金黄杆菌属连续5年耐药性监测与β-内酰胺酶的检测

目的了解医院金黄杆菌属的分离和耐药情况,并探索其产生耐药的机制。方法对医院5年间分离的金黄杆菌属进行鉴定和K-B法药敏试验;同时选择43株脑膜脓毒金黄杆菌、16株产吲哚金黄杆菌和10株黏金黄杆菌共69株,用琼脂稀释法检测14种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);用三维试验和协同试验筛选超广谱β-内酰胺酶及碳青酶烯酶。结果2001年1月-2005年12月5年间共检出金黄杆菌属1128株,其中脑膜脓毒金黄杆菌占88.3%、产吲哚金黄杆菌占8.0%、黏金黄杆菌占2.9%,其他金黄杆菌占0.8%;金黄杆菌属除了喹诺酮类抗菌药物的MIC50和MIC90较低外,其余的抗菌药物均很高;脑膜脓毒金黄杆菌金属酶阳性率为60.5%,产吲哚金黄杆菌阳性率为68.8%,黏金黄杆菌阳性率为90.0%。结论金黄杆菌属对多种抗菌药物耐药,不同种类的金黄杆菌属对不同的抗菌药物耐药性有很大的差异,金黄杆菌属的耐药机制主要是产生了以金属酶为主的β-内酰胺酶。

金黄杆菌属医院感染及耐药性分析

目的探讨常熟市中医院近3年中金黄杆菌属医院感染的分布及其耐药性分析。方法采用荧光快速微生物鉴定仪及配套革兰阴性杆菌鉴定板(GNID),对常熟市中医院临床标本中分离出的45株金黄杆菌属,并用纸片扩散法(K-B)检测其耐药率。结果发现感染者多为脑外科、重症监护(ICU)和呼吸科病房患者;均有吸氧、吸痰史,有行气插管、机械通气史;金黄杆菌属对头孢哌酮-舒巴坦、万古霉素、环丙沙星的敏感率分别为(100.0%、78.9%、78.9%);对亚胺培南、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟的耐药率分别为(79.9%、76.3%、76.3%、76.3%)。结论金黄杆菌属是医院感染重要条件致病菌,与基础病、并发症、广谱抗菌药物及激素的广泛应用密切相关。对多种抗菌药物耐药性高,头孢哌酮-舒巴坦是该菌治疗的首选药物。

金黄杆菌属β内酰胺酶基因型研究

目的了解金黄杆菌属β内酰胺酶基因型的分布。方法采用琼脂稀释法检测43株脑膜炎败血金黄杆菌、16株产吲哚金黄杆菌和10株黏金黄杆菌对15种抗生素的最低抑菌浓度;用三维试验和改良三维试验检测碳青霉烯酶;用2-巯基丙酸协同试验检测金属酶;用6对针对金黄杆菌属的特异性引物扩增金黄杆菌的β内酰胺酶基因并测序。结果喹诺酮类抗生素的 MIC_(50)和 MIC_(90)较低,其余的抗生素的 MIC 值均很高,黏金黄杆菌的 MIC 值要低于其他两种金黄杆菌。表型筛选试验脑膜炎败血金黄杆菌中共检测到26株产金属酶,阳性率为60.5%,43株全部产超广谱β内酰胺酶,阳性率为100%;产吲哚金黄杆菌和黏金黄杆菌均未检出超广谱β内酰胺酶,产吲哚金黄杆菌检出11株金属酶,阳性率为68.8%;黏金黄杆菌检出6株金属酶,阳性率为60%。脑膜炎败血金黄杆菌检出金属酶基因型 Bla-B1、B2、B3、B5、B11共5种,Bla-GOB2、GOB4、GOB6、GOB8共4种;检出超广谱β内酰胺酶 CME-1型1种。产吲哚金黄杆菌3株均为 IND-1型金属酶基因型。黏金黄杆菌检出6株 CGB 金属酶基因型。同时发现产吲哚金黄杆菌有8株,黏金黄杆菌有3株没有检测到目前国内外所报道的基因型。结论金黄杆菌属基因型的研究为临床抗生素的合理应用,降低医院感染以及新型抗生素的开发提供重要的指导意义。

