细胞外钙受体的结构特点以及临床应用的新领域

细胞外钙受体 (CaR)对调节机体细胞外钙 (Ca2 + o )平衡发挥着重要作用。CaR属于由G蛋白介导的受体 ,是由 10 79个氨基酸组成的多肽。CaR广泛分布于甲状旁腺、甲状腺C细胞、肾脏、肠、骨等参与钙调节的重要器官 ,其基因缺损可导致钙调节紊乱。由于CaR的生理意义非常重要 ,它已成为治疗钙代谢紊乱性疾病的靶点。CaR拮抗剂和激动剂可分别用于治疗甲状旁腺机能亢进、骨质疏松症和肾结石 。

小凹蛋白-1和钙受体在人的脐静脉内皮细胞的表达

为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中小凹蛋白-1与细胞外钙受体表达及定位,为进一步功能研究提供理论依据,采用Western-blot和Rt-PCR及免疫荧光技术检测HUVEC中小凹蛋白-1与细胞外钙受体mRNA和蛋白表达及定位。结果显示:(1)形态学观察和免疫细胞化学法测Ⅷ因子抗原,95%以上的细胞呈阳性着色,证实细胞为HUVEC。(2)RT-PCR检测到HUVEC中459bp和260bpmRNA表达,Western-blot测到HUVEC中22KD和150-160KD蛋白表达。(3)免疫荧光检测到小凹蛋白-1与细胞外钙受体定位于人脐静脉内皮细胞膜。由此可知,人的HUVEC中有小凹蛋白-1与细胞外钙受体表达,两者是否共定位及其功能有待进一步研究。

细胞外钙受体调节人脐静脉内皮细胞游离钙离子浓度的研究

为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)游离钙离子浓度是否受细胞外钙受体(CaR)的调节。采用Westernblot及RT-PCR技术检测CaR在HUVEC中蛋白及mRNA表达。使用CaR激动剂精胺,负性变构调节剂Calhex231,通过钙荧光探针(Fura-2/AM)负载HUVEC检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)。结果显示:(1)HUVEC中有CaR的表达。(2)在Fura-2/AM负载HUVEC中加入精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0.24±0.01,先加入Calhex231作用1min后再加入Calhex231+精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。由此可知,CaR调节HUVEC游离钙离子浓度。

细胞外钙受体及其在心血管系统中的作用

细胞外钙受体也称为钙敏感受体(extracellular calcium sensing receptor,CaR),对调节机体细胞外钙的平衡发挥着重要作用。该受体不仅分布在甲状旁腺、骨、肾、肠这些与钙转移和钙稳态调节有关的器官,还广泛分布于许多其他与钙的稳定无关的组织细胞中,并通过PLC,PIK和MAPK等细胞内信号转导途经起着除钙稳态调节以外重要的细胞内作用,如保护细胞抗凋亡、细胞增殖等生物学作用,在心血管系统中,CaR也有重要的生理病理作用,本文综述了近些年关于CaR的结构、功能和信号转导及它在心血管系统中的作用。

甲状旁腺钙受体与肾性甲旁亢关系的研究进展

甲状旁腺钙受体 (CaR)是与G蛋白相偶联的膜受体。胞外Ca2 + 通过激活CaR ,可快速、独立地影响甲状旁腺激素 (PTH)的分泌。慢性肾功能衰竭 (肾衰 )继发甲状旁腺功能亢进 (甲旁亢 )时 ,Ca调定点升高 ,PTH过度分泌。多数学者认为这与甲状旁腺CaR的mRNA表达下降及受体蛋白合成减少有关 ,而与CaR的基因突变无关。CaR的激动剂能模仿甚至增强胞外Ca2 + 对甲状旁腺细胞的效应 ,初步证实它能快速、安全、有效地抑制PTH分泌 ,延缓肾性骨病的发展。

钙受体激动剂在继发性甲旁亢治疗中的研究进展

胞外Ca2 + 通过激活甲状旁腺细胞表面的钙敏感受体 (CaR) ,可独立、快速地调节甲状旁腺激素 (PTH)的释放 ,慢性肾衰继发甲旁亢 (SHPT)时 ,甲状旁腺CaR的表达减少 ,是引起甲状旁腺细胞过度分泌PTH的直接原因之一。新问世的CaR激动剂 ,可模仿甚至增强胞外Ca2 + 对CaR的作用 ,初步研究证实 ,它能降低SHPT患者血PTH水平 ,动物实验还发现它有改善骨骼病变的作用 ,因此具有良好的应用前景。

钙受体激动剂治疗慢性肾衰竭继发性甲状旁腺功能亢进的应用进展

慢性肾衰竭（CRF）常见的并发症为继发性甲状旁腺功能亢进症（SHPT）,可引起肾性骨营养不良、血管和心瓣膜钙化,使心血管疾病的发病率和死亡率增高.SHPT的传统治疗主要为补充钙剂、磷结合剂、活性维生素D,但只能部分改善甲旁亢,并且可引起高磷血症、高钙血症及钙磷乘积升高等副作用.近年来,临床对钙敏感受体（CaSR）激动剂盐酸西那卡塞特（Cinacalcet hydrochloride）的研究取得了较大进展,为SHPT治疗提供了新的选择,本文予以综述.

