金针菇多糖通过调节髓系细胞生成缓解苯并[a]芘染毒小鼠血管炎症

金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharide,FVP)具有良好的抗炎、抗氧化作用。为进一步探讨FVP缓解血管损伤的效果和作用机制,构建苯并[a]芘(benzo[a]pyrene,Ba P)小鼠染毒模型,通过免疫组化检测血管炎症因子表达量;使用流式细胞术分析外周血和脾脏中促炎细胞比例及骨髓造血细胞亚群构成。结果显示,FVP处理缓解Ba P诱导的白介素-6、单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附分子-1等血管促炎因子的表达。此外,FVP处理显著抑制Ba P诱发的小鼠外周血中单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞以及脾脏中巨噬细胞和中性粒细胞比例的增加。进一步分析骨髓造血细胞亚群构成发现,Ba P处理后增加了小鼠骨髓中造血祖细胞和粒细胞巨噬细胞祖细胞的比例,减少了造血干细胞和普通髓系祖细胞的比例,而FVP处理后逆转了这一现象,使骨髓造血细胞亚群恢复至健康对照水平。同时细胞水平上的研究表明,FVP可抑制Ba P诱导Raw264.7细胞产生的氧化应激。综上,FVP可能是通过维持骨髓造血系统的稳态、调节促炎细胞向循环系统的输出和下调外周促炎细胞的比例缓解Ba P引发的血管炎症损伤。

金针菇多糖纯化及抗氧化活性研究

目的:对金针菇(Flammulina filiformis)多糖进行纯化并评价其抗氧化活性。方法:采用中空纤维超滤技术优化金针菇多糖纯化参数,以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为模型对多糖进行抗氧化活性评价。结果:超滤纯化最佳参数为超滤膜孔径2 kDa、超滤压力0.08 MPa,且超滤时间在50 min内超滤速度未出现下降,可获得较高得率的多糖。通过乙醇沉淀分离2~15 kDa、15~30 kDa和30 kDa以上3个分子量范围的多糖,其中,2~15 kDa多糖具有最强的抗氧化活性,可使秀丽线虫的最大寿命达12 d,比对照组延长了1倍。结论:采用中空纤维超滤技术获得的金针菇多糖具有良好的抗氧化活性,为金针菇多糖的应用提供了理论依据,可用于健康功能食品的开发。

金针菇子实体多糖均一组分FVP60-C2制备及单糖组成分析

金针菇子实体经水提醇沉得水溶性粗多糖,再经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱和凝胶柱层析纯化,得到均一多糖FVP60-C2;采用高效液相色谱、紫外-可见光光谱全扫描和傅里叶变换红外光谱研究其理化性质;样品经三氟乙酸水解,乙酰衍生化后,用单糖标准品作对照,用气相色谱分析其单糖组成。结果表明:FVP60-C2为均一多糖,平均分子质量为1.429×104D;其是由岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,各单糖的物质的量比为0.74:0.21:1.36:1.00:1.31。

金针菇多糖的活性及其提取纯化工艺研究进展

多糖是金针菇重要的生物活性成分之一,具有免疫调节、抗氧化、抗炎、抗疲劳等作用,因此高效提取、分离、纯化金针菇多糖一直为行业热点研究问题。通过对金针菇多糖生物活性的研究进展进行综述,对多糖提取、分离、纯化的优化工艺进行整理,以期为金针菇多糖的研究、生产提供最佳提取纯化工艺的选择清单,为进一步的工艺改良以及精深加工产品的开发奠定基础。

金针菇多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨金针菇多糖(polysaccharides of Flammulina velutipes,FVP)对CCl4诱导的急性肝损伤的保护作用。方法小鼠腹腔注射CCl4橄榄油溶液(0.5%,5 mL.kg-1)12、24、48、72 h后测定血清ALT,确定CCl4急性肝损伤造模最佳时间为24 h。FVP(75,150,300 mg.kg-1)连续口服给药8 d,第7天采用CCl4制备小鼠急性化学性肝损伤模型,24 h后测定FVP对血清ALT、AST活性,肝匀浆SOD活性、MDA含量的影响。结果 FVP能显著降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,提高肝匀浆SOD的活性,降低MDA的含量。结论金针菇多糖对CCl4诱发的小鼠应激性肝损伤有一定的保护作用。

