“金花菌”(Aspergillus chevalieri)发酵牡丹花瓣过程中挥发性物质及酚酸类物质变化

探究“金花菌”发酵牡丹花瓣过程中挥发性物质和酚酸化合物的成分及含量。采用GC-IMS技术和HPLC-MS技术研究“金花菌”发酵过程中挥发物质和酚酸类物质,通过主成分分析和聚类分析阐明发酵过程中挥发性物质和酚酸类物质变化。GC-IMS共检测出51种挥发性物质,定性出33种,并能表明发酵前后及发酵过程中挥发性物质的变化,将牡丹花瓣分为3类,即未发酵,发酵3 d和发酵5~11 d;HPLC-MS技术共检出并定量21种酚酸类物质,在发酵5 d时牡丹花瓣中多酚达到最大值为4.31%,通过聚类分析和主成分分析能将牡丹花瓣分为3类:即未发酵,发酵3、5、7 d和发酵9、11 d。研究结果为牡丹花瓣发酵过程中挥发性物质和多酚类物质的变化和品质控制提供理论依据,同时为牡丹花瓣的加工与利用提供新思路。

湖南地区茯砖茶中金花菌的分离鉴定

对湖南地区茯砖茶上"金花菌"的菌落特征、形态特征进行了研究,并运用扫描电镜观察了其子囊孢子和分生孢子的发育过程,鉴定其为冠突散囊菌(Eurotium cristatum)。

青刺尖“金花菌”发酵茶的降血脂效果

研究青刺尖茶经"金花菌"发酵后,其降血脂效果的变化。以普通饲料饲养小鼠作空白对照,饲喂高脂饲料建立高血脂症模型小鼠,再随机分成模型组、青刺尖"金花菌"发酵茶三个剂量处理组(2、6、9 g/kg)、青刺尖干茶组和血脂康组(3 g/kg)。各组分别连续灌胃处理28 d,心脏取血分离血清,检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白AI(Apo-AI)、载脂蛋白B(Apo-B)和脂蛋白a(LP-a);计算肝脏指数,并制作肝脏病理切片。与模型组比较,发酵茶三个剂量处理组的TC、TG、LDL-C及中剂量组的Apo-B/Apo-AI比值,均显著降低(p<0.05);发酵茶三个剂量组的HDL-C和肝脏指数,高剂量组的TC、中高剂量组的TG和LDL-C,差异均达到极显著(p<0.01),同时抑制了各处理组HDL-C的过度增加。与未发酵的青刺尖茶组比较,中、低剂量组小鼠的体重增长量较小,而低剂量组降低显著(p<0.05)。青刺尖茶经"金花菌"发酵后,能有效控制高血脂症小鼠体重的增加,更显著地降低或抑制高血脂症小鼠的各项生化指标,显现更优的降脂功效。

金花菌发酵对茶叶主要化学成分的影响

为探明金花菌发酵对铁观音茶叶主要化学成分的影响,从湖南茯砖茶、广西六堡茶和云南普洱茶等茶叶样品中分离到10株不同形态的金花菌株,接种到铁观音茶汤中发酵培养,对发酵液中茶多酚、氨基酸的变化进行检测。在此基础上,将菌株接种到铁观音茶叶中进行固体发酵,通过UPLC检测分析茶水浸出物和发酵前后茶叶干重。结果表明,10个金花菌株发酵铁观音茶汤后,发酵液中茶多酚的含量均变化显著,氨基酸含量变化不显著,但是氨基酸的种类较为丰富,其中含有7种人体必须氨基酸;10个菌株在铁观音茶叶中发酵35 d后,茶叶干物质含量均下降,减少0.6~0.9 g,茶叶中主要成分茶多酚物质含量也均减少,UPLC分析表明菌株发酵茶中增加了多种新成分;10个金花菌菌株在铁观音茶叶和茶汤中均生长良好,说明金花菌并非黑茶的特有菌株。金花菌对茶多酚的转化利用能力高,菌株发酵茶叶后,茶叶中增加了多种新成分。

金花菌不同接种量固态发酵对绿毛茶品质的影响

为缩短发花周期,采用金花菌孢子悬液浓度为1.0×107个/mL,研究不同接种量(0 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL和1.2 mL)固态发酵对绿毛茶品质的影响。结果表明,随着接种量的增加,金花菌的发花量增多,感官品质有不同程度的改善,主要的品质成分含量均发生明显变化,其中,接种量为1.0 mL的感官结果最优,其发花茂盛普遍,色泽金黄,汤色橙红明亮,陈香浓,滋味醇和回甘,其水浸出物、茶多酚、氨基酸、咖啡碱、总糖、茶黄素、茶红素和茶褐素分别为49.60%、24.42%、2.62%、1.79%、2.10%、0.23%、4.40%和7.85%。

