金龟子绿僵菌小孢变种对筛胸梳爪叩甲幼虫致病力的生物测定

从筛胸梳爪叩甲Melanotus cribricollis僵死幼虫体内分离得到1株金龟子绿僵菌小孢变种Metarhizium anisopliae var.anisopliae菌株WP,首次采用拌土法对该菌寄生筛胸梳爪叩甲幼虫的致病力进行测定,并分析外界条件对绿僵菌致病力的影响。在WP菌株1×104~1×107孢子/g干土7个孢子浓度梯度下,随着浓度的提高,筛胸梳爪叩甲的校正死亡率从20%上升至100%。在15、20、25、30℃4个温度下,该菌对筛胸梳爪叩甲的致死率随着温度升高而上升。30℃时,筛胸梳爪叩甲死亡率达96.7%;当降至15℃,筛胸梳爪叩甲不会被寄生。在6%~18%土壤湿度条件下,土壤湿度的升高会提高WP菌株对筛胸梳爪叩甲的致死率,6%的土壤湿度不会导致该虫染病。

金龟子绿僵菌CQMa421和球孢白僵菌ZJU435对红火蚁毒力及聚硅氧烷的增效作用研究

为探索红火蚁Solenopsis invicta的生物防治方法,本文系统评估了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421和球孢白僵菌Beauveria bassiana ZJU435对红火蚁的毒力以及聚硅氧烷对其的增效作用,并评估了两株虫生真菌对红火蚁的田间防治效果。结果显示,以处理第10天时的死亡率计算,金龟子绿僵菌CQMa421对红火蚁工蚁的致死中浓度LC_(50)为9.16×106孢子/mL;以8×10^(8)孢子/mL的死亡率计算,其对红火蚁工蚁的致死中时LT_(50)为3.534 d。以处理第10天时的死亡率计算,球孢白僵菌ZJU435对红火蚁工蚁的致死中浓度LC_(50)为1.5×10^(5)孢子/mL;以1×10^(9)孢子/mL的死亡率计算,其对红火蚁工蚁的致死中时LT_(50)为0.218 d。混入0.5μL/mL及以上浓度的聚硅氧烷可显著提高低浓度金龟子绿僵菌CQMa421及球孢白僵菌ZJU435对红火蚁毒力。田间试验结果显示,混入0.5μL/mL聚硅氧烷的3.2×10^(7)孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421和4×10^(7)孢子/mL球孢白僵菌ZJU435对红火蚁的综合防效分别为83.99%和90.44%,低于商品制剂0.1%茚虫威饵剂的综合防效93.89%。研究结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421和球孢白僵菌ZJU435对红火蚁具有较高毒力,在红火蚁生物防治中具有较高开发潜力。

金龟子绿僵菌与化学农药减量联用对棉花苗蚜的防控效果

为减少棉花苗蚜防治中化学农药使用量,本文开展了金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂与化学农药减量联用对田间棉花苗蚜的防控效果研究。结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂推荐剂量(900 mL/hm^(2))单独施用对苗蚜田间防效为5.36%~15.46%,整体防效较低;3种化学农药对苗蚜防效较好,其中,50 g/L双丙环虫酯可分散液剂速效性和持效性均最高,50%氟啶虫胺腈水分散粒剂和10%氟啶虫酰胺水分散粒剂药后3 d防效较为稳定。化学农药推荐用量和金龟子绿僵菌联合施用可提高药剂防蚜效果,减量25%和金龟子绿僵菌联合施用与化学农药推荐用量单独施用防效无显著差异,其中,10%氟啶虫酰胺水分散粒剂和金龟子绿僵菌减量联用效果较好,减量25%和金龟子绿僵菌联合施药后1 d、3 d、7 d和14d防效比氟啶虫酰胺推荐用量单独施用分别增加34.76%、7.02%、3.25%和5.49%。供试药剂及减量联用处理可降低苗蚜为害造成的有蚜株率和卷叶株率,50 g/L双丙环虫酯可分散液剂各处理卷叶株率显著低于其他处理,推荐用量、推荐用量与金龟子绿僵菌联用、减量25%与金龟子绿僵菌联用、减量50%与金龟子绿僵菌联用卷叶株率分别为5.47%、5.51%、4.82%、12.78%。综合来看,金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂单独施用对苗蚜防效有待提高,与部分化学农药减量25%~50%联合施用具有协同增效作用。

