万古霉素联合用药降低对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的研究

目的体外研究万古霉素(vancomycin,VAN)分别与左氧氟沙星(levofloxacin,LVX)、利福平(rifampincin,RFP)、磷霉素(fosfomycin,FOM)联用对降低对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)的比较,为指导临床联合应用抗菌药物,制定新的用药策略,防止细菌耐药产生提供理论依据。方法采用肉汤富集1010CFU/mL金黄色葡萄球菌ATCC29213,采用琼脂平板二倍稀释法测定单独用药的最低抑菌浓度(MIC),琼脂平板稀释法测定单独应用VAN以及与其他三种药物联用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC。并计算出各药单独应用的MSW(MPC/MIC)。结果 VAN、LVX、RFP、FOM单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC分别为1,0.125,0.008和2μg/mL;MPC分别为64,2,>32,64μg/mL,MSW为64,6,>4000,32。联合用药后各药的MPC(μg/mL)降低程度如下:VAN+LVX(MPCNVA–4,MPCLVX–0.125),VAN+RFP(MPCNVA–4,MPCRFP–0.008),VAN+FOM(MPCNVA-1,MPCFOM-2)。联合LVX和RFP可使VAN的MPC降至原来的1/16倍,联合FOM可使VAN的MPC降至原来的1/64倍。结论 VAN与另三种药物联用,可以明显降低各自单独用药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC,其中联合FOM降低其MPC幅度最大,缩小其MSW效果最好。

万古霉素单用及联合利福平或磷霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的研究

目的在体外探讨万古霉素单用及其分别与利福平、磷霉素联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)防耐药突变浓度的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法应用肉汤法富集浓度为1010 CFU.ml-1细菌,琼脂平板倍比稀释法测定上述抗菌药物单用及联合使用对10株MRSA临床分离株的防耐药突变浓度,并计算相应的选择指数和耐药频率。结果万古霉素单用对上述10株MRSA的选择指数为16～64;分别与利福平、磷霉素联合使用选择指数下降为2～16和1～8,联合用药较单独用药选择指数下降2～32倍,其耐药频率也大幅下降。结论万古霉素分别与利福平、磷霉素联合使用均可降低其单用对MRSA的防耐药突变浓度,缩小耐药突变选择窗,防止耐药突变菌的产生。

左氧沙星单用及与磷霉素联用对金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度研究

目的左氧沙星(喹诺酮类抗菌药)单用及其与磷霉素(抗生素)联用对金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度(MPC)的变化。方法采用琼脂二倍稀释法,测定左氧沙星、磷霉素单用及联用时,对10株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)和10株甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的最低抑菌浓度(MIC)和MPC,计算耐药突变频率和选择指数(SI=MPC/MIC)。结果左氧沙星单用,对10株MSSA和10株MRSA的SI分别是4～64,4～16;而其与磷霉素联用对2种菌的SI分别是2～8,1～8。联用后,SI下降到单用药物的1/2～1/8。结论对金黄色葡萄球菌联用较单用可缩小突变选择窗(MSW),减少耐药菌产生。菌;

利奈唑胺、万古霉素对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌的防耐药突变体选择浓度的研究

目的:比较利奈唑胺、万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的防耐药突变选择能力;研究防耐药突变体选择浓度(MPC)和最低抑菌浓度(MIC)的相关性。方法:采用琼脂微量稀释法测定利奈唑胺、万古霉素对35株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离菌株的MPC和MIC;采用线性回归法比较利奈唑胺、万古霉素对MRSA的MPC和MIC的相关性;结合人体药代动力学数据,预测利奈唑胺、万古霉素对MRSA的防耐药突变体选择能力。结果:利奈唑胺、万古霉素对35株MRSA的MPC90值(抑制90%的细菌发生细菌耐药的最低防耐药突变体选择浓度)分别为16、8μg/mL,选择指数(MPC90/MIC90)均为8。两药对MRSA的MPC和MIC的线性相关系数R2分别为0.32和0.008。结合两药药代动力学参数,利奈唑胺药物浓度在整个给药间隔落在耐药突变选择窗理论(MSW)中,万古霉素药物浓度在大部分给药间隔落在MPC之上。结论:万古霉素对MRSA的防耐药选择能力强于利奈唑胺;MPC和MIC的相关性差。

