钙激活的氯离子通道蛋白A在肿瘤形成中作用的研究进展

钙激活的氯离子通道蛋白A(TMEM16A)是钙激活氯离子通道的基本分子构成,其在肿瘤形成中的作用越来越受到关注。TMEM16A的过表达与许多肿瘤的不良预后密切相关。在肿瘤诊断方面,TMEM16A被认为是高效的生物标记物。最近研究表明,TMEM16A是通过在离子通道中的作用促进肿瘤形成。随着研究不断进展,TMEM16A将来有可能成为癌症诊疗的有效靶点。

人钙离子激活的氯离子通道的结构与功能

钙离子激活的氯离子通道(CLCA)是一种新型的氯离子通道,广泛分布于分泌型上皮组织中,介导一系列重要的病理生理功能。先后在牛、鼠、人和猪4个种属中发现,每一个CLCA家族成员在不同种属中有不同的表达部位和特定的功能。该文就4种人钙离子激活的氯离子通道—hCLCA1、hCLCA2、hCLCA3和hCLCA4进行综述,介绍结构和组织分布特点,简述在气道黏液高分泌、支气管哮喘、肺囊性纤维化、细胞周期控制、肿瘤发生发展、平滑肌收缩和视网膜病中的作用。

钙离子激活的氯离子通道蛋白TMEM16A在女性生殖系统中的研究进展

作为钙离子激活的氯离子通道(Ca CCs)分子基础的跨膜蛋白16A(TMEM16A)分布于人体多种组织器官中,对许多生理和病理过程具有重要意义。近年来,对TMEM16A在女性生殖系统中分布和作用的研究逐渐增多,比如参与子宫平滑肌的收缩、影响卵巢颗粒细胞雌激素的合成以及调节卵母细胞的形态等,这些都提示了TMEM16A在女性生殖系统中的生理重要性。现本文将就TMEM16A在女性生殖系统各方面的最新研究进展进行综述。

ERK1/2通路在低氧上调大鼠PASMCs钙激活性氯离子通道表达的作用

目的:探讨钙激活性氯离子通道(CLCA2)在大鼠低氧性肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中m RNA和蛋白表达的变化及其与ERK1/2信号通路的关系。方法:PASMCs随机分为:常氧组(N组),低氧组(H组),DMSO对照组(D组),U0126干预组(U组),Staurosporine aglycone干预组(SA组),采用免疫印迹法检测CLCA2蛋白的表达;选用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CLCA2 m RNA水平的表达。结果:PASMCs中CLCA2m RNA和蛋白的表达量,H组较N组明显上调(P<0.01);U组较D组明显上调(P<0.01);SA组较D组m RNA的表达显著下调(P<0.01),蛋白的表达轻微下调。结论:低氧可上调CLCA2中m RNA和蛋白在PASMCs的表达;ERK1/2通路激活剂-Staurosporine aglycone能下调CLCA2在PASMCs中m RNA和蛋白的表达量;ERK1/2通路抑制剂-U0126可上调CLCA2在PASMCs中m RNA和蛋白的表达量。

TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究

目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效率和表达效果,杀稻瘟菌素(blasticidin)进行抗生素筛选,获取稳定表达TMEM16A的FRT细胞株。RT-PCR和免疫荧光检测TMEM16A于FRT细胞的表达情况;倒置荧光显微镜下观察TMEM16A在FRT细胞中的表达和定位;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFPH148Q/I152L检测TMEM16A钙激活氯离子通道的功能。结果:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切的琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明目的基因TMEM16A成功克隆到真核表达载体pUB6/V5中;RT-PCR和免疫荧光实验结果表明经杀稻瘟菌素筛选后的FRT细胞在mRNA和蛋白水平表达TMEM16A,倒置显微镜下观察结果表明TMEM16A在FRT细胞膜上有表达;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L证实稳定表达于FRT细胞的TMEM16A具有经典的钙激活氯离子通道特性。结论:FRT细胞可高效表达TMEM16A。TMEM16A是钙激活氯离子通道的分子基础。