富硒金针菇子实体中硒多糖的分离纯化技术及红外光谱研究

对富硒金针菇子实体中硒多糖(Se-containing polysaccharide,Se-P)的分离、纯化进行了优化研究,并采用苯酚-硫酸法、ICP-MS法对硒多糖中多糖及硒含量进行了测定。确定硒多糖的最佳提取条件为:浸提温度80℃、浸提时间3 h、料液比1∶50、提取3次合并滤液;其中多糖含量为12.48%,硒含量为7.97μg/g。将粗多糖经Sephadex G-100柱层析系统分离纯化,所得精硒多糖进行红外光谱分析表明:可溶性硒多糖均为β-糖苷键连接的吡喃多糖,其中水溶性硒多糖与普通多糖结构相似,而碱溶性硒多糖中由于硒酸酯的形成改变了原有多糖的吡喃环糖苷键的构型,进一步证明在金针菇的富硒培养过程中,硒参与了硒多糖的合成。

金针菇菌丝体多糖超声提取工艺的研究

目的:研究金针菇菌丝体多糖超声辅助提取的最佳工艺。方法:通过单因素以及正交试验进行超声辅助提取金针菇菌丝体多糖;采用蒽酮比色法测量金针菇菌丝体多糖的含量。结果:超声辅助提取金针菇菌丝体多糖,最佳工艺条件为:料液比1:100、超声强度80W、超声处理时间10min、浸提液pH8.0。结论:水浴提取法平均提取率为1.16%,超声辅助提取金针菇菌丝体多糖的得率率平均为3.46%,提高了198.28%。这说明超声辅助法提取金针菇菌丝体多糖明显优于水浴法。

响应面优化酶法辅助提取金针菇根部多糖的工艺研究

目的:对木瓜蛋白酶法辅助提取金针菇根部多糖的工艺进行研究。方法:考察不同酶种类对金针菇根部多糖提取率的影响,选择木瓜蛋白酶用于酶法提取实验研究。在单因素实验的基础上,通过响应面法对影响金针菇根部多糖提取率的三个主要影响因素即酶解pH、酶解温度、酶解时间进行分析优化。结果:影响金针菇根部多糖提取率的工艺因素按主次顺序排列为:酶解温度>酶解时间>酶解pH;确定木瓜蛋白酶酶解金针菇根部多糖最佳工艺条件为木瓜蛋白酶添加量1.5%、料液比1∶20、酶解pH5.5、酶解温度52℃、酶解时间82min。在此最佳条件下,多糖的提取率为5.90%,得率为9.34%,多糖纯度为67.3%,蛋白质含量为5.3%,均极显著优于传统的热水浸提法。结论:采用木瓜蛋白酶辅助提取工艺,相对于传统热水浸提法可显著提高金针菇根部多糖得率和纯度。

金针菇锌多糖分离纯化及其结构特征

目的:以金针菇为原料,经过逐步分离纯化得到两个锌多糖组分并研究其理化性质、光谱学特性及结构特征。方法:金针菇锌多糖采用热水浸提的方法提取,经DEAE纤维素-52和Sephadex G-100凝胶色谱柱逐步分离纯化后通过火焰原子吸收法测定多糖中锌的含量,高效凝胶过滤色谱法鉴定组分的均一性,并测定其分子质量及单糖组成,采用紫外光谱、红外光谱和刚果红实验对锌多糖的结构特征进行相关研究。结果:通过分离纯化得到两个锌多糖组分CF1、CF2,纯品提取率分别为20.97%与12.25%,其中锌含量分别为191、429μg/g,平均分子质量分别为890、1 244 kD。CF1组分由葡萄糖、半乳糖等6种单糖组成;CF2组分主要由甘露糖、葡萄糖、岩藻糖等8种单糖组成,且两个多糖组分均具有三股螺旋分子结构。