医院金黄杆菌属分布变迁与耐药性研究

目的了解医院金黄杆菌属感染的菌种在临床的分布状况以及对抗菌药物的耐药趋势,为临床治疗金黄杆菌属感染,合理选择抗菌药物提供正确依据,指导临床用药。方法从医院临床标本中分离获得790株金黄杆菌属,用VITEK-32全自动微生物鉴定药敏分析系统进行菌种的鉴定和药物敏感性试验(部分采用K-B法作药物敏感性试验);用WHONET5统计软件对结果进行统计和分析。结果共分离获得金黄杆菌属790株,其中产吲哚金黄杆菌472株,脑膜脓毒金黄杆菌279株,黏金黄杆菌39株;药敏结果显示,产吲哚金黄杆菌对比阿培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为11.2%、29.4%和33.5%;对妥布霉素、左氧氟沙星等7种抗菌药物的耐药率均>80.0%;脑膜脓毒金黄杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率分别为9.3%、10.0%和27.6%;对妥布霉素、亚胺培南等4种抗菌药物的耐药率均>80.0%;在检出的790株金黄杆菌属中产金属酶脑膜脓毒金黄杆菌167株,产酶率为59.9%,产吲哚金黄杆菌中有307株产金属酶,产酶率为65.0%。结论金黄杆菌属在医院感染有逐年增加趋势,菌种分布发生变迁,多药耐药菌株明显上升;比阿培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦对产吲哚金黄杆菌均有很强的抗菌活性,是目前治疗多药耐药产吲哚金黄杆菌感染的最佳选择。

216株金黄杆菌属的医院感染分布及耐药性分析

目的分析医院216株金黄杆菌属医院感染及其耐药性。方法选取医院2009年1月-2012年2月发生的216例金黄杆菌属医院感染病例为研究对象,采用VITEK-AMS 60全自动微生物分析系统及配套革兰阴性杆菌鉴定卡(GIN)对216例标本进行分析,并用纸片扩散法(K-B法)检测其耐药率。结果 216份金黄杆菌属标本主要来源于ICU、呼吸科、神经外科、儿科及老年病科,分别占33.33%、23.61%、13.89%、12.04%、11.11%;该组216株金黄杆菌属对常用12种抗菌药物药敏试验结果显示,对头孢哌酮/舒巴坦敏感率最高,为99.07%,其次为万古霉素、利福平,敏感率为74.54%、60.65%,而对头孢哌酮、头孢曲松、亚胺培南、美罗培南、左氧氟沙星敏感率较低,耐药率均≥75.00%,分别为79.17%、75.00%、78.24%、89.35%、85.19%。结论金黄杆菌属医院感染多发生于重症医学科、呼吸科以及神经外科等,并对多种抗菌药物耐药;临床治疗应根据药敏试验结果选择较敏感的抗菌药物,头孢哌酮/舒巴坦可作为临床治疗金黄杆菌属细菌感染的首选抗菌药物。

金黄杆菌属检出aac(6′)-Ⅱ和ant(2″)-Ⅰ耐药基因研究

目的研究金黄杆菌属临床分离株6种氨基糖苷类耐药机制。方法应用法国生物梅里埃公司的API鉴定条/PSE5.0药敏条进行细菌鉴定和药敏试验,应用PCR法检测两株金黄杆菌属临床分离株6种氨基糖苷类修饰酶基因(AMEs)耐药基因,并对PCR阳性产物测序和同源性分析。结果在两株临床分离菌株均检出2种AMEs基因(aac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ),同源性分析证实为2种AMEs基因,GenBank注册号分别为EU252512,EU252513,EU252514,EU252515;其他4种AMEs基因(aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、aac(3)-Ⅰ)均阴性。结论金黄杆菌属临床分离株存在AMEs基因,且为两种基因共存。

金黄杆菌致下呼吸道感染的病原学和临床研究

目的 探讨金黄杆菌属致下呼吸道感染的病原学和临床特征。方法 研究 5 2例金黄杆菌属致下呼吸道感染的临床资料 ,采用平板稀释法测定常用抗菌药物对该菌株的最低抑菌浓度 ,测定金黄杆菌对小鼠的半数致死量(LD50 )。结果 5 2例中 >6 0岁者 36例 ,全部病例均有基础疾病 ,主要为慢性阻塞性肺疾病、恶性肿瘤 ,38 5 %为混合感染 ,临床症状及X线表现缺乏特异性 ;药敏试验提示该菌耐药性广 ,头孢哌酮 /舒巴坦、氧氟沙星、环丙沙星、复方磺胺甲唑及哌拉西林为相对敏感抗菌药物 ;2 0株菌株的LD50 范围为 4 11× 10 6/～ 5 6 8× 10 8/小鼠 ,提示该菌属的毒力相对较弱。结论 金黄杆菌属毒力较弱 ,其所致下呼吸道感染多发生于有基础疾病、免疫力低下、长期使用抗菌药物的老龄患者 ,细菌耐药率高 ,临床表现缺乏特征性 。

