8%盐酸脱钙液处理骨髓组织时长与染色效果的探索

目的探索8%盐酸脱钙液处理骨髓组织不同时长的染色效果。方法收集骨髓组织活检标本180例,利用8%盐酸脱钙液分别在70 min,90 min,110 min处理骨髓组织,观察不同脱钙处理时长的骨髓组织HE染色、免疫组织化学染色(EnVision法染TdT、CD56、MPO)和特殊染色(Gomori网状纤维染色)效果。结果8%盐酸脱钙液处理90 min与70 min和110 min相比,骨髓组织石蜡切片组织结构保持较完整,HE染色后形态结构清晰可辨,对比度较好,免疫组化染色定位准确、背景清楚,网状纤维染色粗细清晰可辨。结论8%盐酸脱钙液对骨髓组织90 min脱钙效果较好。

脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的:探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法:收集36例骨髓活检穿刺组织,分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组,每组12例,分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织,将同一例标本分成两份,观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果:A液、B液的脱钙时间比C液短;3种方法的HE染色效果均较好;而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好,但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论:采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法,实验操作简便,HE染色和免疫组化染色效果较为满意。

三种脱钙液对骨组织表面脱钙效果的比较

骨组织是一种致密的结缔组织,细胞基质含有大量钙盐沉积,质地坚硬[1]。骨组织必须进行脱钙处理才能制片,而脱钙过度会导致骨组织的结构被破坏,相关细胞表面抗原丢失,严重影响HE染色制片和免疫组化制片效果,影响病理诊断[2]。脱钙液种类繁多,且尚未有相关文献报道各种脱钙液表面脱钙效果的优劣。本实验拟采用临床工作中常用的三种脱钙液对骨组织表面脱钙效果进行比较,为病理医师选用合适的表面脱钙液提供参考。

不同脱钙液对骨髓组织免疫组化染色的影响

骨髓检查是指通过骨髓穿刺和骨髓活检获得的骨髓样本的病理分析,可全面评估骨髓细胞的增生状况,以及观察不同细胞间的相互关系和分布情况,从而用于多种疾病的诊断,包括白血病、多发性骨髓瘤及淋巴瘤等[1-2]。临床上需借助免疫组化方法来鉴别和分级各系造血细胞,但骨髓组织中除含有各种造血细胞,还含有一定的碳酸钙和磷酸钙,需经脱钙处理才能进行完整的切片、免疫组化及荧光染色[3]。若脱钙不全,切片易损坏刀刃,且染色时组织易脱片[4]。

混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析

目的 比较不同脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响.方法 选取16例大鼠胫骨标本,运用两种常用的脱钙液(混合脱钙液和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响.结果 两种脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别.结论 混合脱钙液时间最短,但切片和染色效果最差;EDTA脱钙液对骨组织损伤小,HE染色效果最好,但用时较长.

病理组织脱钙液传统组方的比较分析

病理组织脱钙液传统组方种类繁多，组分剂量差异较大。本文就相关溶质、溶剂、溶液的性质及对病理组织成分的作用，对各种传统组方质量进行比较分析（传统组方组分剂量的统一换算以100ml溶液量计，组织钙盐以碳酸钙计）。

改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察

骨髓活检结合免疫组化染色对于血液系统疾病诊断、判断临床预后具有重要意义。骨髓组织细胞种类多和组织学形态丰富,部分病例需结合免疫组化染色以明确诊断。骨髓组织质地较硬,需脱钙后才能进行常规制片和免疫组化染色。

不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下颌骨免疫组化结果的影响

传统骨组织脱钙常采用酸性液体，但易导致组织结构难以保持完整，影响病理学进一步诊断。骨组织用乙二胺四乙酸二钠（EDTA）作为脱钙液进行脱钙，能使骨组织中的蛋白抗原保持完好，组织细胞结构保持完整清晰。已有大量文献报道肯定了EDTA脱钙液的作用，但对EDTA脱钙液的适宜浓度和pH值报道不一。本文旨在探讨不同浓度和pH值EDTA脱钙液对下颌骨组织HE形态和免疫组化结果的影响。

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

背景:由于骨和骨髓组织结构非常特殊,在常规的病理制片过程中,要同时显示坚韧质硬的骨组织和含有多种幼稚娇嫩造血细胞的骨髓组织是非常困难的。目的:选择一种既能完全除去骨组织中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞结构不受破坏的最佳脱钙液。方法:将含骨髓组织的犬长骨组织随机分4组,同等条件下,14%硝酸甲醛生理盐水溶液;14%硝酸水溶液;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液和20%甲盐酸水溶液4种不同脱钙液脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、苏木精-伊红染色,镜下观察,对比4种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精-伊红染色效果。结果与结论:14%硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果最佳;14%硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和苏木精-伊红染色的效果最差;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精-伊红染色效果都比14%硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差;20%甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小,脱钙效果好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果佳,介于20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和14%硝酸水溶液组之间。结果表明,4种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及苏木精-伊红染色效果比较,14%硝酸甲醛生理盐水溶液>20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液>20%甲盐酸水溶液>14%硝酸水溶液;14%硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。

