基于线粒体COI和Cytb基因序列的6种锦鲤(Cyprinus carpio Koi)遗传多样性分析

实验利用线粒体COI基因和Cytb基因的片段序列分析比较了黑锦鲤(Cyprinus carpio Karasugoi Koi)、三色锦鲤(C.carpio Taisho Sanshoku Koi)、红白锦鲤(C.carpio Kohaku Koi)、黄金锦鲤(C.carpio Kigoi Koi)、全白锦鲤(C.carpio Platinum Ogon Koi)和全红锦鲤(C.carpio Higoi Koi)6个锦鲤(Cyprinus carpio Koi)养殖品系的遗传多样性和系统进化关系。结果显示:基因序列分析得到的单倍型数分别为7、6。6个品系均具有较高的单倍型多样性指数和较低的核苷酸多样性指数。群体间遗传分化系数Fst、遗传距离和AMOVA等结果显示品种间变异高于品种内变异,黑锦鲤和黄金锦鲤间、红白锦鲤和三色锦鲤间不存在显著遗传差异,其余品系间差异显著。根据COI和Cytb基因单倍型构建的品系间NJ系统进化树得到相同结果,黑锦鲤和全红锦鲤遗传关系较近,聚为一支。三色锦鲤、红白锦鲤和黄金锦鲤遗传关系较近,聚为一支。全白锦鲤与其他品系的亲缘关系均较远,单独形成一个分支。

金边鲤群体的遗传结构及个体间遗传差异的QTL标记分析

为了评估金边鲤(Cyprinus carpio var.Jinbian)群体的遗传组成,制定合理的繁殖配组策略,本研究用24个QTL标记分析了金边鲤亲本群体的遗传结构及雌、雄个体间遗传距离。结果显示:在192尾样本中共检测到184个等位基因,群体平均等位基因数(N_(o))、有效等位基因数(N_(e))、观测杂合度(H_(o))、期望杂合度(H_(e))和多态信息含量(PIC)分别为7.667、3.941、0.590、0.707和0.670,表明群体处于高度多态水平(PIC≥0.5),具备进一步选育优良品种的遗传潜力。经Bonferroni校正的Hardy-Weinberg平衡检验显示,金边鲤群体有10个位点显著或极显著偏离平衡,多数位点表现为杂合子缺失。在此基础上统计了金边鲤雌、雄个体间的遗传距离在0.1231~1.8563之间,遗传距离呈正态分布,且中间值位于0.7~0.9,占38.36%,结合聚类图将192个个体划分为3个繁殖组,组间呈现出显著的遗传分化,交叉配组能够有效避免近亲繁殖。研究结果为金边鲤选育、繁殖配组及持续利用提供参考。

Effect of Metal Ions on Protease Activities in the Intestines and Hepatopancreas of Red-white Ornamental Carp (Cyprinus carpio L)

[Objective] The aim of this study was to study effects of metal ions on the protease activities in digestive tissues and gland of red-white ornamental carp（Cyprinus carpio L）.[Method] Effects of four kinds of metal ions （K＋,Na＋,Mg2＋ and Ca2＋） on protease activities in hepatopancreas,foregut,midgut,hindgut of red-white ornamental carp were studied by enzyme analysis method.[Result] Effects of four kinds of metal ions on protease activities of red-white ornamental carp were different in the range of experimental concentration from 25 mmol/L to 150 mmol/L.K＋ could promote protease activities in hepatopancreas and hindgut at different levels.Especially,K＋ had the promoting effect at low-concentration level,but the inhibitory effect at high-concentration level in midgut and the inhibitory effect in foregut.Na＋ had the promoting effect on protease activities in hepatopancreas,foregut and hindgut at different levels,but the inhibitory effect in midgut.Mg2＋ and Ca2＋ had the inhibitory effect on protease activities in intestinal and hepatopancreas at different levels.[Conclusion] This study provides basic data and theoretical foundation for researches on the digestive physiology of red-white ornamental carp or the development and optimization of compound feed.