钙受体激动剂在继发性甲状旁腺功能亢进治疗中的应用

继发性甲状旁腺功能亢进（secondary hyperparathyroidism，SHPT）是慢性肾功能不全（chronic renal failure，CRF）患者常见并发症之一，临床表现为高甲状旁腺素（Parathyroid hormone，PTH）血症、骨及矿物质代谢紊乱、甲状旁腺增生和心血管系统疾病等，目前认为对其他脏器功能及患者生存率亦有影响。

钙敏感受体在神经系统疾病中的研究进展

钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)最早发现于甲状旁腺,主要通过调节甲状旁腺素的分泌参与全身Ca2+稳态的调控。在神经系统的早期发育中,CaSR在神经元和胶质细胞的分化、成人神经系统突触的传递中均起关键作用。研究显示,CaSR抑制剂可有效对抗阿尔茨海默病和脑缺血缺氧的病理过程;CaSR的正向调节作用是治疗神经母细胞瘤的潜在方法。CaSR调节剂可作为治疗神经系统疾病的新药。本文综述CaSR在神经系统疾病中的研究进展,为后续进一步探讨CaSR是否可作为神经系统疾病治疗的新靶点奠定理论基础。

钙敏感受体在血吸虫病肝纤维化中的作用

目的:探讨钙敏感受体(Calcium sensitive receptors,CaSR)在血吸虫病肝纤维化中的作用。方法:采用BALB/c小鼠建立血吸虫病肝纤维化模型。通过HE和Masson染色观察小鼠肝组织病理学变化,免疫组织化学、RT-qPCR和Western blot技术分别检测肝组织中CaSR和纤维化相关指标表达,ALT和AST试剂盒检测肝组织氨基转移酶含量,天狼星红和VG染色技术观察CaSR抑制剂(Calhex231)对小鼠肝纤维化的影响。结果:HE染色结果显示,未感染组小鼠肝细胞排列整齐,感染组小鼠肝组织中出现大量虫卵且虫卵周围有胶原纤维沉积,形成虫卵肉芽肿,Masson染色结果显示,未感染组小鼠肝细胞排列整齐,肝组织未见明显胶原沉积,感染组小鼠肝组织大量破坏,出现大量假小叶且周围有大量胶原纤维化增生;与未感染组相比,感染组小鼠肝组织α-SMA、Collagen-Ⅰ和CaSR表达增加,ALT和AST含量增加,差异均有统计学意义(P<0.05);天狼星红染色结果显示,感染组小鼠肝组织结构已经严重破坏,且出现大量胶原纤维沉积;CaSR抑制剂干预组小鼠肝组织结构出现破坏,但尚有部分组织为完整结构;VG染色结果显示,感染组小鼠肝组织已呈现出大量粉红色,而CaSR抑制剂干预组小鼠肝组织呈现出部分粉红色,尚有部分完整组织结构。结论:CaSR可能在血吸虫病肝纤维化中发挥作用。

钙敏感受体与肺动脉高压相关性的研究进展

肺动脉高压(Pulmonary arterial hypertension,PAH)是一种进行性、致命性的恶性心血管疾病,其特征是肺血管阻力升高,并由此引发右心室肥厚甚至右心室衰竭,危及患者生命。近年来,钙敏感受体(Calcium-sensing receptor, CaSR)被发现与PAH存在着密不可分的关系,为临床上PAH的预防及治疗提供了新的思路。本篇综述就CaSR在PAH中的作用机制及其临床应用展开叙述。

钙敏感受体在畜禽消化系统和疾病防控中的作用

钙敏感受体(CaSR)是G蛋白偶联受体(GPCR)家族的一员,广泛分布于机体各组织细胞中,在多种生理和病理过程中起着关键作用。在消化系统中,CaSR可以调节胃酸、胆汁,胰岛素以及肠液等消化道腺体的分泌和流动。CaSR基因突变可能是导致胰腺炎,肠炎,胃癌以及肠癌等疾病的诱因。因此研究CaSR在消化系统中的作用,有利于将其作为靶点进行精准治疗。