高效液相色谱法检测金花菌固态发酵中他汀类物质

以金花菌固态培养物为研究对象,选择降脂类物质洛伐他汀标品为对照,采用高效液相色谱法,选用色谱柱C18柱,以甲醇∶水(80∶20)为流动相,流速为1.0mL/min,在波长238nm处检测金花菌固态发酵中的他汀类物质.结果显示:此方法具有良好的分离度和线性关系,精密度、重现性、准确度良好,平均回收率为99%,RSD为1.39%,最低检测限为2.0μg/mL.外标法得出金花菌乙酸乙酯提取液中洛伐他汀含量为0.049mg/kg.

茯砖茶中降解3-苯氧基苯甲酸的“金花菌”筛选及其降解特性

以茯砖茶为菌源，分离筛选出20株具有3-苯氧基苯甲酸（3-PBA）降解能力的“金花菌”，其中分离的菌株ET1可在7d内完全降解PD培养基中100mg／L的3-PBA，根据其形态特征和ITS序列分析（Gen Bank Accession No．KF317836），将其鉴定为冠突散囊菌（Eurotiumcristatum）。动力学研究表明，菌株ET1降解3-PBA的过程符合一级动力学方程，在测试的3-PBA质量浓度、温度、pH值范围内，3-PBA半衰期为1．7～3．2d，远远低于其自然降解半衰期（180d），且该反应的速率受pH值影响较大，受3-PBA质量浓度和温度的影响相对较小。

不同原料对金花菌茶品质的影响

为促进金花菌茶产品的开发,通过人工接种金花菌发酵,分析比较不同茶类、不同绿茶原料对金花菌茶品质的影响。结果表明,不同茶类原料中以红茶发酵的金花菌茶感官品质最佳,菌香浓郁,绵滑感强,但内含物质含量以晒青发酵的最高;不同绿茶原料中以杀青揉捻叶发酵的金花菌茶品质最佳,汤色橙黄尚明,滋味浓醇绵滑,内含成分丰富。这说明在不同茶类中以红茶为原料更有利于金花菌茶感官品质的形成,晒青原料更有利于金花菌茶理化品质的形成,而以杀青揉捻叶为原料发酵金花菌茶更有利于降低生产成本。

六堡茶中金花菌的分离与鉴定

【目的】研究鉴定六堡茶中的金花菌,为推动六堡茶产业发展提供一定的理论基础。【方法】采用平板涂布法及三点接种法从梧州中茶茶厂2015年11月生产的六堡茶中分离纯化金花菌,以传统的形态学观察法观察菌落特征,利用光学显微镜观察菌丝、分生孢子等结构特征,再结合分子生物学方法对分离获得的菌株进行DNA序列分析,并通过ITS序列进行同源性搜索比对和系统发育进化树分析。【结果】分离获得一株金花菌,命名为LB-1。LB-1菌株的形态特征与散囊菌属很相似,主要表现为:菌落呈金黄色、有同心环、有放射性脊等,其ITS序列与阿姆斯特丹散囊菌(Eurotium amstelodami)的同源性达99%,进一步确定LB-1菌株为阿姆斯特丹散囊菌。【结论】从六堡茶中分离获得的金花菌LB-1为散囊菌属中的阿姆斯特丹散囊菌。在六堡茶加工中,可为LB-1菌提供适宜的环境,促进其大量繁殖,以增强六堡茶的保健功效。

“金花散茶”及“金花菌粉”对被动吸烟小鼠肺组织JAK2/STAT3炎性及磷酸化蛋白表达的影响

为探究"金花散茶"及其"金花菌粉"对被动吸烟(Cigarette smoking environment,CSE)小鼠肺组织受损的预防及修复机制,建立C57BL/6小鼠CSE模型,以600 mg·kg-1剂量的金花散茶茶汤(Eurotium cristatum tea extract,ECTE)及金花菌粉浸提液(Eurotium cristatum powder extract,ECPE)进行灌喂处理。与CSE模型组相比,小鼠灌喂ECPE和ECTE后,肺组织病理学切片显示其可保护小鼠肺组织形态结构完整;酶联免疫分析显示,灌喂ECPE和ECTE可显著抑制小鼠血清IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α表达量上调;Western blot结果表明,灌喂ECPE和ECTE对小鼠肺组织p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3高表达起到抑制作用。以上研究结果表明,灌喂ECPE、ECTE对CSE肺受损小鼠具有明显保护作用,总体趋势为ECPE组优于ECTE组、预防组优于治疗组。