复合配方脱钙液处理兔股骨髁标本

背景:兔骨缺损修复模型被广泛应用于骨替代材料的研究中,在实验过程中经常需要对兔股骨髁标本进行脱钙制作病理切片,但普遍存在脱钙困难的问题。目的:尝试应用一种复合脱钙液实现软骨覆盖兔股骨髁有效脱钙。方法:取兔股骨髁标本12个,分为2组,分别用自制复合脱钙液和普通甲酸脱钙液进行常温条件下的脱钙处理,复合脱钙液的组成比例如下:盐酸8mL,甲酸10mL,醋酸5mL,中性甲醛固定液100mL。在经过1周的常规脱钙过程之后,进行标准化的脱水、包埋、切片和染色程序。统计切片的完整率,观察苏木精-伊红染色后切片的质量和细微结构,并对两种脱钙液的经济性进行比较。结果与结论:复合脱钙液组的切片完整率显著高于甲酸组,差异有显著性意义(74%vs18%,P<0.05)。复合脱钙液组的切片着色优良,背景清亮,微观结构清晰,细微结构保存完整,不同组织染色对比鲜明。该复合脱钙液的应用成本较常用的甲酸脱钙液降低65%。提示自制复合脱钙液可有效解决兔骨缺损修复模型实验中的脱钙困难问题,且复合脱钙液配置简便,成本低。

四种脱钙液对骨组织HE和免疫组化染色的影响

骨是由黏多糖和蛋白纤维构成的有机质及沉积于其中的无机盐组成，无机盐主要是羟基磷灰石结晶，其中大部分为磷酸钙和碳酸钙；由于骨的特殊构成，使骨组织质地较硬，较难制成切片影响诊断工作，因此制片过程中必须对其脱钙。

一种简便快捷的骨及钙化组织脱钙液

脱钙是骨组织制片染色技术的关键步骤。在实践工作中以硝酸、盐酸为主配制的脱钙液,脱钙迅速,但对组织破坏程度大,影响以后染色。螯合剂是一种缓慢的脱钙剂,脱钙后染色分化仍佳,酶也不受破坏,但脱钙需花费2周至几个月时间,不能满足病理科日常工作的需求[1]。现介绍一种混合脱钙液,它既对组织损害小,又简便快捷。它可促进脱钙并加快脱钙速度,同时又防止纤维性组织过度膨胀,减少对组织的破坏及对染色的影响。经此脱钙液制成的组织切片薄厚均匀,平坦完整,组织形态和细胞清晰,着色鲜艳。

两种盐酸脱钙液对骨髓HE及免疫组化染色的影响

目的探讨两种盐酸脱钙液对骨髓组织染色质量的影响。方法选取首都医科大学附属北京同仁医院的骨髓穿刺标本299例,在常温下分别采用8%盐酸甲醛脱钙175例(实验组),30%盐酸甲醛脱钙124例(对照组),比较两组的脱钙时间、苏木素-伊红(HE)染色效果。另从两组中分别选取正常骨髓标本36例,以免疫组化Envision法染色,观察髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、CD61、CD235a及Ki-67抗原表达情况。结果对照组的脱钙时间为(50.42±13.91)分钟,实验组的脱钙时间为(66.83±17.59)分钟,经比较差异无显著性(P>0.05),且HE染色效果均佳;MPO和CD235a在两组中表达差异性不大,CD61在实验组中高表达率为97.2%(35/36),在对照组中高表达率为83.3%(30/36),差异有显著性(P<0.05);Ki-67在实验组中高表达率为97.2%(35/36),在对照组中高表达率为8.3%(3/36),差异有显著性(P<0.05)。结论 8%盐酸甲醛脱钙液脱钙后HE及免疫组化染色效果均佳,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。

骨组织病理制片三种脱钙液的比较

目的比较三种文献报道的改良脱钙液的效果,获得简单、便捷、适用于临床病理制片的脱钙液。方法考察在常温及37℃恒温条件下,三种改良脱钙液对骨组织的脱钙及染色效果。结果常温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为72h左右,组织结构损伤小,改良脱钙液Ⅰ、Ⅲ染色效果佳;37℃恒温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为8～14h,改良脱钙液Ⅰ镜下组织结构破坏,改良脱钙液Ⅱ组织结构破坏且染色效果不佳,改良脱钙液Ⅲ组织结构损伤小,染色效果佳。结论 37℃恒温条件下,改良脱钙液Ⅲ是较适合于临床病理制片的脱钙溶液。

改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用

目的探讨改良混合脱钙液在临床骨髓组织活检中的应用。方法选取临床骨髓穿刺活检病例188例,分别采用改良混合脱钙液(改良混合脱钙液组,146例)与传统硝酸类脱钙液(硝酸类脱钙液组,42例)在常温下进行脱钙处理,比较两组脱钙的时间、制成切片的质量、HE染色效果及免疫组化表型表达情况。结果改良混合脱钙液的脱钙时间短于硝酸类脱钙液,改良混合脱钙液的切片质量良好为97.9%(143/146),HE染色效果良好为98.6%(144/146);硝酸类脱钙液切片质量良好为61.9%(26/42),HE染色效果良好为54.8%(23/42)。改良混合脱钙液组标本免疫组化表达效果优于硝酸类脱钙液组。结论改良混合脱钙液效果良好、脱钙时间短、染色效果佳、组织抗原不丢失、实用性强,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响。方法选取50例手术切除的新鲜骨标本,运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响。结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。结论 14%硝酸脱钙能力最强,用时间最短,染色的效果最差;10%盐酸对骨组织的损伤小,HE染色的效果最好,但用时较长;20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间;EDTA脱钙液脱钙用时最长,对骨组织的损伤最小。