不同蛋白水平对金边鲤生长、血清生化、消化酶及抗氧化能力的影响

为了探讨不同蛋白水平对金边鲤(暂定名)生长、血清生化、消化酶及抗氧化能力的影响,以进口鱼粉和大豆粕为蛋白源制备了蛋白水平分别为30%、32%、34%、36%和38%的饲料,投喂金边鲤[初始体重(18.16±0.57)g]56 d。结果表明:①蛋白水平对金边鲤的增重率和特定生长率有显著影响(P<0.05),蛋白水平为34%的试验组增重率和特定生长率显著高于30%试验组(P<0.05)。根据各生长指标,采用折线和二次曲线模型分析,金边鲤适宜蛋白水平为34.05%~35.12%。②蛋白水平对金边鲤血清中的甘油三酯和白蛋白含量影响显著(P<0.05),蛋白水平为32%和36%试验组的甘油三酯含量显著高于30%试验组(P<0.05),蛋白水平为30%的试验组血清白蛋白含量显著低于34%、36%和38%试验组(P<0.05)。③蛋白水平对金边鲤肠道消化酶没有显著影响(P>0.05),肠蛋白酶含量在32%组达到最大值,肠脂肪酶的含量在36%组达到最大值。④蛋白水平对金边鲤肝脏中的丙二醛、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶均无显著影响(P>0.05),超氧化歧化酶和过氧化氢酶呈现先上升后下降的趋势,在34%取得最大值。综合生长性能、血清生化、消化酶及抗氧化能力等指标,在本试验条件下,适宜金边鲤生长的饲料蛋白水平为34.05%~35.12%。

金边鲤养殖资源、现状、前景展望和发展措施

近年来,随着稻渔综合种养的快速发展,金边鲤以其独有的人文历史渊源、典型的外观特征、较高的营养价值及明显的脱贫致富作用,值得科学合理地养殖开发与利用。本文详细介绍了金边鲤的养殖资源、养殖现状、养殖前景;提出了金边鲤的发展措施:做好产业发展规划,加大财政投入,加强科技研发和苗种规模化繁育,拓展延伸产品综合效益,加大金边鲤稻田养殖推广力度。

稻田和池塘两种模式下金边鲤与建鲤肠道菌群差异分析

利用MiSeq高通量测序技术测定16S rRNA基因序列,分析比较池塘金边鲤、稻田金边鲤、池塘建鲤和稻田建鲤4组鲤鱼肠道菌群的结构组成和丰度差异。试验结果显示,池塘金边鲤组、稻田金边鲤组、池塘建鲤组和稻田建鲤组分别获得了377、250、367和455个运算分类单元,其中运算分类单元聚类分析发现,稻田建鲤组与另外3组差异最大;菌群多样性分析发现,池塘金边鲤组的辛普森指数显著高于其他3组(P<0.05),而稻田建鲤组及稻田金边鲤组的香农指数分别为1.56±0.22和2.53±0.82,均高于对应的池塘组,但差异不显著(P>0.05);此外,池塘金边鲤组中变形菌门(89.56%)和气单胞菌属(82.68%)在其肠道菌群组成中占有绝对优势(P<0.05),而另外3组在门分类水平和属分类水平的菌群结构和相对丰度较为相似,优势菌门均为变形菌门、梭杆菌门和厚壁菌门,主要优势菌属为鲸杆菌属、气单胞菌属和乳球菌属;京都基因和基因组百科全书(KEGG)功能预测比较分析发现,各组样品的肠道微生物富集到了多个相同的代谢途径以及部分信号传导、调节和修复机制相关信号通路。本研究结果发现,在稻田和池塘养殖模式下,金边鲤的肠道优势菌群种类、相对丰度以及参与的信号通路与建鲤无显著差异,提示金边鲤与其他鲤鱼一样可适应这两种养殖模式。