金针菇多糖对小鼠免疫细胞产生细胞因子及对荷瘤小鼠血清细胞因子含量的影响

目的:研究金针菇多糖(FVP)对小鼠免疫细胞产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-2(IL-2)的影响。方法:MTT比色法检测细胞代谢活力,ELISA方法检测TNF-α、INF-γ、IL-2的含量。结果:FVP(200、100、50μg/mL)可增强小鼠脾细胞及腹腔渗出细胞代谢MTT的活力,促进小鼠脾细胞分泌TNF-α、IFN-γ、IL-2,促进小鼠腹腔渗出细胞分泌TNF-α,并且以促进TNF-α分泌作用最为明显;FVP(100、50、25 mg/kg)可以提高荷S180瘤小鼠血清TNF-α、IFN-γ的含量。结论:FVP可能通过促进小鼠免疫细胞产生TNF-α、IFN-γ、IL-2而发挥免疫调节功能。

富锗金针菇多糖对小鼠肝脏的保护作用

目的:研究富锗金针菇多糖(CFVP)对急性肝损伤小鼠转氨酶活性的影响及对肝脏的保护作用,在此基础上研究其精制品FVP1对CCl4损伤的小鼠原代肝细胞的保护作用。方法:采用0.2%CCl4灌胃造成小鼠急性肝损伤模型,以CFVP和阳性对照联苯双酯灌胃给药,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)的活性,并对小鼠肝脏进行切片观察;采用二步分离法制备小鼠原代肝细胞,检测FVP1对CCl4损伤的原代肝细胞ALT活力的影响。结果:CFVP高、中剂量组对CCl4致急性肝损伤小鼠ALT活性的升高具有显著的降低作用,与造模组相比有极显著性差异(P<0.01);低剂量组与造模组相比有显著性差异(P<0.05),CFVP对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用;FVP1中剂量组、低剂量组可使培养液中的ALT活性明显低于模型组,具有极显著性差异(P<0.01),即ALT明显减少,说明FVP1对CCl4损伤的原代小鼠肝细胞具有保护作用。结论:富锗金针菇多糖具有保护肝脏细胞,防止肝细胞坏死的作用。

金针菇深层发酵条件及水浴提取菌丝体多糖的研究

目的:研究金针菇深层发酵的条件、培养菌丝体及菌丝体多糖的提取工艺。方法:通过发酵罐发酵研究金针菇深层发酵的条件及培养菌丝体;通过单因素试验及正交试验研究菌丝体多糖的水浴提取工艺。结果:试验确定了金针菇发酵的最佳种龄为48h、最适接种量是15%,菌丝生长曲线测定确定了发酵周期为培养时间96h,溶氧30%～50%,25℃培养;水浴提取金针菇菌丝体多糖的最佳工艺是:料液比1:60,水浴时间90min,水浴温度60℃。结论:明确了金针菇深层发酵的培养条件,通过发酵罐发酵每升发酵液可得到40g金针菇菌丝体(干重);得到了金针菇菌丝体多糖的水浴提取工艺。

金针菇水溶性多糖提取工艺的研究

探讨了以金针菇为原料提取水溶性多糖的最佳工艺条件。结果表明,温度90℃、浸提时间4h、料液比1:30、提取2次、pH7为提取金针菇多糖的最佳工艺条件。向糖液中加入氯仿-正丁醇溶液(5:1)去除蛋白以纯化多糖,产率达1.63%。

金针菇多糖-Fe(Ⅱ)螯合物的制备及抗氧化活性

确定金针菇多糖与Fe(Ⅱ)的螯合工艺及其抗氧化活性。以螯合度为指标,探讨螯合时间、金针菇多糖与Fe(Ⅱ)的质量比(mg/mg)、Fe(Ⅱ)的初始质量浓度(mg/mL)对金针菇多糖-Fe(Ⅱ)螯合物的影响,通过响应面试验确定最佳螯合条件,并对金针菇螯合前后的抗氧化性进行比较。结果表明:当螯合时间6h、金针菇多糖与Fe(Ⅱ)的质量比3.54:1(mg/mg)、初始质量浓度为6mg/mL时螯合度为86.21%;各抗氧化性实验结果显示金针菇多糖螯合Fe(Ⅱ)后其抗氧化性能较螯合前有所提高。

