β-辛醚对ox-LDL损伤ECV304细胞内钙离子浓度影响的实验研究

目的:观察石菖蒲主要有效成分β-细辛醚对氧化低密度脂蛋白诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞内钙离子(Ca2+)的影响。方法:将细胞分为正常组,模型组,β-细辛醚高、中、低剂量组;采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定ECV304细胞内Ca2+浓度;酶标仪检测细胞活性。结果:ox-LDL可致ECV304细胞内Ca2+明显增高,细胞活力降低,与正常对照组比较有显著差异(P<0.001);β-细辛醚能够不同程度的降低ox-LDL致损伤的ECV304细胞内Ca2+浓度,增强细胞活力,与模型组比较差异有统计学差异(P<0.05～0.01)。结论:β-细辛醚能有效减轻ox-LDL对ECV304的损伤。

桑叶乙酸乙酯提取物的血管作用及其机制

目的：探讨桑叶乙酸乙酯提取物对离体大鼠胸主动脉环收缩张力的作用及其机制。方珐：采用生物信号采集系统记录灌流胸主动脉环张力变化。结果：①桑叶乙酸乙酯提取物（0．25～32．0g／L）对苯肾上腺素（PE，10^-6 mol／L）和KCl（6×10^-2 mol／L）预收缩的内皮完整和去内皮的血管环均有舒张作用，且呈浓度依赖性；②EC50（KCl 6g／L，PE6．4g／L）的桑叶乙酸乙酯提取物可使CaCl2量效曲线下移，最大反应降低；③经钙通道阻断剂维拉帕米预处理的去内皮血管，桑叶乙酸乙酯提取物可加强PE引起的血管收缩，与ryanodine受体阻断剂钌红共孵育可取消维拉帕米的上述作用，而IP3受体阻断剂肝素则不能取消其作用。结论：桑叶乙酸乙酯提取物对血管呈非内皮依赖性的双重作用，其舒张效应大于收缩效应。桑叶乙酸乙酯提取物产生的血管舒张作用可能是通过抑制电压依从性钙通道和受体依从性钙通道减少Ca^2＋内流入血管平滑肌细胞所致；其收缩作用可能是通过激活内质网ryanodine受体，引起内质网内Ca^2＋释放引起的。

双黄连对乌头碱中毒导致大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流变化的影响

目的观察双黄连粉针剂对乌头碱导致大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响，探讨双黄连对抗乌头碱导致的心律失常在离子通道水平的药理作用机制；为临床用药提供进一步的理论依据。方法将实验分为正常对照组，乌头碱组，及双黄连干预组。通过原代培养的大鼠心室肌细胞，应用全细胞膜片钳技术记录正常对照组、乌头碱组及双黄连干预组L-型钙通道电流的变化情况。结果在钳制电压-40mV刺激电压＋10mV条件下，1μmol／L乌头碱作用下Ica-L电流峰值从（-1104．00±252．3085）PA增加至（-3163．44±272．1169）PA（P〈0．05），加入双黄连后，峰值回复到（-1512．57±488．0761）pA（P〈0．05）。乌头碱作用下电流-电压曲线下移，双黄连干预后使下移的曲线上抬，但激活电位、峰电位和I-V曲线的形状，翻转电位不变。乌头碱作用下L-Ca通道电流稳态激活曲线稍向左移，双黄连干预组，使左移的稳态激活曲线向右移，乌头碱及双黄连的半激活电压分别是（19．4207±2．9148）mV和（23．5792±3．6105）mV，乌头碱及双黄连的斜率分别是（11．1311±1．8980）和（11．4750±3．2999），差异无统计学意义（P〉0．05）；对时间效应曲线的影响，乌头碱组的上升时间常数是87s左右，洗去后，不能使电流恢复，加入双黄连干预后，曲线快速下降，约56S左右回复到给药前的状态。结论（1）乌头碱对培养大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流有明显增加作用。（2）双黄连粉针剂可抑制乌头碱导致心肌细胞L-型钙通道电流的增强作用。