产吲哚金黄杆菌耐药性及其携带MBL-INDuniv研究

目的了解2007-2010年41株产吲哚金黄杆菌(chryseobacterium indologenes)临床分布、耐药特征、产金属酶及其携带MBL-INDuniv的情况。方法 K-B法检测41株产吲哚金黄杆菌对17种抗菌药物的敏感性。三纸片增效法进行金属β-内酰胺酶(metallo-beta-laetamase,MBL)简称金属酶表型检测,通过聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)筛查MBL-INDuniv基因的分布情况。结果 41株产吲哚金黄杆菌多来自呼吸科和ICU病房,最常见为呼吸道标本,占53.6%,对头孢他啶、氨曲南耐药率均为100%,亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为为90.9%、87.8%,对常用抗阳性球菌药物如万古霉素、克林霉素耐药率在70%以下,米诺环素100%敏感。表型检测MBL菌株32株,MBL产酶率78.0%。PCR IND-univ通用引物扩增出18株阳性占43.9%。结论本地区的产吲哚金黄杆菌具有极强的耐药性和很高的MBL检出率,且MBL以IND基因型为主,应进一步密切关注该菌的传播及流行情况。

下呼吸道脑膜脓毒金黄杆菌医院感染相关因素和耐药性分析

目的分析下呼吸道脑膜脓毒金黄杆菌医院感染特点和分离菌的药敏性,为今后防治该菌所致的院内感染提供一定的资料。方法对我院2003-01～2006-10出现的37例膜脓毒金黄杆菌下呼吸道感染患者的临床、痰细菌培养及药敏试验进行回顾性分析。结果37例患者中60岁以上的老年患者占62.16%,所有患者均有2种以上原发病,从住院到检出菌的平均天数为30.8d。长期使用广谱抗生素、激素治疗,医院的一些侵袭性治疗如人工气道、机械通气以及治疗仪器鼻导管吸氧、雾化吸入治疗大大增加了被感染的几率;脑膜脓毒金黄杆菌对绝大多数抗生素耐药,仅对磺胺、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林较为敏感。结论下呼吸道膜脓毒金黄杆菌常发生在年老体弱、免疫力低下的患者。缩短住院时间、减少有创操作、严格消毒管理、合理应用抗菌药物是减少感染发生的重要措施;应根据药敏试验结果选择敏感抗生素治疗。

医院感染脑膜炎败血性金黄杆菌的分布及耐药性分析

目的了解我院脑膜炎败血性金黄杆菌的分布和耐药性。方法统计分析我院近5年来分离的73株脑膜炎败血性金黄杆菌的耐药情况;用双纸片协同试验筛选金属β-内酰胺酶。结果脑膜炎败血性金黄杆菌产金属β-内酰胺酶为37.0%,主要分布在重症监护(ICU)病房,哌拉西林/他唑巴坦、万古霉素和利福平耐药率较低,分别为45.2%、40.6%和28.5%。结论脑膜炎败血性金黄杆菌表现为多重耐药,临床医师应根据药敏试验合理选择抗菌药物。

1株金黄杆菌的分离鉴定及其对DBP的降解特性

从某垃圾处理厂的垃圾渗滤液中分离出1株能以邻苯二甲酸二丁酯(DBP)为唯一碳源和能源生长的菌株YB-2。通过形态特征、生理生化以及16S r DNA序列分析,初步鉴定YB-2为金黄杆菌属(Chryseobacterium sp.)。对菌株YB-2的生长及其对DBP的降解特性进行了研究。结果表明,菌株生长的适宜p H和温度条件分别为7.0~8.0和25~35℃,能够耐受的最高DBP浓度为1 600 mg/L。在p H为7.0、温度为30℃、菌种投加量为10%的条件下,初始浓度为400 mg/L的DBP经5 d降解后,去除率可达58.5%。YB-2具有较宽的降解谱,对DMP、DEP、DEHP和DNOP的降解效率分别达82.0%、79.7%、50.2%和42.6%。该菌株在对含邻苯二甲酸酯废水处理和邻苯二甲酸酯污染水体的生物修复方面具有良好的应用前景。

脑膜炎败血黄杆菌医院感染的分布及耐药性监测

目的:了解我院脑膜炎败血黄杆菌医院感染的分布及耐性药变迁。方法:2003-2007年我院分离到的脑膜炎败血黄杆菌共210株,采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定,药敏试验采用Kirby-Bauer法。结果:脑膜炎败血黄杆菌主要分布在重症监护病房,主要引起呼吸道感染,对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率最低仅7.14%,其次为哌拉西林,耐药率为35.2%,其他抗菌药物耐药率均>70%。5年耐药监测结果,从2004-2007脑膜炎败血黄杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、哌拉西林、环丙沙星的耐药率逐年上升,对头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦和头孢哌酮的耐药率,分别由2003年的38.5%、0和23.1%上升到2007年的75.8%、86.9%和92.9%,其他抗菌药物耐药率变化不大。结论:脑膜败血黄杆菌是一种高度耐药的细菌,哌拉西林/他唑巴坦是治疗该类细菌感染的首选抗菌药。