不同蛋白水平对金边鲤肌肉品质的影响

试验旨在研究饲料不同蛋白水平对金边鲤的肌肉营养成分、质构及肌肉品质的影响。选取750尾初始体质量为(18.16±0.57)g的金边鲤,随机分为5组,每组3个重复,每个重复50尾,投喂蛋白水平分别为30%、32%、34%、36%和38%的饲料,试验期8周。结果表明:饲料蛋白水平为38%时,金边鲤肌肉中水分、粗脂肪的含量显著低于30%、32%、34%的试验组(P<0.05);粗蛋白、粗灰分的含量显著高于30%、32%、34%的试验组(P<0.05);肌肉的硬度、回复性显著高于其他试验组(P<0.05)。饲料蛋白水平为34%时,金边鲤肌肉系水力显著高于30%的试验组(P<0.05)。金边鲤肌肉中必需氨基酸含量在饲料蛋白水平为34%时达到最高,且鲜味氨基酸含量在饲料蛋白水平为34%、38%时较高;饲料蛋白水平为32%、34%、38%试验组的EAA/TAA最接近FAO/WHO的蛋白质组成理想模式;饲料蛋白水平为34%、36%试验组的AAS评分、CS评分和EAAI均高于其他试验组。饲料蛋白水平为34%时,金边鲤肌肉中不饱和脂肪酸和高度不饱和脂肪酸的含量最高,且∑n-3/∑n-6PUFA比例也最高。研究表明,用蛋白水平为34%饲料投喂的金边鲤,其肌肉口感最佳,且更具营养价值。

金边鲤皮肤黑色素合成及转运相关基因表达分析

【目的】研究影响金边鲤皮肤色素沉着的关键基因及信号通路,揭示其皮肤颜色差异形成的原因,为金边鲤良种培育提供候选基因信息。【方法】基于突变型金边鲤黄色皮肤(Y组)和黑色皮肤(B组)及野生型金边鲤黑色皮肤(W组)的转录组测序数据,筛选分析获得部分共有差异表达基因,利用实时荧光定量PCR检测差异表达基因和黑色素合成相关基因的表达情况,并分析各基因间的相关性。【结果】依据转录组数据筛选获得ACT3、MYH2、TPM1、TPM2和TPM3共5个来源于心肌肾上腺素信号通路及与细胞动力相关的基因;除ACT3基因外,其余4个基因(MYH2、TPM1、TPM2和TPM3)在Y组皮肤中的相对表达量均显著低于B组和W组(P<0.05,下同),与转录组分析的差异基因表达趋势一致。MC-1R、TYR、TYRP1和TYRP2等4个黑色素合成相关基因在金边鲤皮肤中的表达情况为:B组皮肤中MC-1R基因的相对表达量显著高于Y组和W组;TYR、TYRP1和TYRP2基因在3组皮肤中的相对表达量排序均为W组>B组>Y组,其中W组的相对表达量显著高于B组和Y组。相关性分析结果显示,MC-1R和TYR基因与ACT3、MYH2、TPM1、TPM2和TPM3基因呈显著或极显著(P<0.01)正相关,而TYRP1和TYRP2基因与这5个差异表达基因均无显著相关性(P>0.05)。【结论】ACT3、MYH2、TPM1、TPM2和TPM3基因及其所在的心肌肾上腺素信号通路可能影响黑色素合成与运动,且与黑色素合成相关基因存在相关性,可作为金边鲤体色变异研究中的标记基因。

3种水产渔药对金边鲤的急性毒性试验

在水温23℃±0.5℃、pH7.48±0.27、溶解氧>5 mg/L的条件下,采用静态水生生物急性毒性试验方法开展了敌百虫、硫酸铜硫酸亚铁合剂(5∶2)、灭孢灵3种水产渔药对金边鲤幼鱼的急性毒性研究。结果表明,敌百虫、硫酸铜硫酸亚铁合剂(5∶2)、灭孢灵对金边鲤幼鱼的96 h半致死质量浓度(LC_(50))分别为527.85 mg/L、41.17 mg/L和206.54 mg/L;安全质量浓度(SC)分别为52.79 mg/L、4.12 mg/L和20.65 mg/L。3种渔药对金边鲤幼鱼的毒性大小为硫酸铜硫酸亚铁合剂(5∶2)>灭孢灵>敌百虫。根据有毒物质对鱼类毒性的评价标准,敌百虫、硫酸铜硫酸亚铁合剂(5∶2)和灭孢灵均属于低毒药物。