金针菇多糖的研究进展

金针菇多糖是金针菇的主要活性成分之一,近年来因其抗肿瘤和调节免疫等功能成为研究的热点。综述金针菇多糖的提取、纯化、结构和生物活性的研究进展,提出目前金针菇多糖研究中存在的问题,并对其研究方向进行展望。

金针菇多糖闪式提取工艺及其抗氧化活性研究

以金针菇为原料,应用响应面法优化了金针菇多糖的闪式提取工艺,并对多糖的抗氧化活性进行了测定。结果表明:最佳闪式提取条件为液料比26∶1(m L∶g)、提取电压190 V、提取时间103 s,在该条件下,提取两次,多糖最终提取率为6.85%,较高温浸提法提高了40.08%。抗氧化实验表明,金针菇多糖具有明显的还原能力和清除羟自由基和DPPH自由基的能力。

富锗金针菇多糖空间结构和与生物活性关系的研究

目的研究从富锗金针菇菌丝体中提取、分离得到富锗真菌多糖FVP的空间结构以及空间结构与生物活性之间的关系。方法用刚果红反应测定FVP的空间构象,用不同浓度的氢氧化钠处理多糖,观察多糖处理前后比旋度的变化以及空间结构的变化,并进一步对处理前后的多糖在保肝及治疗肝癌方面的生物活性进行比较。结果FVP为3股螺旋构象,不同浓度的氢氧化钠对该多糖空间构象产生不同程度的影响,低浓度的NaOH处理的多糖在除去NaOH后其空间结构可完全恢复或部分恢复并伴随着生物活性的部分恢复,高浓度NaOH处理后其空间结构发生变化并伴随生物活性几乎完全丧失。结论多糖的空间结构与生物活性密切相关。

金针菇多糖的抗氧化活性

以茶多酚和VC为对照,采用Fenton反应法研究金针菇多糖对羟自由基·OH的清除作用;采用邻苯三酚自氧化法研究金针菇多糖对超氧阴离子自由基O2-·的清除作用。结果表明:在本试验含量范围内,金针菇多糖对·OH和O2-·具有一定的清除能力;在含量相同的情况下,金针菇多糖对·OH和O2-·的清除能力比茶多酚和VC强。此外,研究了金针菇多糖抗油脂自动氧化能力,结果表明:金针菇多糖具有一定的抗油脂氧化活性。

水浴法和微波法提取金针菇下脚料多糖的优化及比较研究

采用水浴法和微波辅助法对金针菇下脚料多糖的提取工艺进行了研究。实验结果表明,水浴料液比、提取温度和提取时间对金针菇下脚料多糖提取率有显著影响,优化的水浴提取工艺条件为料液比1:20,提取温度为80℃,提取时间2.0h,提取率达13.68%;微波提取料液比、微波功率和微波时间对金针菇下脚料多糖提取率有显著影响,优化的微波提取工艺为料液比为1:25,微波功率320W,微波提取时间80s,提取率达13.80%。与传统的水浴法相比,微波提取法效率高、节约能源,应用前景广阔。

金针菇液体培养生产多糖的研究(英文)

对不同菌株、不同培养基和培养时间对金针菇菌丝体产量和金针菇多糖产量的影响进行了研究,并对金针菇胞外多糖进行了紫外和红外分析。结果表明,金针菇12号菌株在液体培养基中培养10～11 d时金针菇菌丝多糖含量和金针菇菌丝体产量最高,金针菇胞外多糖产量较高。紫外和红外分析结果表明,本研究所分离的金针菇胞外多糖为一种含β型吡喃糖苷键的纯多糖。采用不同的培养基对金针菇胞外多糖的主体结构影响不明显,均有相似的多糖特征峰和β型吡喃糖苷键吸收峰。但采用玉米、黄豆等配制的培养基更有利于工业化生产金针菇多糖。