金黄色葡萄球菌性肺炎

近年来,由于抗生素的不合理应用,金黄色葡萄球菌性肺炎(下称金葡菌肺炎)的发病率有升高趋势,而且多耐药菌株感染逐渐增加,此现象已引起临床的高度重视。 金葡菌可分泌多种毒素和酶,包括肠毒素、杀白细胞素、致红斑毒素、溶血毒素、表皮脱落毒素、透明质酸酶、纤维蛋白溶解酶、过氧化氢酶、凝固酶等,这些物质能保护细菌不被吞噬,且可使感染处血管痉挛、溶血,组织缺氧坏死,局部化脓和炎症扩散。金葡菌还可在抗生素诱导下产生多种β-内酰胺酶,水解多种抗生素使之失活,即产生耐药。

原儿茶酸对金黄色葡萄球菌性肺炎模型小鼠的保护作用及相关机制研究

目的研究原儿茶酸(PA)对金黄色葡萄球菌(SA)性肺炎模型小鼠的保护作用,并探讨其相关机制。方法动物实验:36只C57BL/6雌鼠随机分为对照组、SA模型组和原儿茶酸预处理组,每组12只,构建SA肺炎模型小鼠。细胞实验:RAW264.7细胞分组方法同前,构建体外巨噬细胞RAW264.7感染模型。二者均于模型构建前1h行PA预处理。采用HE检测各组小鼠肺组织病理变化,Western Blot检测RAW264.7细胞P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和磷酸化(p)-P38MAPK、胞外信号调节激酶(ERK MAPK)和p-ERK MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK MAPK)和p-JNK MAPK、核转录因子-κB P65(P65)和p-P65蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达水平。结果动物实验:与模型组比较,PA预处理可减轻SA肺炎,减轻肺组织病理改变,显著降低肺组织和肺泡灌洗液TNF-α和IL-6表达水平(P均<0.05)。细胞实验:与模型组比较,PA预处理可显著降低细胞上清液和细胞TNF-α和IL-6表达水平(P均<0.05),并且抑制P65蛋白的活化,但对其它MAPK相关蛋白表达无影响。结论原儿茶酸对SA肺炎模型小鼠具有保护作用,作用机制可能与抑制P65炎症信号通路的活化、降低TNF-α、IL-6表达有关。

16例金黄色葡萄球菌性肺炎临床及影像学表现分析

目的:回顾性分析金黄色葡萄球菌性肺炎临床表现、X线平片及CT表现,提高影像诊断水平。方法:对吉林省梅河口市友谊医院自1998年以来,经临床检验行细菌培养证实的16例金黄色葡萄球菌性肺炎的X线平片及CT表现进行归纳分析。结果:金黄色葡萄球菌性肺炎的典型X线平片及CT表现单一时诊断困难,多种表现同时存在,并发生明显变化时诊断容易。结论:X线平片和胸部CT检查可相互补充诊断依据,对临床研究具有重要的诊断意义。

金黄色葡萄球菌性肺炎15例X线及CT表现

目的分析金黄色葡萄球菌性肺炎的X线、CT表现,探讨X线、CT在早期金黄色葡萄球菌性肺炎诊断中的作用。方法回顾分析15例经痰培养、血培养及临床症状证实的金黄色葡萄球菌性肺炎患者的影像学资料并进行总结。15例患者均行常规X线正侧位摄片及CT平扫。结果 15例患者中X线平片表现炎性浸润14例;表现蜂窝状、空洞、肺气囊影12例;脓胸、气胸3例;球形病灶2例。15例中CT表现都有片状肺部浸润,以两肺下叶明显,大部分分布于胸膜下。部分病例合并空洞、肺气囊影,以肺气囊影为主。结论金黄色葡萄球菌性肺炎早期诊断要结合临床症状及X线、CT表现综合分析。