地尔硫卓通过下调钙激活氯离子通道抑制肝癌细胞增殖和运动

目的观察钙离子通道抑制剂地尔硫卓对肝癌MHCC97H、7402细胞增殖和运动侵袭能力的作用,探讨其相应机制。方法采用不同浓度地尔硫卓(0、25、50、100、200、400μmol/L)干预肝癌MHCC97H、7402细胞不同时间(12、24、48 h)后,用MTT法测定地尔硫卓对肝癌细胞增殖的影响,体外细胞划痕实验检测处理后肝癌细胞运动侵袭能力;通过RT-PCR和免疫细胞化学检测地尔硫卓对肝癌细胞中TMEM16A mRNA和蛋白表达水平的影响。结果地尔硫卓能够有效抑制肝癌MHCC97H、7402细胞的增殖和运动侵袭能力,且具有一定的时间和浓度依赖性特点(P<0.05)。其中,100μmol/L浓度的地尔硫卓作用24 h对MHCC97H肝癌细胞抑制较明显,TMEM16A mRNA和蛋白表达减少(P<0.05),而50μmol/L浓度的地尔硫卓作用48 h对7402肝癌细胞抑制较明显,TMEM16A mRNA和蛋白表达减少(P<0.05)。结论地尔硫卓能一过性抑制MHCC97H、7402肝癌细胞侵袭,这种作用可能与其通过调节钙离子通道TMEM16A的mRNA和蛋白表达而发挥肿瘤抑制作用有关。

人钙离子激活的氯离子通道在慢性鼻窦炎鼻窦黏膜中表达的研究

目的观察人钙离子激活的氯离子通道1(hCLCA1)在慢性鼻窦炎筛窦黏膜中的表达,探讨其在慢性鼻窦炎发病机制中的作用。方法取慢性鼻窦炎患者筛窦黏膜10例,另取10例正常筛窦黏膜作为对照。应用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组鼻窦黏膜中hCLCA1mRNA的表达,应用免疫荧光方法观察hCLCA1蛋白在各组鼻窦黏膜中的表达,比较hCLCA1mRNA及蛋白在各组中的表达情况。结果 hCLCA1表达于鼻窦黏膜上皮的杯状细胞。慢性鼻窦炎组hCLCA1mRNA表达水平及阳性细胞面积比(51.6%±4.5%)高于对照组(7.2%±5.1%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论在基因和蛋白水平上,hCLCA1在慢性鼻窦炎鼻窦黏膜中均有明显表达,其在慢性鼻窦炎的发病机制中可能具有重要作用,可能与上皮杯状细胞的增生及黏液高分泌有关。

前列腺癌组织钙离子激活氯离子通道蛋白7的表达及其与术后生化复发的关系探讨

目的探讨前列腺癌组织钙离子激活氯离子通道蛋白7(ANO7)的表达及其与术后生化复发的关系。方法回顾性选取空军军医大学第一附属医院于2014年3月至2018年4月收治的168例行根治性切除术治疗的前列腺癌患者作为研究对象。采用免疫组化法检测患者的前列腺癌组织与癌旁组织ANO7的表达情况,并根据根治术后3年内生化复发情况将患者分为生化复发组(n=30)与未生化复发组(n=138),分析前列腺癌组织ANO7的阳性表达与患者术后生化复发的关系。结果前列腺癌组织ANO7的阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05);生化复发组前列腺癌组织ANO7的阳性表达率低于未生化复发组(P<0.05);临床分期、术前血清前列腺特异性抗原(PSA)水平、标本Gleason评分、手术切缘是否阳性,有无包膜侵犯、精囊侵犯、神经周围侵犯、血管侵犯,以及前列腺癌组织ANO7表达均是前列腺癌患者术后生化复发的影响因素(P<0.05)。结论前列腺癌组织ANO7呈低表达,且ANO7阳性表达是前列腺癌患者术后发生生化复发的保护因素。

牡荆素调节环磷酸腺苷激活的交换蛋白1/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ信号对大鼠心肌梗死后心肌肥大与纤维化的作用

