免疫金银染色法、斑点ELISA和斑点免疫金银染色法检测华支睾吸虫病人血清中抗体的研究

用免疫金银染色法(IGSS)、斑点ELISA和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)三种方法,同时检测40份华支睾吸虫病人血清,阳性率分别为100％、90％和95％,检测40份正常人血清,阴性率分别为100％、97.5％和97.5％,显示三种方法均有较高的敏感性和特异性。

免疫金银染色法用于检测系统红斑狼疮患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体

目的 探讨检测抗核抗体 (ANA)、抗双链DNA抗体 (A -dsDNA)对系统性红斑狼疮 (SLE)的诊断意义。方法 采用免疫金银染色法 (IGSS)和用斑点免疫金银染色法 (Dot-IGSS) ,检测SLE病人血清中ANA和A -dsD NA。结果 113例活动期SLE患者血清ANA阳性率 97.3% ,A -dsDNA阳性率 71.7% ;35例非活动期SLE患者血清ANA阳性率 74 .3% ,A -dsDNA阳性率 14 .3%。活动期ANA、A -dsDNA阳性率与非活动期比较均有显著性差异 (P <0 .0 1)。活动期ANA平均滴度明显高于非活动期 ,A -dsDNA阳性组肾损害明显高于A -dsDNA阴性者(P <0 .0 1)。结论 IGSS和Dot-IGSS检测ANA、A -dsDNA有高度特异性、敏感性和稳定性 ,较高滴度A -dsD

快速斑点免疫金染色法与二种免疫金银染色法检测抗囊尾蚴抗体的比较研究

目的 建立敏感性高、特异性强 ,方法简便和经济实用的快速诊断囊尾蚴病的免疫学检测方法。方法将猪囊尾蚴液抗原点加于微孔滤膜 ,经预作用和封闭后 ,依次加入待检血清和金标记二抗 ,建立快速斑点免疫金染色法 (F -Dot-IGS)以检测囊尾蚴病患者血清抗体 ,同时用快速微量斑点免疫金银染色法 (RMDot-IGSS)和斑点免疫金银染色法 (Dot-IGSS)检测作为对照。结果 检测 4 0例囊尾蚴病患者血清抗体 ,阳性率 10 0 % ;检测 4 0例健康人血清均为阴性 ;除包虫病患者外 ,10例肝吸虫病患者、10例血吸虫病患者和 10例肺吸虫病患者血清未见交叉反应。结论 F -Dot-IGS敏感特异 ,快速简便 ,有较高的实用价值 。

应用免疫胶体金银染色技术定位玉米内生细菌

本文利用光镜免疫胶体金银染色技术对玉米内生细菌进行了定位研究.用分离、筛选于玉米体内具有生防潜力的优势菌枯草芽孢杆菌B20-006菌株的特异性蛋白,制备兔抗血清作为一抗,二抗为金标记羊抗兔IgG,30%甘油-1%戊二醛固定组织,进行冷冻切片免疫胶体金银染色光镜观察.结果表明:枯草芽孢杆菌液浸根处理后5～7 d(三叶期)的组织切片中菌体有大量金银颗粒沉淀,内生细菌在根、茎、叶均有分布,大多寄生在植物组织的细胞间隙,菌量根部大于茎和叶部,根、茎、叶的菌量之比为12:3:1,证明枯草芽孢杆菌B20-006菌株为玉米内生细菌,且可在玉米体内繁殖和传导.

斑点免疫金银染色法诊断囊虫病的研究

用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测40份确诊为囊虫病患者的血清。两种方法检测的阳性率均为100％,用Dot-IGSS检测,40份血清的平均滴度为1:27470,显著高于用Dot-ELISA检测的平均滴度1:9069(P<0.01)。检测50份义务献血员血清,假阳性率分别为2％和4％。10份日本血吸虫病人血清分别有1份和2份出现假阳性。与肝吸虫病人血清无交叉反应,与包虫病人血清有明显的交叉反应。

基于免疫金银染色的蛋白质与抗原分子微阵列技术

目的 研制适于自身抗体检测的蛋白质与抗原分子微阵列。方法 利用氧化型琼脂糖凝胶膜结合戊二醛分子衍生的活性表面 ,制作蛋白质与抗原分子微阵列 ,建立了检测血清自身抗体的胶体金免疫金银染色方法 (IGSS)。结果 在未经选择的风湿病患者中 (包括SLE ,RA和MCTD) ,检出多种自身抗体阳性 ,其中又以子宫内膜抗体 (EmAb)、抗ssDNA抗体、抗TG抗体、抗TPO抗体和RF等的检出频率较高 ;但心磷脂抗体 (ACA)、抗LSP和抗精子抗体 (AsAb)均为阴性。经初步方法学对比考证 ,实验结果与ELISA有较好的一致性 (达 90 % )。结论 本法具有方法敏感 ,结果直观和实验条件易于控制等特点 ,为发展可视化阵列芯片提供了一种很好的模式。