金龟子绿僵菌CQMA 421对花生蛴螬的防控效果

为明确金龟子绿僵菌CQMA421对防治花生蛴螬的减药防控效果,本试验采用撒施、油悬浮剂拌种和粗喷雾方法,以及与不同化学农药混用的试验设计探究金龟子绿僵菌CQMA421对花生地下害虫蛴螬的防控效果及其对花生产量的影响.结果表明:单独应用绿僵菌CQMA421生物农药的4种处理对蛴螬的防治效果显著低于2种与化学药剂混用处理;采用50%氯虫苯甲酰胺FS 60 mL拌种加绿僵菌CQMA421 OF 60 mL下针期粗喷雾处理杀虫效果、保果率和产量最好,分别为82.3%,83.99%和279.23 kg/667 m 2,而且操作方便、省工省时,可以进行大面积推广应用;667 m 2用5%辛硫磷颗粒剂6 kg效果与绿僵菌CQMA 42160 mL拌种处理相当,从化学农药减量及绿色防控需求来看,应逐步被替代.

金龟子绿僵菌CQMa421与4种新烟碱类农药混配对西花蓟马毒力的增效作用

采用叶管药膜法测定了金龟子绿僵菌CQMa421与新烟碱类农药噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒按照有效成分比(1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1)混配对西花蓟马的室内毒力。结果表明,4种新烟碱类杀虫剂的24和48 h毒力为噻虫胺>噻虫嗪>啶虫脒>吡虫啉,均高于金龟子绿僵菌CQMa421。绿僵菌与噻虫嗪和吡虫啉分别以1∶9、3∶7、5∶5、7∶3、9∶1的比例混配均具有显著的增效作用,绿僵菌与噻虫胺和啶虫脒以9∶1、7∶3的比例混配亦具有良好的增效作用。绿僵菌与新烟碱类农药混配有助于提高对西花蓟马的室内毒力,为治理西花蓟马对新烟碱类杀虫剂抗性提供理论依据。

球孢白僵菌和金龟子绿僵菌不同菌株对黑足角胸叶甲成虫的致病力评价

本研究在测定不同球孢白僵菌Beauveria bassiana和金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae菌株的生长速率与产孢量的基础上,采用孢悬液浸渍法进行了对油茶新害虫——黑足角胸叶甲Basilepta melanopus成虫的生物测定,旨在筛选出感染该成虫的高致病力菌株,为防治该虫提供新的生物资源。结果表明:不同菌株生长速率和产孢量间存在显著差异,MaYTTR-04,BbFZ-17,MaZPTR-01和BbTK-01生长速率和产孢量均显著高于其他菌株。接种后,叶甲成虫累积死亡率随时间的增加而逐渐增高,接种白僵菌7d后,成虫校正死亡率全部达到100%;接种MaZPTR-01和MaYTTR-04两个绿僵菌菌株14d后,成虫死亡率分别为80.3%和78.8%。而且接种白僵菌后,叶甲成虫的僵虫率显著较绿僵菌高,尤其以BbTK-01和BbFZ-17两个菌株较好,分别达到85.7%和75.8%。BbXJ-01,BbFZ-17和BbTK-013个白僵菌菌株的LT50最小,分别为3.0,3.3和3.4d;MaYTTR-04和MaZPTR-01两个绿僵菌的LT50分别为6.0和6.2d。结果说明,白僵菌对叶甲成虫的致病力较强,尤其是BbTK-01和BbFZ-17两个菌株,不仅致死率高,且致死速度快,僵虫率高,同时这2个菌株生长速度快、产孢量大,具有优良的生产特性,在黑足角胸叶甲的生物防治中将有重要的应用价值。

