核的石蜡包埋组织121例,每1例样本连续切片,同时采用金胺O荧光染色法和抗酸染色法进行检测。结果荧光染色组83例阳性,阳性率为68.60%,抗酸染色组45例阳性,阳性率为37.19%,对每1例标本两种染色的结果进行配对t检验,结果有非常显著性差异(P<0.01)。结论金胺O荧光染色法阳性检出率高于抗酸染色,尤其是在那些含菌量少的标本。

吖啶橙一金胺O染色法临床应用研究

对结核杆菌采用吖啶橙——金胺O染色法．可把活菌染成绿色，死菌染成红色。对50例痰阳肺结核病入抗痨治疗对应用吖啶橙——金胺O染色观察痰菌的染色情况，并与常规痰培养、病人症状悻征改变、X线影像学变化同步观察对比，结果显示痰涂片结核菌染色与临床疗效基本一致。表明该染色法对于快速判断肺结核病的临床治疗效果具有较高应用价值。

千金止带丸中染色剂金胺O的检测方法研究

目的:建立千金止带丸中染色剂金胺O的检测方法。方法:采用HPLC-PDA法对千金止带丸中金胺O进行筛查,并采用HPLC-Q-TOF/MS对阳性样品进行确证。结果:对来自7家企业的71批次样品进行筛查和确认发现:有2家企业的11批次样品中检出金胺O;金胺O进样在0.082~82.08μg﹒m L^(-1)范围内有良好的线性关系。结论:本方法准确可靠,可作为千金止带丸中金胺O的检测方法。

石斛中染色剂金胺O的液相色谱检测方法研究

目的：建立石斛饮片中金胺0的液相色谱检测方法。方法：采用C18柱，以0．025mol／L磷酸二氢钾溶液（含0．2％三乙胺，用磷酸调节pH值至3．0）-乙腈（63：37）为流动相进行分离，检测波长为432nm，以保留时间和DAD紫外光谱定性。结果：金胺0线性范围为5~200μg／mL，相关系数为O．9999，平均回收率为98．680／0，RSD％为1．3％。结论：HPLC法用于石斛中使用金胺O染色掺假的鉴定。方法简便、快速、准确。

液相色谱-串联质谱法测定红花中非法染色物新品红、金胺O和苏丹红Ⅳ含量的研究

目的建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定红花中非法染色物新品红、金胺O和苏丹红Ⅳ的含量。方法采用安捷伦EC-C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为20 mmol/L甲酸铵+0.1%甲酸(A)和乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.2 ml/min,柱温为40℃,离子化方式为ESI,检测模式为MRM,选择离子对:(1)新品红m/z 330.3→223.2,m/z330.3→300.2;(2)金胺O m/z 268.2→147.2,m/z 268.2→252.2;(3)苏丹红Ⅳm/z 381.2→224.1,m/z 381.2→91.1。结果该方法新品红、金胺O和苏丹红Ⅳ的线性范围分别为0.1086~271.50 ng/ml、0.1392~348.00 ng/ml和0.1352~338.00 ng/ml,回收率(n=6)分别为97.45%、96.44%和97.58%,RSD分别为0.70%、1.12%和0.89%,精密度、稳定性和重复性的RSD均小于3%。结论该方法提取简单,测定方法定量准确,灵敏度高,适用于红花中非法染色物新品红、金胺O和苏丹红Ⅳ的含量测定。

DART-Q-Orbitrap MS法快速检测豆制品中碱性橙Ⅱ和金胺O

采用实时直接分析(direct analysis in real time,DART)离子化技术与四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术(Q-Orbitrap MS),建立了快速定性和定量分析方法,检测豆制品中非法添加的碱性橙Ⅱ和金胺O。在正离子模式下,采用Full MS/targetrd-MS2扫描方式,可直接将豆制品置于离子化区域内对两种染料进行快速定性分析。在定量分析中,采用80%乙腈水溶液提取样品,应用Dip-it载样方式,对实验参数进行系统性优化。采用空白基质溶液进行梯度稀释,测得碱性橙Ⅱ和金胺O在基质中的检出限均为0.2mg/L;采用内标法定量,在1～20mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.997 2和0.999 4。该方法快速准确,可为食品中非法添加染料的定性和定量检测提供参考依据。

几种染色药材中化工染料金胺O的定性鉴别

目的对市售染色延胡索、蒲黄、石斛等药材样品中化工染料金胺O进行定性鉴别。方法采用HPLC法,紫外检测器、二极管阵列检测器对市售染色药材样品中的所含化工染料金胺O进行定性鉴别。结果采用高效液相色谱法,二极管阵列检测器检查所得光谱具有唯一性。结论本文采用高效液相色谱法,方法简单易行,可用于染色药材中化工染料金胺O的定性鉴别。

蒲黄中金胺O的HPLC测定

目的:建立 HPLC 法测定掺假蒲黄中化工染料金胺 O 的含量。方法:采用 LUNA C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.025 mol·L^(-1)磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾3.402 g,加水至1000 mL,内加0.2%三乙胺,并用磷酸调 pH=3.0)(35:65),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长为432 nm。结果:本法在5～300μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,r=0.9999(n=10),平均回收率为99.0%(RSD=0.88%,n=6)。结论:该法简便、快速、准确。