高糖对大鼠膀胱平滑肌细胞中钙库操控的钙离子通道的影响

目的观察高糖对大鼠膀胱平滑肌细胞(BSMCs)中钙库操控的钙离子通道(SOCC)的影响。方法通过激光共聚焦显微镜观察记录高糖处理的BSMCs激动和抑制SOCC后细胞内相对荧光强度值,反映其钙离子浓度变化。通过RT-qPCR和Western blot检测SOCC相关组成分子STIM1和Orai1在高糖处理的BSMCs中mRNA与蛋白的表达水平。结果高糖处理的BSMCs加入SOCC激动剂CPA后相对荧光强度显著增加,加入SOCC抑制剂SKF-96365后相对荧光强度显著降低。高糖能上调BSMCs中SOCC重要组成分子STIM1和Orai1的mRNA表达水平以及蛋白表达水平。结论高糖能促进大鼠BSMCs中SOCC的激活,使胞外Ca^(2+)内流,可能为糖尿病膀胱的病因学研究提供新的思路。

内质网钙池操控钙内流研究进展

细胞内的内质网钙库清空所引发的钙内流是细胞钙信号的重要组成,介导胞外钙离子进入细胞内,并参与细胞内一系列广泛的生理过程。该过程主要由内质网上的钙离子感受器STIM蛋白和细胞膜上的Orai钙离子通道的所介导的。对钙库操控性钙内流的研究进展进行了讨论,并展望了未来的研究方向,以期为相关研究提供参考。

瞬时感受器电位C4离子通道及其调节剂的研究进展

瞬时感受器电位C4(transient receptor potential canonical 4,TRPC4)离子通道是一类可调节细胞内钙离子浓度的非特异性阳离子通道,主要分布于神经系统和心血管系统,通过受体操控和钙库操控方式调控Ca2+内流,与多种生理病理过程密切相关。本文主要对TRPC4的激活机制、生理功能及其调节剂的前沿研究进展进行综述。

黄芩苷调节STIM1介导的钙超载减轻脂多糖诱导的心肌细胞凋亡

目的探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的H9C2心肌细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法培养H9C2心肌细胞,分为正常组、黄芩苷组(10μmol/L的黄芩苷预处理12 h)、LPS组(1μg/ml,刺激作用6 h)、LPS+黄芩苷组(10μmol/L的黄芩苷预处理12 h,再加入终浓度为1μg/ml刺激6 h),收集细胞样本。CCK-8(The Cell Counting Kit-8)检测细胞活力,TUNEL(Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling)法检测细胞凋亡,共聚焦显微镜观察细胞钙库操控性钙离子内流(SOCE)水平的变化,免疫印迹法检测细胞cleaved-caspase3、Bcl-2及Bax蛋白表达水平的变化,荧光定量聚合酶链反应(PCR)、免疫印迹法检测细胞上蛋白基质交感分子1(STIM1)分别在mRNA和蛋白表达水平的变化。结果与对照组相比,LPS诱导后H9C2心肌细胞存活率降低[(93.8±1.7)%与(65.6±1.2)%,P<0.05],凋亡百分率升高[(8.7±1.2)%,LPS组为(47.4±5.2)%,P<0.05],钙离子内流增加(P<0.05),cleaved-caspase3、Bax蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),STIM1 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。与LPS组相比,黄芩苷干预组H9C2细胞心肌细胞存活率升高(P<0.05),凋亡百分率降低(P<0.05),钙离子内流减少(P<0.05),cleaved-caspase3、Bax蛋白水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),STIM1 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。结论黄芩苷具有减轻LPS诱导心肌细胞凋亡的能力,其通过改善其调控STIM1-SOCE钙超载减轻LPS引起的心肌细胞凋亡。