金龟子绿僵菌对入侵性害虫椰子织蛾的致病力

椰子织蛾是危害棕榈科植物的一种入侵性害虫。为评价金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae(Metschnikoff))对椰子织蛾幼虫的致病情况,室内采用浸液法测定了5株绿僵菌菌株对椰子织蛾3龄幼虫的致病力,结果表明:以浓度(1.0±0.5)×10^(6)个孢子∙mL^(-1)的孢子悬液接菌7 d后,各菌株对椰子织蛾幼虫的致病力差异较大,校正死亡率范围在5.00~95.00%之间。其中,MaHA-01菌株对其致病力较强,校正死亡率和僵虫率分别为(95.00±0.00)%和(94.00±2.24)%,均极显著高于其它菌株处理,且LT50较短为4.20 d;其次是Ma1775。MaHA-01菌株接菌后5 d对椰子织蛾3龄幼虫的LC50为3.62×10^(4)个孢子∙mL^(-1)。通过时间-剂量-死亡率(TDM)模型参数估计,MaHA-01菌株对椰子织蛾幼虫的致死效应较强的时间在接菌后3~5 d。可见,MaHA-01菌株对椰子织蛾幼虫有较强的致病力,在该害虫生物防治中可以应用。

布氏白僵菌和金龟子绿僵菌两变种的生长性状及其对蛴螬的毒力测定

以蛴螬病原真菌--布氏白僵菌、绿僵菌小孢变种作参照菌,研究了新分离鉴定的绿僵菌大孢变种的生物学特性,测定了不同温度、不同培养基条件下各菌株对蛴螬的致病能力.结果表明：绿僵菌大孢变种与两种参照菌的培养条件接近,最适宜生长的温度为25℃,所试的3种培养基中,最适宜的培养基为PPDA,其次为SDAY;绿僵菌大孢变种在偏低温（10～20℃）的环境下对蛴螬的毒杀能力比布氏白僵菌强,土壤处理和喷雾处理后,累计僵虫率分别达88.23%和76.47%,有很好的田间应用前景.两种真菌的拌土处理效果高于直接喷雾.鉴于绿僵菌Ma1的致病力较强,在生产上可用该菌进行土壤处理,防治蛴螬等地下害虫.

6种杀菌剂对金龟子绿僵菌孢子萌发的影响

测定了6种杀菌剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发的抑制作用。结果表明,不同杀菌剂对金龟子绿僵菌的抑制作用不同,且随着杀菌剂浓度的下降而减小。其中以腈菌唑的抑制效果最弱,除Ma103菌株外,对其他菌株抑制率均低于35%。代森锌对Ma202,Ma201和Ma203菌株的平均抑制率都较小。其他几种杀菌剂都明显抑制绿僵菌大部分菌株分生孢子的萌发,特别是百菌清和甲基托布津对Ma103,Ma205,Ma207和Ma208菌株的平均抑制率都为100%。2种药剂也强烈抑制其他菌株分生孢子的萌发。因此,应该尽量避免百菌清和甲基托布津与金龟子绿僵菌同时同地使用,否则会明显影响金龟子绿僵菌制剂的应用效果。

金龟子绿僵菌-四氯虫酰胺混配对小白菜黄条跳甲的毒力及田间药效评价

为筛选适用于防治小白菜黄条跳甲的有效药剂,采用浸虫法测定了金龟子绿僵菌与四氯虫酰胺及其不同配比组合对小白菜黄条跳甲的联合毒力,并测定了最佳配比药剂对小白菜黄条跳甲的田间药效。金龟子绿僵菌和四氯虫酰胺混配比为6∶1时,对小白菜黄条跳甲的增效作用最为明显,其共毒系数为470.80。田间药效试验结果显示,7%金龟子绿僵菌·四氯虫酰胺悬浮剂对小白菜黄条跳甲防效较好,使用剂量为25~35 m L/667 m^(2)时,防治成虫与幼虫效果均可达到80%以上。试验期间,试验药剂各处理对小白菜生长无影响无药害,对其他非靶标生物无不良影响。7%金龟子绿僵菌·四氯虫酰胺悬浮剂可作为防控小白菜黄条跳甲的有效药剂。

2种杀菌剂对金龟子绿僵菌产孢的影响

在 0 .0 5 %～ 0 .1 5 %浓度范围内 ,2种杀菌剂 ( 30 %氧氯化铜和耐克铜 )对金龟子绿僵菌的菌落形成没有明显影响 .而耐克铜在 0 .0 5 %～ 0 .1 5 %浓度时能显著地增加金龟子绿僵菌的产孢量 ,并有缩短产孢时间的作用 .研究还表明 2种杀菌剂对杂菌 (根霉、曲霉和青霉 )有较强的抑制作用 ,并随着浓度的增大 ,抑制作用迅速增强 .