目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建立MI模型,假手术组只穿线不结扎。检测大鼠心功能变化;苏木精-伊红(HE)染色观察心脏病理学变化,天狼星红染色观察心脏纤维化,电镜观察心肌线粒体损伤情况;Western Blot检测Epac1、CaMKⅡ等蛋白变化。结果(1)大鼠MI 4周后,与假手术组比较MI组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)均降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)和舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)增加(P<0.01),牡荆素组大鼠心脏LVIDs、LVIDd、LVPWs和LVPWd较MI组降低,LVFS和LVEF均升高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)牡荆素可降低大鼠心脏重量指数(P<0.01),并减小MI组大鼠心肌细胞横截面积,同时减轻大鼠左心室壁心肌纤维化程度(P<0.01),牡荆素组大鼠心肌胞浆内线粒体肿胀较MI组减轻,线粒体形态较完整,空泡形成较少;(3)Western Blot结果显示牡荆素抑制大鼠MI后Epac1激活(P<0.01),抑制其下游CaMKⅡ激活与细胞外调节激酶的磷酸化(P<0.01),同时可抑制B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)上调(P<0.05),上调Bcl-2(P<0.01),抑制凋亡蛋白裂解半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase 3)的活化(P<0.05)。结论牡荆素可通过抑制Epac1/CaMKⅡ通路,改善大鼠MI后心脏功能,抑制心肌肥大和纤维化。

钙激活性氯离子通道抑制剂对肺动脉平滑肌作用的研究进展

1肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）的钙激活性氯离子通道（CaCCs）与跨膜蛋白16A（TMEM16A）肺血管张力维持需要CaCCs参与。人们对不同组织（包括肺动脉）中平滑肌细胞上CaCCs进行了广泛研究,发现其通道活性在维持肺血管张力中起着重要作用[1-2]。CaCCs如何参与平滑肌细胞收缩,现有2种假设机制[3-4]：（1）＂ryanodine受体（RyR）通道＂机制。

跨膜蛋白16A:钙激活氯通道的最新进展

钙激活氯离子通道(calcium-activated chloride channels,CaCCs)介导了众多生理过程,包括跨上皮离子与液体分泌、心肌和神经兴奋、感觉传导、平滑肌收缩和受精过程等,但目前对于其分子基础等重要问题尚未研究清楚.综述了最新报道的CaCCs分子基础跨膜蛋白16A(TMEM16A)的发现过程、基因结构和功能、离子通道电生理特性、相关病理与药理功能的一些热点问题,并展望了该研究领域的发展趋势.

基于钙激活氯离子通道的Piezo1通道调节剂高通量筛选模型的构建

目的构建基于钙激活氯离子通道蛋白1(ANO1)的Piezo1调节剂高通量筛选模型。方法RT-PCR和Western印迹法分别检测Fischer大鼠甲状腺上皮(FRT)细胞Piezo1 mRNA和蛋白表达。构建共表达增强型绿色荧光蛋白标记的ANO1(ANO1-EGFP)和黄色荧光蛋白双突变体(YFP-H148Q/I152L)的FRT细胞株(简称FRT模型细胞),倒置荧光显微镜检测ANO1-EGFP和YFP-H148Q/I152L在FRT模型细胞中的表达,加入ANO1激活剂离子霉素10μmol·L^-1,应用荧光淬灭动力学实验检测并计算FRT模型细胞相对荧光强度变化值。加入Piezo1调节剂Jedi1(200μmol·L^-1),Jedi2(150μmol·L^-1),Yoda1(20μmol·L^-1)和Gd3+(20μmol·L^-1),应用荧光淬灭动力学实验检测并计算FRT模型细胞相对荧光强度变化值。加入Piezo1激活剂Jedi1,Jedi2和Yoda1,按0.2,1,5,10,25,50,75,100,200,300,400,500,600,700,800,900和1000μmol·L^-1设置浓度梯度,应用荧光淬灭动力学实验检测并计算FRT模型细胞相对荧光强度变化值并绘制浓度依赖曲线。向FRT细胞中加入Yoda1,按同样的方法设置浓度梯度,通过Fura-2/AM荧光探针检测细胞内的钙信号随Yoda1浓度的变化,分析细胞内Ca^2+浓度与FRT模型细胞相对荧光强度变化值之间的关系。计算模型Z′因子及信噪比。结果RT-PCR、DNA测序比对和Western印迹结果表明,FRT细胞内源性表达Piezo1。ANO1-EGFP和YFP-H148Q/I152L表达清晰,位置正确,并且ANO1-EGFP被离子霉素激活后模型荧光淬灭,证实转染基因表达的蛋白具有生物学活性,FRT模型细胞构建成功。FRT模型细胞加入Jedi1,Jedi2和Yoda1荧光均淬灭,加入Gd3+后再加入Yoda1荧光不淬灭,证实模型可以用于筛选Piezo1通道调节剂;在FRT模型细胞中离子霉素的EC50为(7.76±0.53)μmol·L^-1,Yoda1的EC50为(17.27±1.21)μmol·L^-1,Jedi1的EC50为(200.60±4.46)μmol·L^-1,Jedi2的EC50为(158.10±4.65)μmol·L^-1。FRT模型细胞相对荧光强度变化值与细胞内Ca^2+浓度呈正相关,模型能敏感地反应细胞内钙信号变化。模型Z′因子为0.82,信噪比为13.29∶1,可用于Piezo1通道调节剂高通量筛选。结论成功构建了可快速、准确、便捷筛选Piezo1通道激活剂和抑制剂的高通量筛选模型。