金花菌发酵甜茶生化品质及抗氧化活性分析

为探究金花菌发酵对甜茶生化品质及抗氧化活性的影响,分别测定比较了未发酵甜茶和金花菌发酵甜茶的生化成分含量、总氧化活性、清除羟自由基活性和DPPH自由基清除活性。结果表明:与未发酵甜茶相比,金花菌发酵甜茶中游离氨基酸和可溶性糖的含量显著下降(p<0.05),茶多酚和黄酮的含量显著升高(p<0.05),而水浸出物含量没有显著变化(p>0.05);金花菌发酵甜茶的总抗氧化活性显著性提升(p<0.05),但清除羟自由基活性与DPPH自由基清除活性均显著下降(p<0.05)。

茯砖茶中氯氰菊酯降解“金花菌”的降解特性及途径

以1株'金花菌'——冠突散囊菌(Eurotium cristatum)ET1为材料,研究了其降解氯氰菊酯(cypermethrin,CY)的特性及途径。冠突散囊菌ET1对CY降解的与其生长趋势是同步的,在PD培养基中8 d内对50mg/L CY降解率为57.93%。动力学研究表明,该菌株降解CY的过程符合一级动力学方程。在测试条件下菌株ET1可有效降解20~100 mg/L质量浓度范围内的CY,在测试的底物浓度、温度、p H范围内,CY半衰期(t1/2/d)为3.382~11.517 d;25°C、初始p H 6.0的条件下,菌株ET1降解50 mg/L CY的t1/2/d最短(6.104 d)。通过GC-MS结合菌株ET1对模式底物的利用情况研究了其降解CY的中间产物,并推导出菌株ET1降解CY途径为:首先分解CY为二氯菊酸(dichloro chrysanthemum acid,DCVA)和α-氰基-3-苯氧基苄醇,α-氰基-3-苯氧基苄醇自发转化为3-苯氧基苯甲醛,3-苯氧基苯甲醛在脱氢酶的作用下转化为3-苯氧基苯甲酸(3-PBA),其次,3-PBA的醚键断裂得到苯酚。

茯砖茶中金花菌群的研究进展

茯砖茶由多种微生物发酵而成,属于我国特有的黑茶,其风味独特,长期饮用有益于人体健康。我国茯砖茶的主要产区有陕西、湖南、浙江、贵州等,不同产区茯砖茶中均有大量金花菌群的存在,但地域环境可影响茯砖茶金花菌群的组成,而金花菌群及其组成又与茯砖茶品质风味和功能活性息息相关,金花菌的数量也是茯砖茶品质检测的一项重要指标。目前对于金花菌群的分类鉴定大多是通过形态学或转录间隔区序列或18S rDNA等单一的方法,但每种方法都有不同的种属鉴定结果,存在较大差异,且只通过某一种鉴定方法可能会出现偏差。因此,茯砖茶中金花菌群的鉴定目前还存在较大争议,从而影响茯砖茶地标性产品的评判。本文对茯砖茶中优势菌群的研究现状、金花菌的分类鉴定现状进行综述,为茯砖茶中金花菌的鉴定、金花菌资源的开发和利用以及茯砖茶的标准化生产方面提供依据。

基于图像处理技术快速检测茯砖茶中“金花菌”数量

"金花菌"的数量是评价茯砖茶品质的重要依据之一,为了快速准确的检测茯砖茶中"金花菌"的数量,本研究利用茯砖茶中的"金花菌"颗粒较大,颜色为金黄色,清晰可辨,与其它杂菌和茶基质差异较大的特性,设计出了一种自动、快速检测茯砖茶中"金花菌"数量的方法,首先对茯砖茶进行任意面切割,并利用高分辨率拍照设备获取茶切割面图像,然后利用Image Pro Plus软件中的图像处理系统对茶切割面图像进行处理,之后采用自动计数系统对茯砖茶中"金花菌"的数量进行统计,并以人工直接计数结果为参考,结果表明:本研究方法与人工直接计数法无显著差异,检测结果可靠。因此,该方法可以有效快速准确的检测出茯砖茶中的"金花菌"数量,从而达到在线快速准确地评价茯砖茶质量的目的。

陕西茯茶中“金花菌”的ITS序列特性分析

从陕西茯茶中分离纯化得到6株"金花菌",以冠突散囊菌标准菌株为对比,提取7株菌的DNA,以真菌通用引物ITS1及ITS4扩增提取得到的基因,PCR产物经凝胶电泳纯化后进行基因测序,并对测定的ITS基因序列进行同源性分析及聚类分析.结果表明:分离纯化的6株菌与标准菌株ITS区域具有高度的同源性,根据ITS序列,分离纯化的6株菌可能为针刺曲霉(Aspergillus spiculosus)、阿姆斯特丹曲霉(Aspergillus amstelodami)、谢瓦曲霉(Aspergillus chevalieri).