综合体位护理在金黄色葡萄球菌性肺炎患儿中的应用效果

目的探究综合体位护理对金黄色葡萄球菌性肺炎患儿症状改善情况、血气分析指标及生命体征变化的影响。方法回顾性分析2020年2月至2021年7月德州市立医院收治的150例金黄色葡萄球菌性肺炎患儿的临床资料,按照护理方式的不同划分为对照组和观察组,每组75例。对照组采用常规综合性护理,观察组在此基础上采用综合体位护理。比较2组的症状改善情况、血气分析指标和生命体征变化。结果相比于对照组,观察组的发热消退时间、咳嗽咳痰消失时间、气促消失时间和心率恢复时间均更早,住院时间更短(P均<0.05)。相比于入院时,2组在出院时的动脉血氧分压(PaO_(2))、血氧饱和度(SpO_(2))均升高,动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))均降低;2组在出院时的心率(HR)、呼吸频率(RR)均减慢,收缩压(SBP)、舒张压(DBP)均降低;相比于对照组,观察组的各项指标变化均更优,上述比较结果均有统计学差异(P均<0.05)。结论在金黄色葡萄球菌性肺炎患儿护理中应用综合体位护理,有助于改善其血气分析指标,缓解其临床相关症状,维持生命体征稳定,加快康复进程。

新疆阿克苏地区羊源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定及毒力基因与耐药性分析

近年来在家畜体内及动物性食品中多次检测到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),该菌对人和动物健康造成严重威胁。为了解新疆阿克苏地区患呼吸道疾病羊携带的病原菌,本研究从阿克苏6个规模化羊场共采集280份(136份病羊和144份健康羊)鼻拭子样品,分别划线接种于BHI脱纤维绵羊血平板和高盐甘露醇琼脂平板,并对分离菌经革兰氏染色镜检和生化鉴定。结果显示,初步从136份病羊和144份健康羊鼻拭子样品中分别分离到34株及62株共计96株金黄色葡萄球菌(SA)。通过PCR分别扩增SA的nuc基因及MRSA的mecA基因,结果进一步显示分离到96株SA,其中24株(25%)为MRSA,且均为从患病羊中分离。通过PCR检测MRSA的6种常见毒力基因。结果显示,24株MRSA中clfa、hla及pvl的检出率均为100.0%,tst、fnb B和sec的检出率分别为41.2%(10/24)、45.7%(11/24)和33.6%(8/24)。将24株MRSA分别以10^(4)cfu/mL~10^(8)cfu/mL感染小鼠,通过观察各组小鼠的临床症状统计死亡率,观察死亡小鼠脏器的剖检病变,并再次从组织中分离细菌,以评估分离的MRSA对小鼠的致病性。结果显示,感染8 h后各组小鼠开始出现临床症状,10^(8)cfu/mL和10^(7)cfu/mL感染组小鼠在感染后不同时间全部死亡;10^(6)cfu/mL~10^(4)cfu/mL感染组小鼠的死亡率分别为83.3%、83.3%及33.3%;对照组小鼠72 h内全部健活。剖检可见死亡小鼠肺脏表面大面积出血,肝脏、脾脏肿大,其余脏器未见明显变化,可从死亡小鼠的肺脏中再次分离到MRSA。最终确定22株MRSA对小鼠具有致病性。采用K-B纸片法检测24株MRSA对9类15种药物的敏感性,采用PCR检测24株MRSA的耐药基因mecC、blaZ(β-内酰胺类)、ermA(大环内酯类)、Aac(6')/aph(2'')、aph(3')-Ⅲ、Ant(4')-Ia(氨基糖苷类)、qnr A(喹诺酮类)和tetM(四环素类)。药敏试验结果显示,24株MRSA对β-内酰胺类的青霉素及氨曲南,头孢菌素类的氨苄西林全部耐药,其中14株MRSA为多重耐药(58.3%,14/24),主要以3重耐药菌株为主,占42.8%(6/14),其次分别为4重耐药(28.6%,4/14)、5重耐药和6重耐药(均为14.3%,2/14)的菌株。但也有部分菌株对四环素、红霉素、克林霉素和环丙沙星敏感。耐药基因检测结果显示,24株MRSA中检测到6种耐药基因,其中mecC、blaZ的检出率达100%;tetM的检出率为79.2%(19/24);ermA的检出率为37.5%(9/24);Aac(6')/aph(2'')、aph(3')-Ⅲ、Ant(4')-Ia的检出率均为25.0%(6/24),且这些MRSA携带3~6种耐药基因。通过实验结果分析24株MRSA的耐药表型与耐药基因之间均呈正相关,且未检测到喹诺酮类耐药基因qnr A,与MRSA对该类药物环丙沙星敏感的结果也一致。本研究在新疆阿克苏地区患呼吸道疾病的羊中分离的MRSA携带多种毒力基因,对小鼠的致病性均较强,且对多种药物耐药并携带多种耐药基因,可能与羊患呼吸道疾病有关。本研究为新疆阿克苏地区羊呼吸道疾病病原学的研究和临床用药提供参考。