钙激活氯通道蛋白ANO1在小鼠主动脉平滑肌细胞的表达及其功能鉴定

探讨钙激活氯通道蛋白ANO1在C57BL/6小鼠主动脉平滑肌细胞中的表达及其功能特性。运用胶原酶消化法获得原代培养的小鼠主动脉平滑肌细胞,流式细胞术检测平滑肌细胞纯度;应用RT-PCR检测主动脉平滑肌细胞ANO1 mRNA的表达;免疫印迹检测ANO1蛋白在主动脉平滑肌细胞的表达情况;应用荧光淬灭动力学实验检测ANO1钙激活氯通道的功能特性。原代培养成功获得主动脉平滑肌细胞;RT-PCR结果分析表明,主动脉平滑肌细胞在mRNA水平有ANO1表达;免疫印迹显示主动脉平滑肌细胞蛋白水平有ANO1表达;荧光淬灭动力学实验证实表达在主动脉平滑肌细胞的ANO1具有阴离子转运功能,即钙激活氯通道典型特性。小鼠主动脉平滑肌细胞表达的ANO1是钙激活氯通道的分子基础。

补肾活血复方介导钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白、受磷蛋白调节内质网应激缓解慢性心衰大鼠心肌损伤

目的观察补肾活血复方对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠钙转运蛋白肌浆网上的心肌钙转运蛋白(sarcoplasmic reticulum Ca 2+-ATPase2a,SERCA2a)、受磷蛋白(phospholamban,PLB)的影响,进一步探讨内质网应激与心肌损伤、心衰的相互关系。方法将雄性SPF级SD大鼠60只,随机选取15只为分成空白组,其余45只进行冠脉结扎后力竭式游泳构建CHF造型,再随机分配为心衰组、补肾活血复方组、卡托普利组。空白组与补肾活血复方组,分别应用等剂量的生理盐水与补肾活血复方(9.2 g/kg)灌胃,卡托普利组运用卡托普利(12.5 mg/kg)灌胃,各组干预4周后,运用动物心脏超声仪器记录心率、射血分数、收缩—舒张心室内径等。各组N段脑钠肽前体含量,苏木精—伊红染色观察大鼠心肌损伤情况,同时检测:SERCA2a、PLB。结果与空白组相比,模型组的SERCA2a含量明显降低。与模型组相比,空白组、补肾活血复方组、卡托普利组表达明显升高(P<0.01)。补肾活血复方组、卡托普利组两组相比差异无统计学意义。与空白组相比,模型组的SERCA2a含量明显升高;与模型组相比,空白组、补肾活血复方组、卡托普利组表达明显降低,补肾活血复方组、卡托普利组相比差异无统计学意义。结论补肾活血复方可以有效阻止心肌内质网应激反应,协调心肌细胞中Ca 2+平衡稳态,恢复CHF大鼠显著抑制CHF大鼠心肌组织中的内质网应激反应。补肾活血复方汤对心力衰竭大鼠心功能的改善可能来源于对SERCA2a、PLB蛋白的调控作用。