元江鲤3个连续选育世代的遗传多样性与遗传结构变化

为了掌握元江鲤(Cyprinus carpio yuankian g)3个连续选育世代群体遗传结构变化情况,采用微卫星分子标记分析了群体遗传多样性水平和遗传结构。结果显示:15个微卫星位点在3个群体中共获得116个等位基因,平均7.73个/位点,每世代平均等位基因数从7.2667减少至5.0667,观测杂合度从0.7680降低至0.7585,多态信息含量从0.7634降低至0.7451,遗传多样性水平降低。相邻世代间的遗传距离从0.0806减小至0.0449,遗传相似性从0.8464增加至0.8747,遗传相似性逐步提高。相邻世代间的遗传分化系数(F_(st))从0.0681降低至0.0230,世代间的遗传分化已处于低分化水平,人工选育已对元江鲤育种群体的遗传结构产生了显著影响。

金边鲤、建鲤和福瑞鲤肌肉品质比较

将规格相近的金边鲤、建鲤和福瑞鲤PIT标记并同塘养殖3个月,分别随机选取15尾鱼进行营养成分、质构特性和理化特性分析,以期研究3种鲤的肌肉品质差异。试验结果显示:金边鲤肌肉水分含量显著低于建鲤,粗脂肪含量显著高于建鲤,福瑞鲤粗蛋白含量和酸度显著高于建鲤,肌肉酸度显著低于建鲤。金边鲤肌肉的硬度、弹性、咀嚼性和回复性均为最高。3种鲤检测出的17种氨基酸中包括7种EAA、4种DAA和其他6种NEAA,其中Asp、Glu和Lys的含量最高,占氨基酸总量的37.59%~41.20%,必需氨基酸中赖氨酸的含量最高(2.50%~2.71%)。福瑞鲤的TAA、EAA、DAA均为最高,其次为金边鲤、建鲤。3种鲤肌肉的必需氨基酸指数为90.00~91.25,排名为金边鲤>建鲤>福瑞鲤。结果表明3种鲤肌肉营养各具特色,均具有丰富的营养物质,且组成比例符合人体需求,综上认为,金边鲤作为土著鱼类品种,在池塘养殖中与建鲤和福瑞鲤具有相似的营养价值,是值得进一步推广养殖的优良品种。

河北地区小型温棚鲤鱼早繁试验

为探索河北地区利用小型温棚进行鲤(Cyprinus carpio)提早繁殖的可行性,在11月中旬挑选3龄鲤亲鱼400组(雌雄各400尾)放入小型温棚,雌雄分开放养。通过利用太阳热能和人为控制,越冬期间小棚内水温最低温度不低于8℃,次年3月中旬,棚内水温升至16℃,进行人工繁育。2023年3月15日、3月22日和4月13日进行三批人工催产试验,3个批次的催产率分别为48.8%、88.6%、89.7%,受精率分别为80.29%、81.27%、87.3%,出苗率分别为54%、37%、55.84%,共生产水花1.23亿尾,培育乌仔364.6万尾。鲤早繁比自然繁殖提前15~20 d。

无鱼粉饲料中补充限制性氨基酸对鲤抗氧化及部分免疫酶活性的影响

为探讨在无鱼粉饲料中补充限制性氨基酸对鲤(Cyprinus carpio)抗氧化性能和免疫酶活性的影响,研究设计了5组等氮等脂的饲料,分别添加不同水平的限制性氨基酸(Met∶Lys=0.318),即0%(G1组)、0.5%(G2组)、1.0%(G3组)、1.5%(G4组)、2.0%(G5组)。选取初始体质量为(55.54±0.09)g的鲤150尾,进行了为期8周的养殖试验。研究结果显示,适量补充限制性氨基酸能够提高鲤的总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;同时降低丙二醛(MDA)含量。G4和G5组的T-AOC活性显著高于对照组(P<0.05),G2、G3、G4和G5组的T-SOD和CAT活性显著高于对照组(P<0.05),G5组的MDA含量显著低于G1、G2和G3组(P<0.05)。随着限制性氨基酸补充水平的增加,鲤肝脏的ACP、AKP和LZM活性也呈上升趋势。G3、G4和G5组的ACP活性显著高于对照组(P<0.05),G4和G5组的AKP和LZM活性显著高于对照组(P<0.05)。根据试验结果,可以得出结论:在本试验条件下,适量补充限制性氨基酸能够增强鲤的抗氧化性能和部分免疫酶活性,其中2.0%的限制性氨基酸补充量效果最好。