1株马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌致病性分析

国内鲜有马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)相关报道,本研究对1株新疆马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌的致病性进行评估,以期为马乳源金黄色葡萄球菌的相关研究提供基础数据。使用选择性培养基从新疆健康马乳中分离金黄色葡萄球菌,然后通过生化鉴定和分子鉴定方法对金黄色葡萄球菌进行鉴定。对所获得的金黄色葡萄球菌进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、spa分型、药物敏感性检测、生物被膜形成能力、溶血活性、毒力基因检测、小鼠皮肤脓肿和致病性试验。再对分离株进行小鼠细胞的黏附、侵袭和胞内增殖试验,以评估其致病性。结果显示,从马乳中分离得到1株PVL+ST22型金黄色葡萄球菌(1/65,1.5%),spa分型为t304。仅对青霉素耐药,无生物被膜形成能力,但携带9种毒力基因(sec、seg、seh、tsst-1、hla、hlb、clfA、clfB和cna),并且具有溶血活性。小鼠皮肤脓肿和致病性试验表明,其可导致小鼠形成皮肤脓肿,并且在高剂量感染时可导致小鼠死亡。ST22型金黄色葡萄球菌可在小鼠巨噬细胞中黏附(4.26%)、侵袭(6.45%)和胞内增殖,并可造成细胞凋亡。综上,马乳源PVL+ST22型金黄色葡萄球菌具有较强的致病力,可能在宿主致病和公共卫生安全等方面存在隐患。

重症医学科耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因型和同源性分析

目的:了解贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者金黄色葡萄球菌耐药变迁情况,掌握耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的主要耐药基因和耐消毒剂基因,并对部分菌株作同源性分析。方法:回顾性分析贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者2018~2021年金黄色葡萄球菌耐药情况变迁情况,以相关性分析(pearson)统计学方法探讨细菌耐药性与抗菌药物用药频度(defined daily dose system,DDDs)二者的关系。以四年间重症医学科下呼吸道感染患者送检标本分离获得的40株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为研究对象,采用仪器法对试验菌株作鉴定及药敏,通过PCR技术作耐药基因(mecA、SCCmec、femB)和耐消毒剂基因(qacA/B)检测。应用多位点序列分型(MLST)法分析40株试验菌的同源性。结果:金黄色葡萄球菌每年的平均耐药率显示青霉素耐药率一直高于92%以上。四环素、克林霉素、复方新诺明耐药率在2019年有所下降后却又再次持续升高。红霉素、苯唑西林、左氧氟沙星、奎奴普丁/达福普丁的耐药率呈现逐年增长趋势。未发现对利奈唑胺、万古霉素和替加环素的耐药菌株。相关性分析提示青霉素耐药率与苯唑西林DDDs存在明显正相关(r=0.99,P<0.05),苯唑西林耐药率与红霉素DDDs存在明显负相关等,其他抗菌药物耐药率与各药物DDDs相关性无统计学意义。基因检测发现40株耐MRSA中mecA检出率为97.5%,SCCmec和femB基因未检出,qacA/B基因检出率为15%。MLST分型结果显示共分为7个序列型,其中以ST59型占比最高,为优势型别,占比42.5%,其次为ST45型,占25%,ST239型、ST28型、ST188型、ST1型和ST630型分别占12.5%、7.5%和5%、5%、2.5%。结论:重症医学科下呼吸道感染金黄色葡萄球菌耐药率逐年增加,可选择的抗生素有限。细菌耐药性的产生与药物使用频率有一定关系,携带mecA和qacA/B基因是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产生耐药的主要原因。MLST结果表明ICU病房存在科内克隆菌株。

新疆维吾尔自治区阿拉尔市某规模化养殖场猪乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其毒力、耐药性分析