免疫金银染色法在蛋白质微阵列检测TORCH感染的实验研究

目的研制基于免疫金银染色法的TORCH检测蛋白质微阵列。方法将TORCH抗原点样于已经被琼脂糖膜修饰的玻片表面,与待测血清和胶体金标记的抗人IgM(μ链)孵育,用银增强微阵列信号,肉眼观察或普通的平板扫描仪记录结果。以不同浓度的纯化人IgM制备标准曲线。结果蛋白质微阵列的灰度质和IgM的浓度呈线性关系。60份待测血清与ELISA法同时检测,诊断符合率为93.3%。结论该法具有高信息通量、低成本、制备与检测快速简单的优点。

家蚕微孢子虫单抗金银染色法检测技术的研究

使用新构建的抗家蚕微孢子虫（N．b）的单克隆抗体，结合免疫金银染色（IGSS），进行检测N．b。设计6种温度和5种时问，对N．b等9种微孢子虫检测，结果表明，该细胞株单抗直接IGSS法最佳工作条件：胶体金标记pH值6.2～6.5，金标抗体染色37℃、保湿30min，经显影后光镜观察，N．b孢子周边被染上棕褐色，其它类型孢子呈无色或浅褐色；实验还比较了抗原涂片后，不同物理、化学方法固定，结果甲醇固定效果较好。

彩色免疫金银染色法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

试验首次建立了固相载体上的彩色免疫金银染色法(CIGSS)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并获得成功。用提纯的PRRSV高免兔制备高免血清,按常规方法提取兔抗PRRSVIgG,建立了检测PRRSV抗原的彩色免疫金银染色法。经方阵试验确定最佳兔抗PRRSV IgG工作浓度为1∶400,金标羊抗兔IgG的工作浓度为1∶1 000,银染色的时间为15 min,彩染的时间为2 min。用该法对提纯的PRRSV病毒抗原的最低检出量为1.469μg/ml,其敏感性为DIGFA的5倍。以CIGSS法检测了52份疑似PRRSV感染的猪样本,阳性率为53.84%,而检测猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪巴氏杆菌以及正常的Marc-145细胞培养物,均为阴性反应。表明该法具有快速、准确、操作简便、敏感性高、易于判断、特异性强、重复性好等优点,可用于大量PRRSV抗原样本的检测。

多种底物在免疫金银染色检测抗核抗体试验中的联合应用

将多种底物联合应用于免疫金银染色检测ANA试验,与各底物单独应用比较,可明显改善检测的敏感性与核型显示。其中,两种鼠脏器印片联合应用的结果可与Hep-2细胞的结果相当,三种及四种鼠脏器印片联合应用的结果可与Hep-2细胞和一种鼠脏器印片联合应用的结果相当,且均不使正常人ANA阳性率明显升高。

微量快速斑点免疫金银染色法检测系统性红斑狼疮患者血清抗双链DNA抗体的研究

目的 :建立一种便捷的检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清抗双链DNA抗体的方法。方法 :在斑点免疫金银染色法 (dot-immungold -silverstaining ,Dot-IGSS)的基础上 ,缩短反应和洗涤时间 ,建立微量快速斑点免疫金银染色法 (Microvolume -Fast -Dot-IGSS ,MFDot-IGSS)并与Dot-IGSS进行比较。结果 :用MF Dot-IGSS和Dot-IGSS同步检测 70份SLE患者血清抗双链DNA抗体 (A -dsDNA) ,阳性率分别 6 4 .3%和6 5 .7% ;检测其他自身免疫性疾病患者血清 30份阳性率均为 3.3% ;检测健康献血员血清 5 0份 ,阳性率均为2 .0 %。二种方法的敏感性和特异性均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MFDot -IGSS检测SLE病人血清A-dsDNA的敏感性和特异性与Dot -IGSS相似 ,但便简快速 ,适用于门诊及基层医院。

应用免疫金银染色法检测包虫病和恶性疟病人抗体的研究

用免疫金银染色法检测了包虫病人和恶性疟病人血清中的特异性抗体,10份包虫病人血清均为阳性,20份恶性疟病人血清有19份为阳性。最高抗体滴度为1:1000000表明具有较高的敏感性。

斑点免疫金银染色法诊断华支睾吸虫病的研究

应用斑点免疫金银染色法检测35例华支睾吸虫病人血清中抗体,同时检测35例正常人血清。血清稀释度1:20、1:40和1:80,35例病人血清阳性率100％,正常人血清均为阴性。10例血吸虫病人血清检测无交叉反应,但10例肺吸虫病人血清中4例为阳性反应。