罗红霉素和阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度的研究

目的:测定罗红霉素和阿奇霉素对金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度(MPC),扩增突变选择窗内筛选的耐药突变体的耐药基因.以了解金黄色葡萄球菌对大环内酯类药物耐药的发生机制.方法:肉汤法富集1013CFU/LATCC29213,采用平板二倍稀释法测定罗红霉素和阿奇霉素对ATCC29213的MIC,MIC99、初测MPC(Provisional MPC,MPCpr)以及MPC.PCR法扩增不同药物筛选出的耐药突变株的耐药基因ermA,ermB和ermC并测序.结果:罗红霉素和阿奇霉素对ATCC29213的MPC分别是0.24mg/L和0.18mg/L,细菌耐药选择指数(MPC/MIC99)是106和114.不同药物筛选出的耐药突变株中扩增出ermA和ermC基因.结论:单独使用罗红霉素和阿奇霉素,金黄色葡萄球菌易产生耐药突变株,应与其他抗菌药物联合.

金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度测定方法的影响因素分析

目的:对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)测定中常见的影响因素进行分析,为规范MPC测定方法提供参考。方法:金黄色葡萄球菌ATCC25923为测试菌株,左氧氟沙星为测定药品,考察在3种MH琼脂、3种涂布方式及2种不同方法制得的浓缩菌液的试验条件下菌落培养状况及MPC测定结果。结果:仅1种MH琼脂可用于MPC测定,采用L型玻棒涂布更适宜于菌落的培养,2种方法制得的浓缩菌液MPC测定结果相同。结论:MPC测定方法的影响因素较多,有必要进行规范。

喹诺酮药物对环丙沙星敏感金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度

目的测定4种喹诺酮药物对临床标本中对环丙沙星敏感金葡菌的MIC和防耐药突变浓度(mutant prevention con-centration,MPC)。方法采用琼脂稀释法检测加替沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星和环丙沙星对20株环丙沙星敏感金葡菌MPC90、MPC90/MIC90、结果加替沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星和环丙沙星MPC90、MPC90/MIC90分别为1.2、9.2;4.0、16;4.0、16和8、16mg/L。MIC与MPC存在不一致性。少数菌能在MPC浓度下存活,但没有MIC改变。结论加替沙星较其他喹诺酮药物限制选择富集耐药突变株能力更强,不能从MIC推测MPC。

环丙沙星联合多西环素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的影响

目的探讨环丙沙星联用多西环素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)值的影响,为防止产生细菌耐药提供依据。方法应用肉汤法富集浓度为1010CFU/ml金黄色葡萄球菌ATCC29213菌株,采用琼脂平板二倍稀释法测定环丙沙星、多西环素单药以及2药以不同浓度联用时对金黄色葡萄球菌ATCC29213的防耐药突变浓度(MPC)和耐药突变选择窗(MSW)。结果环丙沙星、多西环素单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC分别为3.00和20.16μg/ml,MSW分别为10和84。在联用多西环素浓度由0.12μg/ml至15.36μg/ml时,环丙沙星对ATCC29213的MPC由3.00μg/ml下降至0.30μg/ml。在联用环丙沙星浓度由0.30μg/ml至2.60μg/ml时,多西环素对ATCC29213的MPC由15.36μg/ml下降至0.24μg/ml。结论多西环素和环丙沙星联合用药可使各自单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC下降,MSW减小。

万古霉素联合用药降低对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的临床分析

目的探究万古霉素联合用药对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)的降低效果,进而为临床抗生素药物的合理使用提供依据。方法按照标准培养金黄色葡萄球菌,然后分别单独采用万古霉素(VAN)、利福平(RFP)、左氧氟沙星(LVX)以及磷霉素(FOM),测定对应的最低抑菌浓度(MIC),采用VAN与RFP、LVX、FPM联合用药,再次测定MIC,回顾分析上述相关资料。结果万古霉素联合用药相对于单一用药能够降低金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(P<0.05),有统计学意义。结论万古霉素联合用药相对于单一抗生素使用,能够降低金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度,其中万古霉素联合磷霉素对应的降低效果最好,能够有效的减少金黄色葡萄球菌耐药突变,保证治疗效果。