氯离子通道蛋白1在心肌纤维化进程中的表达特征

目的探讨氯离子通道蛋白1(ANO1)在心肌纤维化进程中的表达特征,为抑制心肌纤维化寻找新的靶点。方法采用冠状动脉结扎法制作大鼠心肌梗死模型,1周后取心肌梗死组和假手术组大鼠左心室组织,采用免疫组织化学染色、免疫荧光双标记检测梗死区和正常组织ANO1表达的变化;体外分离培养心肌成纤维细胞,采用免疫荧光标记、Real-time PCR和Western blotting检测心肌成纤维细胞中ANO1表达情况。结果制造模型1周后心肌梗死区ANO1表达明显增强,并与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共表达; ANO1蛋白明显表达于心肌成纤维细胞的核膜和胞质中,且表达强度和α-SMA具有相同的趋势;与刚分离贴壁心肌纤维细胞相比,ANO1在培养和48h后的心肌成纤维细胞中表达量明显增强。结论 ANO1在心肌成纤维细胞转化为成肌纤维细胞过程中表达量增加,提示ANO1可能在心肌纤维化进程中发挥重要调控作用。

乙酰胆碱激活的钾离子通道在心肌中的分布特点及其电生理作用

乙酰胆碱(Ach)激活的钾离子通道(KAch)是内向整流钾通道家族中的一员,是由Kir3.1和Kir3.4蛋白以2∶2组成的异四聚体。在传导系统和心房肌细胞膜表达丰富,在心室组织中有少量表达,且沿心肌细胞T管分布。通道活性受Ach等配体激活的G蛋白、细胞外Na+、细胞内PH值等调节,Ach激活的钾电流(IKAch)在维持细胞膜静息电位和动作电位3期复极中起重要作用。IKAch的激活促使心肌细胞膜超极化、兴奋性降低、动作电位时程缩短、自律性降低,IKAch不仅与心房颤动等室上性心律失常密切相关,且其基因突变丧失电生理特性是长QT综合征的病因之一,是心律失常治疗的潜在靶点。

钙激活Cl^-通道蛋白在急性呼吸窘迫综合征患者体外气道上皮细胞中的表达及其作用实验研究

目的:探讨钙激活Cl^-通道蛋白(CLCA)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)体外气道上皮细胞中的蛋白表达情况,并初步探讨其作用。方法:运用脂多糖(LPS)刺激16HBE细胞系,Western Blot检测hCLCA1蛋白表达水平与ARDS的时程关系;运用hCLCA1-siRNA干扰16HBE细胞系中hCLCA1的表达,real-time RT-PCR法检测细胞系中hCLCA1的mRNA和蛋白表达水平,验证siRNA是否对目的基因成功抑制。同时检测炎症因子的mRNA表达变化水平,观察CLCA的降低与炎症因子表达的关系。结果:Western Blot结果显示:16HBE细胞系加LPS(1μg/ml)刺激12h、24h后hCLCA1的蛋白表达量下降,且LPS刺激24h后hCLCA1的降低有统计学差异(P<0.05)。real-time RT-PCR检测证实hCLCA1-siRNA对目的基因成功抑制,表明成功构建hCLCA1低表达的16HBE细胞系;同时real-time RT-PCR结果显示TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平升高(P<0.05)。结论:CLCA在LPS刺激后的培养HBE细胞系中蛋白表达水平下降,并表现为时间依赖性。抑制HBE细胞系hCLCA1的基因表达,则该细胞分泌炎症因子的水平升高,推测CLCA在ARDS体外气道上皮细胞分泌炎症介质过程中发挥负性调节作用。