钙离子敏感受体激动剂治疗血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进的效果研究

研究钙离子敏感受体激动剂治疗血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进的效果。选取2021年10月-2022年10月宣城市人民医院血液透析科收治的60例维持性血液透析(≥3个月)伴继发性甲状旁腺功能亢进的患者为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(n=30)和观察组(n=30)两组。对照组行常规活性维生素D(阿法骨化醇)治疗,观察组在对照组基础上行西那卡塞治疗,比较两组患者治疗效果。结果显示,治疗后,观察组血钙含量和iPTH水平显著低于对照组(P<0.05);观察组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。研究发现,钙离子敏感受体激动剂(西那卡塞)治疗维持性血液透析伴继发性甲状旁腺功能亢进患者可以有效降低机体iPTH水平,对钙磷、骨代谢、贫血情况及肾功能影响较小,有较为显著的临床疗效,治疗安全性较高。

探究骨化三醇联合钙受体激动剂治疗慢性肾衰继发性甲状旁腺功能亢进症的疗效及对患者血清β2-MG、FGF-23的影响

目的观察慢性肾衰继发性甲状旁腺功能亢进症(chronic renal failure-secondary hyperparathyroidism,CRF-SHPT)患者给予骨化三醇联合钙受体激动剂治疗的有效性及对其血清β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、纤维细胞生长因子-23(fibroblast growth factor-23,FGF-23)水平的影响。方法纳入2020年3月至2022年3月浙江中医药大学附属湖州市中医院肾内科收治的86例CRF-SHPT患者,按随机数字表法分为对照组(43例,骨化三醇治疗)和联治组(43例,骨化三醇+钙受体激动剂治疗),评估治疗效果,测量治疗前及治疗后两组血磷(P^(3-))、血钙(Ca^(2+))、全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,iPTH)、β2-MG、FGF-23及肾功能、血脂指标水平,统计给药期间不良反应发生情况,计量资料组间比较采用独立样本t检验,计数资料组间比较采用χ^(2)检验。结果联治组总有效率(90.70%)显著高于对照组(72.09%)(χ^(2)=4.91,P=0.027);治疗后联治组iPTH、P3-水平[(220.16±23.76)ng/L、(1.22±0.14)mmol/L]显著低于对照组[(301.25±31.71)ng/L、(1.64±0.18)mmol/L],联治组Ca2+水平(2.59±0.41)mmol/L显著高于对照组(2.26±0.34)mmol/L(t=13.42、12.08、4.06,P均<0.001);治疗后联治组血清β2-MG、FGF-23水平[(34.67±4.12)mg/L、(71.36±8.05)ng/L]显著低于对照组[(40.36±4.87)mg/L、(78.97±8.73)ng/L](t=5.85、4.20,P均<0.001);治疗后联治组甘油三酯(tri-glyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)水平[(1.51±0.19)mmol/L、(4.11±0.51)mmol/L]显著低于对照组[(1.74±0.24)mmol/L、(4.75±0.59)mmol/L](t=4.93、5.38,P均<0.001);治疗后两组血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平无明显变化(P>0.05);治疗期间联治组与对照组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论给予CRF-SHPT患者骨化三醇联合钙受体激动剂治疗可有效降低患者iPTH水平,改善钙磷失衡及脂代谢紊乱,下调血清FGF-23及β2-MG水平,且未损伤患者残余肾功能,安全性高。

MiR-301a-5p调节继发性甲状旁腺功能亢进症中甲状旁腺激素的分泌:基于调控钙敏感受体的表达

目的探索继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)中引起钙敏感受体(CaSR)低表达的miRNA及其对甲状旁腺激素(PTH)分泌的影响。方法对6例正常甲状旁腺组织标本和11例SHPT的甲状旁腺组织标本进行了全转录组测序,结合网站的预测,初步筛选了7个有可能调控CaSR的miRNAs,通过双荧光素酶实验,选定出一个最可能调控CaSR的miRNA。采用qRT-PCR检测正常甲状旁腺组织与SHPT甲状旁腺组织中miR-301a-5p和CaSR信使RNA表达的差异,并分析其表达量与患者血清PTH水平的相关性。采用Western blot检测SHPT甲状旁腺原代细胞转染miR-301a-5p mimics、inhibitors及各自对照之后CaSR蛋白表达的情况,同时取其上清液测定PTH的分泌情况。结果初步选定了7个有可能调控CaSR的miRNAs,分别是:miR-15a-5p、miR-15b-5p、miR-16-5p、miR-221-3p、miR-222-3p、miR-301a-5p和miR-503-5p。与正常甲状旁腺组织相比,miR-301a-5p在SHPT中表达上调(P<0.05),其表达量与患者PTH水平呈正相关关系,但结果无统计学意义(P>0.05);而CaSR信使RNA表达下调(P<0.05),其表达量与患者PTH水平呈负相关关系,但结果无统计学意义(P>0.05)。在细胞实验中,当miR-301a-5p过表达时,SHPT甲状旁腺原代细胞中CaSR蛋白的表达较对照组减少(P<0.05);反之,当miR-301a-5p的表达被抑制时,CaSR蛋白的表达较对照组增加(P<0.05)。过表达miR-301a-5p后,PTH的分泌与对照组的差异无统计学意义(P>0.05),而拮抗miR-301a-5p的表达后,PTH的分泌较对照组增加(P<0.05)。结论miR-301a-5p可能通过调控SHPT中CaSR的表达而影响PTH的分泌。