不同油剂对金龟子绿僵菌孢子萌发率的影响

本文对杀蝗绿僵菌MA4菌株气生分生孢子在5种植物油、3种矿物油两两不同混配比例的混合油中的萌发率进行了研究,确定了混合比例为1:3的花生油与煤油的混合油作为制剂的载体油是一种理想的绿僵菌油剂类型。气生分生孢子在该混合油剂中36h的萌发率达到95%以上。

金龟子绿僵菌CQMa421对禾花鲤的急性毒性试验

禾花鲤,别称乌鲤、禾花鱼、禾花乌鲤,属鲤科温水性鱼类,鱼体为紫褐色半透明状,因其长期放养在稻田中、食用水稻落花而得名,是广西地方特色的土著品种。禾花鲤肉质细腻鲜美、无腥味、肌间刺少,生长速度快、食性较杂、繁殖力和抗病力强。近年来,广西渔业部门大力推广稻渔生态综合种养模式.

阿维·氯苯酰减量与金龟子绿僵菌CQMa421联用防控草地贪夜蛾初探

为探究化学农药减量与生物农药联用对草地贪夜蛾的防治效果,本文测定了阿维•氯苯酰减量与金龟子绿僵菌CQMa421联用对草地贪夜蛾的防治效果。结果显示,阿维•氯苯酰悬浮剂减量25%(30 mL/667 m^(2))与金龟子绿僵菌CQMa421(30 mL/667 m^(2))联用使用,在药后14 d对草地贪夜蛾的防效达79.18%,与阿维•氯苯酰(不减量)的处理相当。因此,推荐绿僵菌30 mL/667 m^(2)+阿维•氯苯酰30 mL/667 m^(2)防治草地贪夜蛾。

三种杀真菌剂对金龟子绿僵菌产孢及生长的影响

三种杀真菌剂在一定浓度范围为（氯硝胺在１００×１０￣（－６），孟加拉红在５００×１０￣（－６）和柯赛得在２０００×１０￣（－６）内）对金龟子绿僵菌的菌落形成没有明显影响，而柯赛得（含５０％氢氧化铜）和孟加拉红分别在１００×１０￣（－６）和５００×１０￣（－６）浓度时显著地增加金龟子绿僵菌的产孢量，柯赛得还具有缩短产孢时间的作用。氯硝胺在１～１００×１０￣（－６）浓度范围内，随着浓度增加，对产孢能力和菌落大小的抑制作用加强。柯赛得和孟加拉红随浓度的增加对菌落的抑制作用也有所加强，但没有像氯硝胺的抑制作用那么强。

金龟子绿僵菌固态发酵条件的响应面优化研究

金龟子绿僵菌是绿色环保型生物杀虫剂之一,它能侵染多种害虫,且不易产生抗药性,在环境中具有较高的持久性,但在实际生产中所需发酵成本较高。该研究通过单因素试验探究了培养基质、添加剂等营养条件,pH值、接种量等培养条件及其对金龟子绿僵菌的生长及产孢的影响,在此基础上,采用响应面法评价了玉米粉与稻壳质量比、维生素B1添加量、CaCO_(3)添加量和含水量等对金龟子绿僵菌固态发酵条件的影响,确定适合绿僵菌产孢的最佳培养基配方。结果表明,通过单因素和响应面确定的最佳培养基配方为:玉米粉与稻壳质量比为1.79:1、维生素B1添加量0.04%、CaCO_(3)添加量0.09%、含水量为59.25%、pH为6、接种量6%,理论产孢量为1.24×10^(9)个孢子/g,实际得到产孢量为1.20×10^(9)个孢子/g,对4个因素3个水平进行回归分析,拟合度为96.14%,表明优化模型可靠。

