TGF-β参与细胞内钙池操纵性Ca^(2+)内流调节FGF23的释放

为了研究TGF-β是否通过细胞内钙池操纵性Ca^(2+)内流来调节FGF23的释放,通过TGF-β处理大鼠骨肉瘤细胞利用荧光定量PCR技术检测细胞内FGF23和Orai1基因的表达。结果表明,与正常对照组细胞比较,TGF-β处理组FGF23与Orai1的基因表达水平显著升高,并且Orai1和NF-κB的抑制剂能够拮抗TGF-β的作用。表明TGF-β通过NF-κB/Orai1调节FGF23的释放,为进一步治疗慢性肾病等疾病提供依据。

钙池操纵的Ca^(2+)通道的激活机制研究进展

钙池操纵的Ca^(2+)通道(store-operated Ca^(2+) channels,SOC)是非兴奋细胞Ca^(2+)内流的主要通道之一,参与多种病理和生理过程,在钙信号通路的研究中,SOC的激活机制一直是人们关注的焦点之一,迄今为止,钙内流因子模型(Ca^(2+) innux factor model,CIF model)和构象耦联模型fconformational coupling model)受到广泛关注.部分学者已经从很多不同类型的细胞中提取出CIF,并证实钙非依赖性的磷脂酶A_2(Ca^(2+)-independent phospholipase A_2,iPLA_2)作为CIF的底物,在某些类型细胞的SOC激活过程中发挥重要作用,并进一步提出了ER- CIF-iPLA_2-CaM-LysoPLs-SOC通路模型.瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道蛋白与1.4,5-磷酸肌醇受体(inositol 1,4,5 trisphosphate receptor,IP_3R)的结构连接作为构象耦联模型的基础已被广泛证实,随着对IP_3R,Ryanodine受体、肌动蛋白等在钙信号通路中所发挥作用的深入研究,构象耦联模型将得到不断补充和完善.SOC激活机制的破解,将对进一步完善非兴奋细胞的钙通道特性及其调节机制理论带来重大突破.

Ca^(2+) Entry Through TRPC1 Channels Contributes to Intracellular Ca^(2+) Dynamics and Consequent Glutamate Release from Rat Astrocytes

各种不同的刺激作用于星型胶质细胞,可以导致胞浆内Ca2+浓度增加,进而释放更多谷氨酸作用于周边的神经元。大部分Ca2+来源于细胞内,小部分来源于细胞外。Ca2+内流是通过钙池操纵Ca2+通道(SOC)实现的。因此,作者观察在星型胶质细胞内Ca2+激活与谷氨酸释放过程中钙池操纵Ca2+通道(SOC)发挥了什么样的作用。已有研究显示星型胶质细胞所表达的TRPC通道(Ca2+通过瞬时受体电位通道相关蛋白)介导了钙池操纵Ca2+的内流。本文发现培养的星形胶质细胞以及从视皮质中新分离的星形胶质细胞表达TRPC1,TRPC4,和TRPC5。间接免疫组化显示这些蛋白存在于整个细胞中,然而机能检测TRPC1主要表达在质膜上。在新分离的星形胶质细胞中做标记,显示了在细胞发育过程中TRPC表达的改变。应用抗TRPC1的抗体,可以阻断TRPC1通道并且可以测定它们在培养的星形细胞的机械性和激动剂触发的钙离子内流过程中的作用。阻断TRPC1可以减少机械诱导的钙离子依赖性的谷氨酸盐的释放。这些实验数据表明,钙离子通过TRPC1通道的内流有助于钙离子在星形细胞中的信号传导以及由此引起的谷氨酸盐的释放。

钙池操纵的Ca^(2+)通道在IL-13促气道平滑肌细胞增殖中的作用

目的:探讨钙池操纵的Ca2+(SOC)通道在Th2型细胞因子IL-13促进气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖中的作用。方法:体外分离培养大鼠ASMCs,IL-13孵育36 h后,以Fluo 3-AM为钙荧光示踪剂,采用激光共聚焦显微镜,测定大鼠ASMCs基础Ca2+水平以及肌浆网钙泵抑制剂Thapsigargin(TPG)诱发的内钙释放和经SOC通道的外钙内流;采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法),检测SOC通道阻断剂SKF-96365对IL-13促增殖作用的影响。结果:①IL-13作用36 h后,ASMCs的内钙释放及经SOC通道的钙内流反应明显高于对照组(P<0.05),并且这种钙内流反应能部分被SOC通道阻断剂SKF-96365抑制(P<0.01)。②IL-13能促进气道平滑肌细胞增殖,该作用可被SKF-96365抑制(P<0.01)。结论:IL-13对气道平滑肌细胞的促增殖作用可能部分是通过促进SOC通道钙离子内流反应来实现的。

氧自由基对血管内皮细胞钙电流的影响及山莨菪碱的干预作用

目的观察山莨菪碱(anisodamine,Ani)在氧自由基(oxygen free radical,OFR)作用体外培养人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)后对其钙池操纵的Ca2+通道电流(store-operated Ca2+currents,Isoc)的影响。方法利用全细胞膜片钳记录技术,应用快速加药灌流装置将0.5、1.0、1.5 mmol/L三种不同浓度的Ani对OFR作用HUVECs后ISOC的影响。结果OFR能增强HUVECs的ISOC,而Ani对OFR作用HUVECs后所引起ISOC的增大作用具有抑制效应。当膜电位钳制于-100 mV时,1.5 mmol/L Ani可使ISOC的峰值电流从(-388.59±58.66)pA下降至(-287.37±23.03)pA,抑制率为(25.013±9.49)%;OFR作用后,1.5 mmol/LAni可使ISOC的峰值电流从(-577.04±93.69)pA下降至(-302.38±35.13)pA,抑制率为(47.24±3.82)%。各组间及与对照组相比均有显著的统计学差异(P<0.01,n=6)。结论Ani具有明显抑制HUVECs细胞ISOC的作用,对OFR所致的血管内皮损伤确有保护作用。