钙敏感受体基因在慢性胰腺炎发生中的作用机制研究进展

胰腺是人体第二大消化腺,具有内、外分泌功能,当发生慢性胰腺炎时其内外分泌功能均可出现不同程度的损伤。钙敏感受体(CASR)基因可在人体胰腺具有内、外分泌功能的多种细胞上表达。有研究表明,CASR基因的单核苷酸多态性与不同类型的慢性胰腺炎相关,且CASR编码基因的突变以及单核苷酸多态性的改变可能会通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通络、核转录因子NF-κB信号通路和钙离子稳态相关的机制参与慢性胰腺炎的发生及进展。目前,关于CASR基因突变和基因多态性与其他致病基因突变之间的相互作用、CASR基因型与CP表型之间的关系等相关研究较少,未来仍需对CASR基因多态性及其他关键基因如SPINK1基因多态性在CP发生机制中的遗传作用进行深入探讨,为CP的精准治疗提供方向。

上调钙敏感受体对大鼠多孔钽-BMSCs复合培养成骨向分化的影响及其作用机制

目的 探讨上调钙敏感受体(CaSR)对大鼠多孔钽-骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合培养成骨向分化的影响及其作用机制。方法 提取SD大鼠BMSCs培养至第3代,通过成骨向和成软骨向诱导后,采用茜素红染色和甲苯胺蓝染色鉴定;荧光显微镜观察BMSCs在多孔钽表面的生长黏附情况;CCK-8法检测BMSCs在不同浓度(200、250、300、350、400μmol/L)GdCl3(CaSR激动剂)处理下培养1~5 d的细胞增殖情况,选取最适作用浓度;激光共聚焦显微镜观察激活CaSR后细胞内钙离子分布情况。取第3代BMSCs成骨诱导并分为对照组(加入成骨诱导培养基)、GdCl3组(加入含300μmol/L GdCl3的成骨诱导培养基)、多孔钽组(与国产多孔钽材料复合培养,加入成骨诱导培养基)与GdCl3+多孔钽组(与国产多孔钽材料复合培养,加入含300μmol/L GdCl3的成骨诱导培养基)。培养第7天,检测各组碱性磷酸酶(ALP)活性;培养第7、14、21天,采用ELISA法检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)、骨桥蛋白(OPN)分泌水平,Westernblotting检测ColⅠ、OPN、Runt相关转录因子2(Runx2)、Homer 1蛋白的表达。结果 茜素红、甲苯胺蓝染色结果显示分离提取的细胞为BMSCs;CCK-8法检测结果显示,300μmol/L GdCl3处理的细胞活性最高(P<0.05);激光共聚焦显微镜观察显示,激活CaSR后细胞内钙离子荧光强度明显增高(P<0.05)。GdCl3组、多孔钽组和GdCl3+多孔钽组培养第7天ALP活性以及第7、14、21天的ColⅠ、OPN、Runx2、Homer1蛋白相对表达量均高于对照组(P<0.05);GdCl3+多孔钽组培养第7天的ALP活性以及ColⅠ、Runx2、Homer1蛋白相对表达量高于GdCl3组、多孔钽组,第14天的ColⅠ、OPN、Runx2、Homer1蛋白相对表达量高于GdCl3组,第21天的ColⅠ、OPN、Runx2、Homer1蛋白相对表达量高于多孔钽组,第7、14、21天的ColⅠ与第7、21天的OPN蛋白分泌量明显高于GdCl3组、多孔钽组和对照组(P<0.05);多孔钽组培养第7天的ColⅠ与第21天的OPN蛋白分泌量高于对照组(P<0.05);GdCl3组培养第21天的ColⅠ与第14天的OPN蛋白分泌量高于对照组(P<0.05)。结论 多孔钽与BMSCs复合培养后,上调CaSR可促进细胞成骨向分化,其机制可能与激活ColⅠ、Runx2、OPN等成骨基因的表达有关。