金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的急性毒性试验

台湾泥鳅是稻鱼综合种养中常见的养鱼品种。为确定真菌杀虫剂金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的安全浓度,本研究进行金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的急性毒性试验。结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的24 h半致死浓度(LC_(50))为93.79 mg/L,48、72 h和96 h的半致死浓度均为86.24 mg/L,金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的毒性可评价为低毒;安全浓度为21.87 mg/L,该安全浓度远高于金龟子绿僵菌CQMa421在水稻上施用的有效杀虫用量。本研究结果初步确定金龟子绿僵菌CQMa421在稻鳅综合种养中可以作为水稻生产的杀虫剂安全使用。

金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂防治茶小绿叶蝉的田间试验

以茶小绿叶蝉害虫为对象,通过田间试验,了解茶园施用金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂的防治效果。试验结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂与生物农药混配施用,对茶小绿叶蝉有明显的杀虫增效作用;与减量化学农药复配施用,对茶小绿叶蝉有明显的杀虫增效和持效作用。试验结果可为金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂的科学使用提供借鉴。

金龟子绿僵菌和球孢白僵菌对大黑鳃金龟二龄幼虫的致病力

为了筛选生物防治大黑鳃金龟(Holotrichia diomphalia Batesa)的高毒力生防虫生真菌,室内生物测定和比较了金龟子绿僵菌[Metarhizium anisopliae Metschnikoff(Sorokin)]KMa0107菌株、球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Balsamo)Vuillemin]菌株Bb070610和Bb070917对大黑鳃金龟2龄幼虫的致病力。结果表明:接种后5~12 d,KMa0107,Bb070610和Bb070917菌株对大黑鳃金龟2龄幼虫的致死剂量对数值间差异显著(F=19.45,P<0.01),分别为(9.45±1.71)^(4.73±0.37)、(9.76±1.87)^(5.20±0.79)、(10.48±1.24)^(5.99±0.43)。用密度为1.15×108~1.15×105个/m L的孢子悬浮液接种后,对大黑鳃金龟2龄幼虫侵染致病的LT50估计值范围为5.7~8.7 d,6.4~9.2 d,6.3~8.6 d。接种孢子悬浮液后,随着病原菌的侵染及其在虫体内的繁殖,大黑鳃金龟2龄幼虫血淋巴中蛋白质质量浓度逐渐减少。接种后第4天,幼虫血淋巴中蛋白质质量浓度均明显下降,接种KMa0107及Bb070610的大黑鳃金龟2龄幼虫血淋巴蛋白质质量浓度下降速度显著大于Bb070917菌株处理。接种后第10天,菌株KMa0107及Bb070610处理的大黑鳃金龟2龄幼虫血淋巴蛋白质质量浓度显著低于对照及Bb070917菌株处理(F=17.36,P<0.01)。综合以上结果,金龟子绿僵菌KMa0107及球孢白僵菌Bb070610菌株对大黑鳃金龟2龄幼虫具有较强的致病力,具有良好的生防制剂开发潜力。

Mrhox3影响罗伯茨绿僵菌产孢和抗逆能力的研究

罗伯茨绿僵菌作为一种昆虫病原真菌,已在害虫生物防治中得到应用。Homeobox家族基因在真菌无性繁殖过程中具有重要作用,但是其在昆虫病原真菌中的功能尚不清楚。qRT-PCR结果显示homeobox家族基因Mrhox3在产孢阶段和分生孢子阶段高水平表达。通过基因敲除与回补研究其功能,结果表明敲除Mrhox3不影响菌株营养生长和致病性,但是显著降低菌株的产孢能力。进一步研究显示敲除Mrhox3显著下调关键调控因子abaA和wetA等多个产孢相关基因的表达水平。敲除Mrhox3促进分生孢子萌发,并显著增强分生孢子对紫外胁迫和热激胁迫的耐受力。本研究将为进一步揭示罗伯茨绿僵菌的产孢机制和分生孢子抗逆机制奠定基础。