几种抗菌药物在不同浓度时对金黄色葡萄球菌耐药突变株选择的影响

目的:了解左氧氟沙星、万古霉素、利福平、氯霉素、妥布霉素、阿齐霉素在不同浓度时对金黄色葡萄球菌ATCC29213耐药突变株选择的影响。将它们对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)、防耐药变异浓度(MPC)、突变选择窗(MSW)与药代动力学参数结合,为制定新的抗菌药物用药策略提供依据。方法:应用肉汤富集细菌法测定左氧氟沙星、万古霉素、利福平、氯霉素、妥布霉素、阿齐霉素对金黄色葡萄球菌ATCC29213的防MPC;琼脂平板二倍稀释法测定MIC;将金黄色葡萄球菌ATCC29213接种于不同药物浓度的琼脂平板上,计数平板上恢复生长的菌落数,描记细菌恢复生长曲线。结果:左氧氟沙星、万古霉素、利福平、阿奇霉素、氯霉素和妥布霉素对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC分别为0.125、1.0、0.002、0.5、3.0、0.5μg/mL;MPC分别为1.4、51.2、>1024、4.8、16、16μg/mL;6种抗菌药物-金黄色葡萄球菌ATCC29213组合的MSW差异很大,以利福平的MSW最宽(SI:>512000),氯霉素的MSW最窄(SI:5.3)。不同抗菌药物-金黄色葡萄球菌的菌落恢复生长曲线各不相同。结论:药物浓度对金黄色葡萄球菌恢复生长的耐药突变株菌落数有明显影响。在临床上,可以通过将MPC结合药代动力学参数,来选择药物浓度和用药方式,从而达到减少细菌耐药的目的。

氟喹诺酮类药物对临床分离金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度

目的测定氟喹诺酮类(FQ)药物对金黄色葡萄球菌临床分离菌的防耐药变异浓度(mutant preventionconcentration,MPC)。方法肉汤法富集1010CFU/ml金黄色葡萄球菌临床分离菌54 株,采用琼脂平板稀释法分别测定莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌的MIC及MPC,并计算MIC90、MPC90。结果莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星和环丙沙星对42株环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌临床分离菌的MPC90值,分别为0.5μg/ml、0.5μg/ml、4μg/ml 和8μg/ml,细菌耐药选择指数(MPC90/MIC90比值)分别为4、4、16 和16;对12株环丙沙星耐药而莫西沙星和加替沙星敏感的金黄色葡萄球菌临床分离菌,莫西沙星和加替沙星的MPC90值均为16μg/ml,MPC90/MIC90比值均为8。结论对环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌,莫西沙星和加替沙星限制耐药突变株选择的能力优于帕珠沙星和环丙沙星;结合药代动力学参数,莫西沙星和加替沙星单药能有效限制耐药突变株的选择,而环丙沙星则容易选择出耐药突变株;而对环丙沙星耐药但莫西沙星和加替沙星敏感的金黄色葡萄球菌,莫西沙星和加替沙星单药则不能限制耐药突变株的选择。

氟喹诺酮药物浓度对金黄色葡萄球菌耐药突变株选择的影响

目的了解氟喹诺酮药物浓度对金葡菌耐药突变株选择的影响。方法将金葡菌ATCC 25923接种于不同浓度环丙沙星及加替沙星琼脂平皿上,根据不同药物浓度平皿上生长的菌落数．计算菌落生长比例。对不同药物浓度筛选出的耐药突变株进行编码拓扑异构酶ⅣC亚单位基因par C(grl A)和促旋酶A亚单位基因gyr A喹诺酮耐药决定区的PCR扩增和测序,并测定外排泵抑制剂利血平对环丙沙星和加替沙星MIC的影响。结果药物浓度对平皿中生长的菌落数有明显影响。环丙沙星在低、中浓度主要选择出主动外排泵介导的非靶位耐药突变株,高浓度选择出Grl A变异的耐药突变株,以Ser-80→Phe为主。加替沙星低浓度选择出非靶位及靶位变异菌株,而中、高浓度均选择出Grl A变异株,也以Ser-80→Phe为主。结论氟喹诺酮药物浓度对金葡菌耐药突变株菌落数以及耐药位点的选择都有明显影响。