茯砖茶中金花菌菌落计数方法的优化

金花菌数量是审评茯砖茶产品质量好坏的关键指标。以国标为依据,采用单因素试验和响应面分析法优化茯砖茶中金花菌菌落总数计数方法。结果表明,样品前处理的最佳条件为:筛子目数80目,无菌稀释液为0.85%NaCl溶液,振摇时间50 min。该条件下,金花菌菌落总数为(50.75±1.1)×10~5CFU/g。优化方法得到的金花菌菌落总数是国标方法的5倍左右。

模拟高渗条件对茯茶中“金花菌”生长特性的影响

茯砖茶发源于泾阳,古法制作具有“非泾阳之水而不能制”之说.泾阳地下水中Na+、Ca 2+、Mg 2+浓度高于其他内陆河流域.为探究“金花菌”对水中较高离子浓度的适应,及其在茯砖茶生产中稳定生长的机制.从泾阳茯砖茶中分离出若干“金花菌”,并选取其中2株代表性菌株进行鉴定;进而探讨不同浓度阳离子和高糖模拟高渗环境对“金花菌”生长特性的影响.结果表明:茯砖茶中分离出两株“金花菌”F-2和J-2分别与Aspergillus intermedius和肋状散囊菌(Aspergillus costiforme)具有高度相似性.2株“金花菌”能够在22.5%的NaCl和10.5%的CaCl 2和MgCl 2培养基上生长,且MgCl 2的添加对“金花菌”的生长具有明显促进作用.“金花菌”能够耐受70%蔗糖浓度,在高糖、高盐模拟的高渗条件下,“金花菌”气生菌丝生长旺盛,产生灰绿色分生孢子头,进行无性生殖.“金花菌”极可能通过选择生殖方式对抗高渗胁迫,其有性生殖产生的子囊果结构更能抵抗不利环境.对于揭示茯砖茶中“金花菌”生长机理具有重要作用,为进一步促进“发花”效果及提高茯砖茶品质奠定了坚实基础.

福鼎白茶中“金花菌”的分离培养与鉴定

对茶叶中金花菌(冠突散囊菌)的研究报道几乎都围绕于茯砖茶,尚未见福鼎白茶中有关金花菌的研究报道,因为近来福鼎紧压白茶中出现了带"金花菌"的产品,所以我们进行了相关研究。从市售"金花"福鼎紧压白茶中分离得到"金花"典型菌株,通过形态学和ITS r DNA序列进行分析,研究结果表明,分离得到的菌株为冠突散囊菌(Eurotium cristatum),与茯砖茶中的冠突散囊菌一样,说明冠突散囊菌广泛分布于自然界中,只要在条件允许的情况下,均可在不同茶类中发花,对茶叶品种开发、工艺创新、品质提升具有重要的借鉴意义。

金花菌发酵对兰花香型漳平水仙茶的生化成分及抗氧化性的影响

为丰富漳平水仙茶的种类,以金花菌发酵兰花香型漳平水仙茶,分析了金花菌发酵对兰花香型漳平水仙茶生化成分及抗氧化活性的影响。结果表明兰花香型漳平水仙茶经金花菌发酵后,其水浸出物、没食子酸和4种简单儿茶素(GC、EGC、C和EC)等含量极显著性增加(p<0.01),可溶性糖含量无明显变化,茶多酚、游离氨基酸、4种酯型儿茶素(EGCG、GCG、ECG、CG)和茶黄素含量极显著性降低(p<0.01),咖啡碱和茶红素含量无显著性变化(p>0.05),茶褐素含量有所增加。兰花香型漳平水仙茶在金花菌发酵后总抗氧化活性均极显著地增高(p<0.01),并与EC、GA、EGC和GC呈极显著正相关(p<0.01);清除羟自由基能力增加,但DPPH自由基清除活性极显著性降低(p<0.01)。这为开发金花菌漳平水仙茶提供了依据。

白茶中金花菌的分离与鉴定

金花白茶是白茶中的一种新兴产品。研究金花白茶中金花菌的类型有利于为白茶产业的创新发展提供一定的参考依据。本研究以产自2018年的湖南湘丰牌桑植白茶作为材料,通过平板涂布法及三点接种法分离纯化金花菌,采用形态学观察并联合分子生物学手段对所获得的分离株进行鉴定。分离获得一株金花菌BC-1,经菌落特征、显微形态观察、ITS测序及系统进化树构建,将该菌鉴定为冠突曲霉(Aspergillus cristatum)。从白茶中分离获得的金花菌BC-1为冠突曲霉(A.cristatum),丰富了白茶中金花菌的分类鉴定研究,对金花白茶的开发利用提供一定的参考。