间接免疫金银染色检测血清抗核抗体

应用间接免疫金银染色(IIGSS)检测了系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病病人及正常人血清中的抗核抗体(ANA),并与间接荧光抗体试验(IFAT)作了比较。在149份血清中IIGSS检出45份阳性,IFAT只检出29份阳性。IFAT有32份为可疑,IIGSS只有2份为可疑。且ANA滴度以IIGSS为高,核型显示以IIGSS更清楚。结果表明,IIGSS检测血清ANA特异性高,较IFAT更敏感、可靠、并能反映ANA组分。

免疫金银染色法诊断血吸虫病的研究

应用免疫金银染色法(IGSS)诊断血吸虫病,并与ELISA法比较。检测153例粪检阳性和76例健康人血清,其敏感性和特异性分别为96.08％和100％,显著高于ELISA的88.24％和94.70(p>0.05);与肝吸虫病的交叉反应两法均为4.76％;治疗后3年的49例血吸虫病人阳性率IGSS和ELISA分别为30.60％和28.57％,两法无显著差异(p>0.05)。表明IGSS的特异性高,敏感性强,制备金标记物方法简便,结果稳定。

微量快速斑点免疫金银染色法检测囊尾蚴病患者血清抗体的研究

目的 建立一种便捷的囊尾蚴病免疫学诊断方法。方法 在斑点免疫金银染色法 (Dot-IGSS)的基础上 ,待检血清标本原倍使用 ,缩短抗原抗体及与金标二抗的作用时间 ,建立微量快速斑点免疫金银染色法 (RMDot-IGSS)。结果 RMDot-IGSS法检测囊尾蚴病患者血清 96份 ,阳性率为 10 0 % ;检测健康献血员血清 5 0份 ,特异性为 96 % ;检测华支睾吸虫病患者、卫氏并殖吸虫病患者、日本血吸虫病患者血清各 10份 ,均未出现交叉反应 ;但棘球蚴病患者血清 10份有明显的交叉反应。以上结果与Dot-IGSS法检测结果比较 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 RMDot-IGSS法的敏感性和特异性与Dot-IGSS相似 ,但操作简便快速 。

斑点免疫金染色法与免疫金银染色法诊断日本血吸虫病的比较(英文)

目的 建立快速、敏感、特异性强 ,操作简便和经济实用的诊断日本血吸虫病的免疫学检测方法一快速斑点免疫金染色法 (R -Dot-IGS)。 方法 将日本血吸虫虫卵可溶性抗原点加于微孔滤膜 ,经预作用和封闭后 ,依次加入待检血清和金标记二抗 ,然后观察结果 ,并与快速微量斑点免疫金银染色法 (RM -Dot -TGSS)和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)进行比较。 结果 用R -Dot -IGS、RM -Dot -IGSS和Dot -IGSS同步检测 5 5份日本血吸虫病患者血清 ,三种方法的阳性率分别为 98.18% (5 4/5 5 )、98.18% (5 4/5 5 )和 10 0 % ;检测 5 0例健康人血清均为阴性 ;检测 10例肝吸虫病人和 10例肺吸虫病人血清 ,仅有 1份肝吸虫病人血清在RM -Dot -IGSS反应为阳性。 结论 R -Dot -IGS检测过程仅为 15min不需银显影 ,具有敏感特异、快速简便实用的特点 ,适用于日本血吸虫病的现场流行病学调查和临床快速诊断。

免疫金银染色法测定抗中性粒细胞胞浆抗体

目的建立检测抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的免疫金银染色法,并评价其应用价值。方法以中性粒细胞基质片为抗原,以胶体金标记的羊抗人IgG为第二抗体,加银染液,普通光镜镜检判断结果;用此法和间接免疫荧光法(ⅡF)检测28例正常人和69例相关疾病的患者血清标本共97例。结果两方法的敏感性和特异性无差异,两法符合率为100%。结论免疫金银染色法可替代ⅡF法,便于基层单位应用。

免疫金银染色法检测自身免疫性疾病患者抗核抗体研究

目的探讨免疫金银染色法检测抗核抗体(ANA)对自身免疫性疾病患者的诊断价值。方法采用免疫金银染色法(IGSS)和间接免疫荧光法(IIF)检测自身免疫性疾病患者血清中ANA。结果80例自身免疫性疾病患者血清免疫金银染色法检测抗核抗体(ANA)阳性率97.3%,间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)阳性率98.2%,χ2=1.006,P=0.316>0.05)。两种方法结果有良好一致性。结论IGSS可用于检测自身免疫性疾病患者血清抗核抗体(ANA)。