一株苯胺降解菌的分离鉴定及其降解特性

为研究苯胺污染的生物控制,通过驯化培养,从南京化工厂污水处理厂的活性污泥中分离出一株高效苯胺降解菌——菌株AN4。生理生化试验鉴定菌株AN4为金黄杆菌属(Chryseobacterium sp.)。菌株AN4利用苯胺生长和降解苯胺的最适温度为30℃、pH为7.0,它可在苯胺质量浓度低于3000mg/L的无机盐固体培养基上生长。菌株AN4除可降解苯胺外,还可以苯酚、苯甲酸、硝基苯、甲苯、萘、氯苯、二甲苯作为唯一碳源生长,蛋白胨可加速其对苯胺的代谢。代谢机制研究证实,菌株AN4在邻苯二酚1,2-双加氧酶作用下经邻位裂解途径降解苯胺。

蛋白质谷氨酰胺酶产生菌的分离筛选和鉴定

[目的]筛选出能够产生蛋白质谷氨酰胺酶(Protein-glutaminase,PG)的菌株,并对筛选出的菌株分类和鉴定。[方法]以carboxybenzoxy(Cbz)-Gln-Gly为唯一氮源,从来自全国各地采集到的726份土样中富集筛选能够产生蛋白质谷氨酰胺酶的菌株,分别从形态学、生理学和分子生物学方面对所筛选的菌株进行分类鉴定,并测定发酵上清的脱酰胺活性。[结果]共筛选到9株产PG酶的细菌,经鉴定,其中7株为产吲哚金黄杆菌(Chryseobacterium indologenes),一株为解朊金黄杆菌(Chryseobacterium proteolyticum),另外一株为粘金黄杆菌(Chryseobacterium.gleum)。[结论]分别发酵测定9株菌的PG酶活性,产吲哚金黄杆菌ZYF120413-7发酵酶活最高,为0.7168U/m L。粘金黄杆菌D4-1-1的产酶能力最低,其酶活为0.1029U/m L。本课题的研究成果扩大了PG酶产生菌株的来源,为后续研究打下了基础。

烟嘧磺隆降解菌Chryseobacterium sp.LAM-M5的分离、鉴定及其降解机理研究

为获得更丰富的烟嘧磺隆降解菌资源,以合肥某烟嘧磺隆生产厂活性污泥为研究对象,从中分离并筛选得到一株能以葡萄糖为唯一碳源、烟嘧磺隆为唯一氮源生长的菌株,根据其表型特征、16S rRNA序列相似性、DNA-DNA杂交值(DDH)和平均核苷酸一致性(ANI)的分析结果,将其鉴定为Chryseobacterium lacus LAM-M5。该菌株可在7 d内将初始浓度为50 mg/L的烟嘧磺隆降解92.39%。利用液相色谱-质谱联用(LC-MS)对菌株LAM-M5与烟嘧磺隆混合培养后的代谢产物进行检测与鉴定,共有5种主要物质被检测到,根据烟嘧磺隆的化学结构式和中间代谢产物特征,初步推测出菌株Chryseobacterium sp.LAM-M5降解烟嘧磺隆的可能降解途径。利用高效液相色谱(HPLC)对接菌后降解体系内代谢产生的酸类物质进行分离与鉴定,结果表明产物主要为L-苹果酸。推测菌株LAM-M5受高浓度烟嘧磺隆胁迫,利用葡萄糖产生L-苹果酸,通过降低环境 pH使烟嘧磺隆发生水解,从而解除其胁迫。通过对菌株全基因组信息进行分析,预测了7种可能与烟嘧磺隆降解相关的基因。结果表明,菌株LAM-M5 具有较强的烟嘧磺隆降解能力,在烟嘧磺隆污染环境的生物修复上具有较好的应用潜力。

甾醇酯酶菌株Chryseobacterium sp.的筛选及酶学性质研究

设计了一种以植物甾醇酯为底物,罗丹明B为荧光指示剂的平板筛选方法,从土壤中筛选得到24株具有甾醇酯酶活性的菌株,其中编号为jxpLT的菌株具有最高产酶活性,经16S rDNA鉴定表明菌株jxpLT属于金黄杆菌属,命名为Chryseobacterium sp.jxpLT。在优化的产酶条件下,菌株jxpLT培养18 h产酶活性最高可达到0.194 IU/mL。初步纯化了Chryseobacteri-um sp.jxpLT的甾醇酯酶并研究其部分酶学性质,该酶的酶促反应最适温度为40℃,最适pH值为7.5,其在45℃以下,pH值5.0～9.0具有较好的稳定性。该酶对不同碳链长度的脂肪酸胆固醇酯和对硝基苯酚酯具有广泛的底物特异性,显示该甾醇酯酶具有解决机械制浆造纸工艺中树脂障碍问题的潜力。