夫西地酸联合黄芩素对金黄色葡萄球菌的体内外抗菌作用研究

目的研究夫西地酸(fusidic acid,FA)联合黄芩素(baicalein,BE)在体内和体外对13株金黄色葡萄球菌的抗菌特性。方法采用微量肉汤稀释法和微量棋盘法测定最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)。采用FICI评价综合效果,采用时间-杀菌曲线法测定杀菌效果。利用琼脂二倍稀释法对5株金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度(mutant prevention concentration,MPC)和防耐药突变选择窗(mutant selective window,MSW)进行测定,比较夫西地酸单独应用及联用黄芩素后防耐药突变窗的变化。使用金黄色葡萄球菌感染肺炎小鼠模型进行体内实验,测定FA和BE单独和联合治疗后生命体征、肺脏指数、菌落定植数和血清炎症因子的变化。结果研究发现,FA与BE组合的协同效应为53.8%,相加效应为30.8%,无关效应为15.4%。此外,研究人员观察到,当FA与BE以特定浓度(分别为1MIC和1/2MIC)结合时,在24h后对3株金黄色葡萄球菌(SA-ATCC29213、MRSA-ATCC43300和MRSA-210702212)均有杀菌作用。FA对这些菌株的MPCs为128~256μg/mL,而MSWs为64~256μg/mL。而当BE加入混合物时,菌株的MPCs降低到16~32μg/mL,MSWs降低了8~16倍,说明BE提高了FA对这些菌株的抗菌活性。FA和BE的组合对金黄色葡萄球菌肺炎小鼠的生命体征影响很小。小鼠肺脏指数、肺部金黄色葡萄球菌定植数、血清中炎症因子等实验结果表明,FA和BE组合对金黄色葡萄球菌的影响很小,但联合用药组对小鼠肺炎的治疗效果明显优于单药组。结论FA单独应用时,MSW较宽,联用BE后,FA的MSW明显缩小。FA联合BE有协同杀菌效应,治疗小鼠金葡菌肺炎效果较单药组好。

比较6种氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度

目的比较6种氟喹诺酮类药物对临床分离金黄色葡萄球菌耐药突变体的选择能力。方法用呼吸道标本,选择对苯唑西林、环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌36株,采用标准琼脂二倍稀释法、标准琼脂平板稀释法,测定6种氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌的MIC、MPC。结果 MPC值比较,莫西沙星最低;而环丙沙星最高。选择指数(MPC90/MIC90)较低有如下4种:莫西沙星、卡屈沙星、加替沙星和帕珠沙星,均为2。6种药物MPC90值与其体内药动学参数比较,莫西沙星和卡屈沙星小于其Cmax。结论莫西沙星、卡屈沙星和加替沙星对金葡菌的MPC值较低,突变选择窗范围相对较窄。

氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌及其耐药突变体的耐药性研究

目的：研究5种氟喹诺酮类药物（FQ）对金黄色葡萄球菌ATCC29213及其同源耐药突变体的最低抑菌浓度（MIC）、防细菌耐药突变体选择浓度（MPC）和突变选择窗（MSW），比较其防耐药变异能力，了解细菌对FQ耐药的发生发展过程。方法：肉汤法富集10^10CFU·ml^-1金黄色葡萄球菌ATCC29213，采用平板稀释法测定莫西沙星、加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌ATCC29213及筛选的耐药突变体的MIC、暂定MPC（MPCpr）和MPC。结果：莫西沙星、加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌ATC29213的MPC分别为0．2、0．3、0．3、1．4、3．2μg·ml^-1。选择指数（MPC／MIC）分别为6．5、4．8、9．7、11．2、12．8。5种氟喹诺酮类药物筛选的第一步突变体对筛选药物的MIC较ATCC29213升高2～8倍。左氧氟沙星筛选的第二步突变体的MIC较第一步突变体又升高8～16倍。所有突变体的MSW边界都较其源菌株明显升高。结论：莫西沙星、加替沙星限制金黄色葡萄球菌耐药突变菌体选择的能力强于司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星。金黄色葡萄球菌对FQ药物产生耐药是逐步发生的。第一步耐药突变体的产生，使筛选出下一步耐药突变体的几率明显增大，从而导致耐药菌的富集和扩散。

左氧氟沙星联合万古霉素缩小金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的初步研究

目的:在体外初步探讨联合用药可缩小单药对细菌的耐药突变选择窗(MSW),为临床合理使用现有抗菌药物,防止细菌耐药产生提供理论依据。方法:应用肉汤法富集1010CFU/mL细菌,琼脂平板二倍稀释法测定左氧氟沙星、万古霉素单药和两药联用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的最低药物浓度(MPC)和MSW。结果:左氧氟沙星、万古霉素单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW分别为16和64。万古霉素和左氧氟沙星联合用药(1MIC+8MIC,2MIC+4MIC)使左氧氟沙星单药对ATCC29213的MSW缩小2～4倍。左氧氟沙星联合万古霉素用药(1MIC+16MIC,2MIC+8MIC)使万古霉素对ATCC29213的MSW缩小4～8倍。结论:万古霉素和左氧氟沙星联合用药可缩小各自单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW。