[目的]分离鉴定新疆维吾尔自治区阿拉尔市猪乳源金黄色葡萄球菌,了解其致病性和耐药性。[方法]从阿拉尔市某规模化养殖场收集6份新鲜猪乳样本,采用甘露醇高盐琼脂(MSA)培养基分离乳样中的金黄色葡萄球菌,利用表型鉴定方法及细菌16S rDNA序列分析法对分离到的菌株进行鉴定,检测分离菌株的生物被膜形成能力,利用K-B纸片扩散法进行药物敏感性试验,利用PCR法检测毒力基因和耐药基因。[结果]经分离培养及分子生物学鉴定,从6份乳样中获得2株金黄色葡萄球菌,分离率为33.33%(2/6);2株金黄色葡萄球菌均具有强生物被膜形成能力(+++);2株金黄色葡萄球菌均对利福平敏感,均对青霉素、头孢西丁、四环素、红霉素、替米考星、克林霉素和磺胺甲噁唑耐药;在检测的5种耐药基因中,2株金黄色葡萄球菌均携带ant(4)基因和mecA基因;在检测的20种毒力基因中,共检测到6种毒力基因,其中,2株金黄色葡萄球菌均携带seg、sei、hlb、fnbA、clfA基因,有1株携带hla基因。[结论]该养殖场猪乳源金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力强,携带多种毒力基因和耐药基因,表现为多重耐药性。

金黄色葡萄球菌引起全身播散性感染1例

金黄色葡萄球菌普遍存在于医院感染和社区感染中,是脓毒症的常见致病菌之一,主要引起皮肤软组织多部位化脓性迁徙性感染以及危及生命的菌血症、感染性心内膜炎、致死性肺炎等。临床上感染金黄色葡萄球菌的患者常出现多脏器功能损伤,且病情危重、病死率高。本文介绍1例某院重症医学科收治的金黄色葡萄球菌引起全身播散性感染病例资料及诊疗过程。这类病例诊断困难,病情复杂,临床需综合考虑、全面评估并选择合适的治疗方案。

抗IL-20单抗7E在金黄色葡萄球菌肺炎小鼠中的抗炎和肺保护作用

目的研究抗IL-20单抗在金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)肺炎中的作用。方法小鼠随机分为对照组、模型组、抗IL-20单抗7E干预组(7E)和万古霉素阳性对照组(Vanc)。通过气管滴注法建立小鼠SA肺炎小鼠模型,干预组在造模后通过尾静脉注射给药。收集外周血,并对外周血中白细胞和中性粒细胞计数,ELISA法检测血清中CRP、IL-20、TNF-α、IL-6和IL-1β水平;HE染色观察肺组织病理形态变化(包括肺泡结构完整性、肺泡间隔厚度、炎症、坏死及炎性细胞浸润情况),免疫组织化学和Westernblot检测小鼠肺组织中TLR2、NF-κBp65、p-STAT3的表达。结果与对照组比较,模型组肺发生明显病理改变,而7E组和Vanc组肺组织病理形态明显改善,治疗第3天开始肺泡恢复,无明显炎性细胞浸润。治疗后第4 d,7E组和Vanc组外周血中白细胞和中性粒细胞计数、血清中IL-20、TNF-α、IL-6和IL-1β含量以及肺组织中TLR2、NF-κBp65、p-STAT3的表达均明显降低。结论抗IL-20单抗7E可能通过抗炎作用延缓SA的进展,其机制可能与抑制STAT3以及TLR2/NF-κB通路有关。

利奈唑胺不同用药方案治疗老年重症耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎的疗效和经济学分析

目的探讨利奈唑胺不同用药方案治疗老年重症耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)肺炎的疗效和经济学。方法选取2018年5月至2020年12月于庆阳市人民医院呼吸内科及重症医学科确诊的120例老年重症MRSA肺炎患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与实验组,每组60例。对照组予以利奈唑胺600 mg,每12 h静脉滴注1次;实验组每天上午9:00予以利奈唑胺600 mg静脉滴注,晚上9:00予以利奈唑胺片600mg口服。比较两组临床疗效、细菌清除率、不良反应发生情况及药物经济学。结果两组治疗总有效率和细菌清除总有效率比较差异无统计学意义。实验组治疗后血小板计数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组血小板减少症发生率比较差异无统计学意义。两组床位费、检查费、护理费、治疗费、其他药物费用比较差异无统计学意义;实验组利奈唑胺费用、处理不良反应相关费用和总治疗成本均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组与实验组临床有效率的成本-效果比(C/E)分别为126.22和110.14,增量*通信作者:方彩霞,E-mail:376040049@qq.com成本-效果比(ΔC/ΔE)为410.41,细菌清除率的C/E分别为135.92和116.74,ΔC/ΔE为614.39。敏感性分析结果显示药品及相关治疗费用变化对本研究结果影响不大。结论利奈唑胺针剂与片剂联用治疗老年重症MRSA肺炎的临床疗效与静脉滴注给药相当,但能显著减少血小板下降的发生,同时,更具有经济学优势。