过表达氯离子通道蛋白3对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥厚的预防作用与机制

目的探讨氯离子通道蛋白3(ClC-3)基因过表达对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥厚的预防作用及机制。方法运用腺相关病毒9(AAV9)感染方法构建ClC-3过表达小鼠模型和原代心肌细胞模型,采用蛋白质印迹法与qRT-PCR检测小鼠心脏组织和原代心肌细胞中ClC-3的表达以确定模型是否建立成功。32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,每组8只。对照组连续7 d腹腔注射生理盐水,ISO组连续7 d腹腔注射ISO 7.5 mg•kg^-1•d^-1,AAV9-bv+ISO组用空白载体AAV9病毒颗粒感染小鼠4周后连续7 d腹腔注射ISO 7.5 mg•kg^-1•d^-1,AAV9-ClC-3+ISO组用携带ClC-3基因的AAV9病毒颗粒感染小鼠4周后连续7 d腹腔注射ISO 7.5 mg•kg^-1•d^-1。采用心脏超声检查小鼠心功能变化,计算心脏体重指数,采用qRT-PCR检测心肌组织中心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)的mRNA表达水平,H-E染色观察左心室形态学变化,苦味酸-天狼星红(PSR)染色观察心脏组织胶原纤维变化。取乳鼠摘出心脏,体外培养原代心肌细胞并分为4组,对照组未予任何干预,ISO组用0.1μmol/L ISO干预48 h,AAV9-ClC-3组用携带ClC-3基因的AAV9病毒颗粒感染细胞48 h,AAV9-ClC-3+ISO组用携带ClC-3基因的AAV9病毒颗粒和0.1μmol/L ISO共同干预48 h。采用芯片膜片钳技术检测小鼠原代心肌细胞的容积激活性氯电流(ICl,vol)。结果蛋白质印迹法和qRT-PCR检测结果均表明ClC-3过表达小鼠和原代心肌细胞模型成功建立。AAV9介导的ClC-3过表达能缓解ISO诱导的小鼠心脏体重指数、收缩末期室间隔厚度、收缩期左室后壁厚度和舒张期左室后壁厚度的增加,改善心脏组织形态学异常和心脏纤维化,减少心脏组织中ANP、BNP mRNA表达的增加,并能体外抑制ISO导致的心肌细胞ICl,vol降低。结论ClC-3过表达可预防ISO诱导的小鼠心肌肥厚,其机制可能与心肌细胞ICl,vol激活有关。

豆蔻酰佛波醇乙酯对人心房肌细胞肿胀激活的氯离子电流的调节作用

目的通过全细胞膜片钳技术研究蛋白激酶C(PKC)激动剂豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)对人心房肌细胞肿胀激活的氯离子电流(ICl.swell)的作用。方法术中取患者右心房组织,酶解分离出心房肌细胞。全细胞膜片钳技术记录氯离子电流。低渗台氏液灌流激活胞肿胀激活的氯离子电流后再加入PMA,观察电流变化。结果胞肿胀激活的氯离子电流达到稳定状态后再用含有1μmol/L PMA的低渗台氏液灌流,从-110 m V到+60 m V,除了在-10 m V,电流密度均增加(P<0.05,n=7)。该效应在洗脱后或者加入氯离子电流阻断剂二异氰酸二磺酸后减弱。结论该研究通过全细胞膜片钳技术观察到蛋白激酶C激动剂PMA可以增强人心房肌细胞ICl.swell。但对其机制,还需要进一步研究。

脑苷肌肽对有机磷中毒性迟发性神经病变大鼠学习记忆能力及血浆钙激活的中性蛋白酶、神经疾病靶标酯酶影响研究

目的:探讨脑苷肌肽注射液对有机磷中毒性迟发性神经病变(OPIDN)大鼠学习记忆能力及血浆钙激活的中性蛋白酶(CANP)、神经疾病靶标酯酶(NTE)的影响。方法:先对健康雄性SD大鼠进行学习记忆功能筛选,选择其中20只大鼠作为空白组,而后对其余大鼠进行乐果乳油给药造模,乐果乳油给药14d后选择其中症状相似的60只完全随机分为三组:对照组[蒸馏水1.25ml/(kg·d)]、甲钴胺组[甲钴胺片1.25mg/(kg·d)]、联合组[甲钴胺片1.25mg/(kg·d)、脑苷肌肽注射液1.25ml/(kg·d)]。对不同分组的大鼠进行相应的治疗,测定治疗4周后大鼠学习记忆能力,分别测定治疗2、4周后大鼠血浆组织中NTE和CANP表达水平。结果:染毒大鼠干预前血浆NTE蛋白水平显著低于空白组大鼠(P<0.05),甲钴胺组和联合组大鼠治疗后血浆NTE水平上升(P<0.05),其中联合组大鼠治疗后血浆NTE水平最高(P<0.05)。染毒大鼠干预前血浆CANP蛋白水平显著高于空白组大鼠(P<0.05),甲钴胺组和联合组大鼠治疗后血浆CANP水平下降(P<0.05),其中联合组大鼠治疗后血浆CANP水平最低(P<0.05)。染毒后的三组大鼠中,联合组大鼠记忆再现能力最佳(P<0.05)。结论:脑苷肌肽注射液对于OPIDN大鼠的记忆能力和神经细胞损伤修复均具有积极作用。