氟喹诺酮药物对金黄色葡萄球菌同源耐药突变株的耐药突变选择窗研究

目的通过测定不同氟喹诺酮(FQ)药物对同源金黄色葡萄球菌耐药突变株的MIC和防耐药突变浓度(mutant prevention concentration,M PC),分析不同药物的抗菌活性及限制耐药突变株选择的能力。方法分别采用环丙沙星和加替沙星琼脂平板筛选金黄色葡萄球菌ATCC25923同源的第一步和第二步耐药突变株。采用琼脂平板稀释法测定各耐药突变株的M IC和M PC,计算选择指数(MPCM/IC)。结果加替沙星和莫西沙星对金黄色葡萄球菌ATCC25923第一步耐药突变的M PC值(1～2μg/m l)明显低于环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星(4～16μg/ml),以上5种FQ药物对第一步耐药突变的M PC值和选择指数分别为ATCC25923的2～8倍和1～4倍。加替沙星和莫西沙星对第二步耐药突变的M PC值为8～16μgm/l。结论对于金黄色葡萄球菌ATCC25923同源的第一步耐药突变株,加替沙星和莫西沙星限制下一步耐药突变株选择的能力强于环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星,结合药动学参数,环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星很容易选择出下一步耐药突变株;而加替沙星和莫西沙星则能够限制下一步耐药突变株的选择。对于第二步耐药突变株,加替沙星和莫西沙星则很容易筛选出对这两种药物也耐药的菌株。临床上为延长加替沙星和莫西沙星的应用时间,对于已对左氧氟沙星耐药的菌株应避免应用加替沙星和莫西沙星单药治疗。

万古霉素最低抑菌浓度漂移对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌感染治疗效果的影响

目的了解万古霉素最低抑菌浓度(MIC)的变化与治疗甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)感染之间的关系。方法分析2007—2009年安徽省立医院微生物实验室MRSA的分离率及MRSA万古霉素的MIC值变化,并结合临床资料评价万古霉素MIC漂移对疗效的影响。结果 3年中我院MRSA在金葡菌中的比率逐渐增加。未发现万古霉素耐药株,但MIC≤0.5mg/L的菌株所占比率逐年下降,而MIC≥2.0 mg/L的比率逐年上升。MIC≤1 mg/L时,治愈率、临床有效率、细菌清除率分别为56.5%、87.0%和78.3%,MIC≥2 mg/L时,分别为44.0%、68.0%和64.0%,抗菌药物平均使用时间后者明显延长。结论 3年中我院MRSA在金葡菌中分离率增加,万古霉素MIC显著增高,但治愈率、临床有效率、细菌清除率仍无差异。

夫西地酸联合头孢类抗生素缩小金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的研究

目的:体外研究夫西地酸联合头孢类抗生素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的影响,为使用临床抗菌药物和防止细菌耐药现象提供指导和理论依据。方法:肉汤法富集浓度为1010cfu/m L的金黄色葡萄球菌ATCC29213,采用琼脂二倍稀释法测定夫西地酸单用及夫西地酸联用三种头孢类抗生素时的防耐药突变浓度(MPC)和防耐药突变选择窗(MSW)。结果:夫西地酸、头孢唑林、头孢丙烯、头孢曲松对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC分别是128、1、4、8 mg/L,MSW分别为128、4、8、4。夫西地酸联合头孢唑林后,MPC下降至32 mg/L;夫西地酸联合头孢丙烯后,MPC下降至8 mg/L;夫西地酸联合头孢曲松后,MPC下降至8 mg/L。结论:夫西地酸单独应用时,MSW较宽易产生耐药菌,与三种头孢类抗生素联合应用后夫西地酸的MSW可明显缩窄。

万古霉素单用及联合用药对耐甲氧西林表皮葡萄球菌的防突变浓度研究

目的在体外测定万古霉素单药及分别与利福平、左氧氟沙星、磷霉素联用对耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）的防突变浓度（MPC），为优化抗菌治疗提供理论依据。方法应用肉汤法富集浓度为10^10CFU／ml细菌，琼脂平板倍比稀释法测定上述各药单用及分别与万古霉素联用对10株临床分离MRSE的MPC，上述与万古霉素联用药物浓度为常规用药可以达到的血药浓度，均远低于各自对MRSE的MPC。结果万古霉素单药对上述10株MRSE的MPC为16或32mg／L；与利福平或左氧氟沙星联用时万古霉素的MPC为16或32mg／L，与磷霉素联用时万古霉素的MPC降为1～4mg／L。结论与磷霉素联用可以显著降低万古霉素对MRSE的MPC，从而减少耐药菌的产生。