仔猪源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解山东省乳山地区规模化猪场及散养户中仔猪源金黄色葡萄球菌流行情况、致病性及耐药性情况,于2021—2023年采集山东省乳山地区规模化猪场及散养户中患病仔猪的鼻拭子、关节液、肺脏及肝脏等病料组织141份,采用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定及PCR方法等进行金黄色葡萄球菌分离与鉴定,采用人工感染小鼠试验和K-B药敏纸片法分别检测金黄色葡萄球菌分离菌株的致病性和耐药性情况。结果显示:从141份病料样品中分离到89株金黄色葡萄球菌,分离率为63.1%(89/141),通过人工感染小鼠试验,60株金黄色葡萄球菌可以引起小鼠发病与死亡,被鉴定为致病性菌株;60株金黄色葡萄球菌对新霉素、氟苯尼考、大观霉素等9种药物耐药率在50%以上,对其他的药物耐药率为6.7%~28.3%。研究可为该地区仔猪源金黄色葡萄球菌合理用药及防控提供参考。

源自蜡样芽孢杆菌抗菌肽DB16的筛选及其对金黄色葡萄球菌的抑菌机制

本实验发现当与蜡样芽孢杆菌混合培养时,金黄色葡萄球菌的生长受到抑制。结合生物信息学方法从蜡样芽孢杆菌DeadBoxATP依赖性RNA解旋酶中预测、筛选得到抗菌肽DB16(RKLLQFAKKLGIVFTK)。抗菌肽DB16对金黄色葡萄球菌的最低抑菌质量浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为31.25μg/mL,可在0.5 h内完全抑制金黄色葡萄球菌的生长;抗菌肽DB16在磷酸盐缓冲溶液中呈现无规卷曲结构,在十二烷基硫酸钠环境中转变为α-螺旋结构。采用荧光探针、流式细胞术、透射电子显微镜、DNA凝胶电泳以及圆二色谱等方法探究抗菌肽DB16对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,结果表明,抗菌肽DB16能够改变细菌细胞膜通透性,造成细胞内容物外泄,同时进入胞内与金黄色葡萄球菌基因组DNA结合,影响正常DNA的复制,最终抑制菌体的生长繁殖。此外,对哺乳动物红细胞的处理表明,DB16在8×MIC条件下仍无溶血性。综上,源自蜡样芽孢杆菌的抗菌肽DB16在金黄色葡萄球菌防控方面具有很大应用潜力。

夫西地酸联合黄芩素对金黄色葡萄球菌的体内外抗菌作用研究

目的研究夫西地酸(fusidic acid,FA)联合黄芩素(baicalein,BE)在体内和体外对13株金黄色葡萄球菌的抗菌特性。方法采用微量肉汤稀释法和微量棋盘法测定最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)。采用FICI评价综合效果,采用时间-杀菌曲线法测定杀菌效果。利用琼脂二倍稀释法对5株金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度(mutant prevention concentration,MPC)和防耐药突变选择窗(mutant selective window,MSW)进行测定,比较夫西地酸单独应用及联用黄芩素后防耐药突变窗的变化。使用金黄色葡萄球菌感染肺炎小鼠模型进行体内实验,测定FA和BE单独和联合治疗后生命体征、肺脏指数、菌落定植数和血清炎症因子的变化。结果研究发现,FA与BE组合的协同效应为53.8%,相加效应为30.8%,无关效应为15.4%。此外,研究人员观察到,当FA与BE以特定浓度(分别为1MIC和1/2MIC)结合时,在24h后对3株金黄色葡萄球菌(SA-ATCC29213、MRSA-ATCC43300和MRSA-210702212)均有杀菌作用。FA对这些菌株的MPCs为128~256μg/mL,而MSWs为64~256μg/mL。而当BE加入混合物时,菌株的MPCs降低到16~32μg/mL,MSWs降低了8~16倍,说明BE提高了FA对这些菌株的抗菌活性。FA和BE的组合对金黄色葡萄球菌肺炎小鼠的生命体征影响很小。小鼠肺脏指数、肺部金黄色葡萄球菌定植数、血清中炎症因子等实验结果表明,FA和BE组合对金黄色葡萄球菌的影响很小,但联合用药组对小鼠肺炎的治疗效果明显优于单药组。结论FA单独应用时,MSW较宽,联用BE后,FA的MSW明显缩小。FA联合BE有协同杀菌效应,治疗小鼠金葡菌肺炎效果较单药组好。