饲料中添加地衣芽孢杆菌对鲤鱼生长性能的影响

该试验旨在研究鲤(Cyprinus carpio)的饲料中添加不同水平的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)对其生长性能的影响,确定鲤养殖中最适地衣芽孢杆菌添加水平。试验选择480尾体重相近的鲤随机分成4个处理组,每组4个重复,每个重复30尾。各组鲤依次投喂含有0%、0.1%、0.2%和0.4%地衣芽孢杆菌的饲料。驯养2周,进行60 d的正式试验。试验结束测定各组鲤的生长性能。结果显示,与对照组比较,试验组投喂含0.2%和0.4%地衣芽孢杆菌的饲料,可以显著提高其试验末重、增重率,显著降低了饲料系数(P<0.05);投喂含有0.1%、0.2%和0.4%地衣芽孢杆菌的饲料,可以显著提高特定生长率(P<0.05);投喂含有0.2%地衣芽孢杆菌的饲料可以显著提高蛋白质效率(P<0.05)。研究结果表明,在鲤的养殖中添加适量的地衣芽孢杆菌可以明显改善其生长性能,且地衣芽孢杆菌的最适添加量为0.2%。

饲料脂肪水平对锦鲤幼鱼生长和血液生化指标的影响

本实验以初始体重为(5.85±0.19)g红白锦鲤(Cyprinus carpio L)幼鱼为实验对象,研究在螺旋藻添加量为12%时,饲料脂肪水平对锦鲤生长、饲料表观消化率、肠道消化酶和血液生化指标的影响。实验设5.36%、7.74%、10.52%、12.85%、15.45%5个脂肪梯度,每组设3个重复,每个重复10尾鱼,表观饱食投喂60 d。结果显示:脂肪水平为5.36%～10.52%,锦鲤增重率(BWG)、特定生长率(SGR)随脂肪水平的升高而升高,均在脂肪水平为10.52%时,达到最大值。实验鱼血清谷丙转氨酶(ALT)随脂肪添加比例呈现先下降再升高的趋势,脂肪水平为12.85%后,血清ALT显著升高(P<0.05),脂肪水平为15.45%时,血清GLU浓度显著升高(P<0.05),而甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL)随脂肪水平的升高各实验组间无显著性差异(P>0.05)。结果表明,螺旋藻添加量一定时,锦鲤适宜脂肪添加水平为10.52%。

中药复方制剂对锦鲤生长、体色及若干生理生化指标的影响研究

在基础饵料中添加三种中药复方制剂,投喂锦鲤(Cyprinus carpio)20 d后,测定各试验组的生长指标、血液白细胞吞噬活性以及尿素氮含量,测定肝脏谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)活性,测定鱼体红色部位鳞片的色素含量。结果表明:与对照组比较,三种中药复方制剂均能提高锦鲤的增重率、肥满度、肝体比,降低饲料系数。复方1中剂量组可显著降低血清尿素氮含量,提高肝脏SOD活性,降低肝脏MDA活性;高剂量组对提高肝脏SOD活性,降低肝脏MDA活性作用显著。复方2中剂量组可以显著降低血清尿素氮的含量,提高肝脏GPT活性;高剂量组对SOD活性作用显著。复方3低剂量组对MDA作用显著。同时复方3各剂量组对肝脏GOT作用显著。复方2各剂量组可显著提高体色的鲜艳度。对于白细胞的吞噬活性,复方1、3各剂量组吞噬百分比与对照组相比显著提高;复方1、3的中、高剂量组与对照组相比吞噬指数也显著提高。综合以上结果,复方1中剂量组在生长、增强免疫力等方面,复方2中剂量组在生长、体色及抗氧化性等方面具有显著作用,两者可推荐为锦鲤的饲料添加剂。

阿维菌素和甲苯咪唑对黄河鲤的急性毒性研究

采用生物毒性试验方法进行了阿维菌素和甲苯咪唑对黄河鲤的急性毒性试验。结果显示:阿维菌素对黄河鲤的24、48和96 h半致死浓度分别为8.72,7.85,6.97×10-3 mg/L;安全浓度为1.91×10-3 mg/L。甲苯咪唑对黄河鲤的24,48和96 h半致死浓度分别为4.29,3.98,3.53 mg/L;安全浓度为1.23 mg/L。结果表明这两种杀虫药物的安全浓度都接近甚至低于它们在养殖生产中的的使用浓度,所以在养殖生产中应该谨慎使用。

饲料中添加蛋白酶Aquagrow对鲤生长和蛋白质消化酶活性的影响

为考察蛋白酶Aquagrow对鲤(Cyprinus carpioL)生长和蛋白质消化酶活性的影响,在鱼粉含量为6%的基础饲料中添加175 mg/kg的蛋白酶Aquagrow,饲养平均体重为48.7 g的鲤30 d。结果显示,基础饲料组(对照组)和添加蛋白酶组的鱼体增重率分别为99.4%、105.8%,饲料系数分别为1.85、1.75,添加蛋白酶提高了鲤鱼增重率6.4个百分点(P<0.05),降低了饲料系数5.4%(P<0.05),但对鱼体肌肉水分、粗脂肪、粗蛋白含量没有显著影响(P>0.05);对消化酶活性的测定表明,添加蛋白酶可显著提高肠道组织蛋白酶活性和肠道内容物蛋白酶活性(P<0.05)。上述研究表明,添加蛋白酶Aquagrow可提高鲤消化道蛋白酶活性,改善鲤生长性能。

急性拥挤胁迫对鲤血液中皮质醇及几项生化指标的影响

通过对鲤(Cyprinus carpio)3 h急性拥挤胁迫(密度70g/L)实验,并在胁迫开始前(对照)、胁迫结束后的第0至168 h采样测量几项血液指标。实验结果显示在3 h拥挤胁迫结束之时(0 h),鲤血清皮质醇、血糖和乳酸水平均显著高于胁迫前对照值(P<0.05),而游离脂肪酸水平极显著低于对照值(P<0.01)。之后这些指标继续发生波动,但一段时间后均可恢复至对照水平并保持稳定。实验期间血清甘油三酯和胆固醇水平并未出现显著变化(P>0.05)。该结果提示3 h拥挤胁迫可引起鲤体内血清皮质醇水平及部分血液生化指标发生改变,这可能是为了弥补应激期间机体对能量需求的增大。

基于转录组测序的兴国红鲤微卫星标记筛选

采用Illumina高通量测序技术,对兴国红鲤（Cyprinus carpio var.singuonensis）垂体和性腺等组织进行转录组测序分析,筛选微卫星标记并分析其组成及特征。结果显示：共获得13 652个微卫星标记,对所得位点进行分类,单核苷酸重复类型占47.86%,二、三、四、五、六核苷酸重复类型所占比例分别为34.43%、16.32%、1.25%、0.12%以及0.02%。随机选取30个SSR位点进行PCR验证,有20对可以扩增出清晰稳定的条带。在24个兴国红鲤个体中对上述位点进行多态性分析,结果表明,具有多态性的微卫星引物为9对。不同位点得到的等位基因范围为2~4,平均等位基因数为3.111 1±0.993 8,观测杂合度（Ho）、期望杂合度（He）以及多态信息含量（PIC）平均值分别为0.597 2±0.233 2、0.539 7±0.178 0和0.467 2±0.172 1。9个微卫星位点中,有4个显著偏离哈代-温伯格平衡（Hardy-Weinberg equilibrium,HWE）（P〈0.05）。Illumina高通量测序提供了一种直观、高效开发微卫星标记的方法,所选兴国红鲤群体遗传多样性维持较好。